周期长。

近年来，由于分子标记技术的发展，人们已可将复杂的数量性状进行分解，象研究质量性状基因样对控制数量性状的多个基因进行研究。

是在高密度的遗传图图谱基础上，通过定实验设计，获得分子标记，借助软件分析确定控制性状的基因在染色体上的位置。

当目标性状由少数几个基因控制时用标记选择，对发掘遗传潜力非常有效。

然而，当目标性质由多个基因控制时如产量，由于选择的世代较多，加剧了标记与位点重组，降低了标记选择的效果。

第三章结论和建议综上所述，尽管分子标记有很多优点，但不同的分子标记技术仍存在各自的缺点，使其应用受到限制。

但这些分子标记技术相互结合使用或能相互转化，其多态性丰富的优点就将得以体现。

随着分子生物学的发展，相信各种分子标记技术会逐步完善，或者出现新的分子标记技术，而成为生命科学的种简便快捷高效的分析手段。

另外，分子标记技术的应用，将使植物遗传图谱的密度和质量不断提高，在植物遗传育种领域具有更广阔的应用前景。

参考文献蒋彩虹，王元英，孙玉合和标记技术应用进展中国烟草科学黎裕，贾继增，王天宇分子标记的种类及其发展生物技术通报，肖扬几种新星分子标记技术在中国香菇种质资源遗传多样性研究中的应用华中农业学，孙秀峰，陈振德，李德全分子标记及其在蔬菜遗传育种中的应用山东农业大学学报自然科学版谭亮萍，吴朝林，曾化伟分子标记技术及其在蔬菜遗传育种研究中的应用长江蔬菜张新叶，黄发新，张亚东分子标记技术在林木遗传育种中的应用湖北林业科技引言近年来，分子生物技术的发展为植物育种改良提供了种基于变异的新型遗传标记分子标记。

分子标记研究与应用的迅速发展为植物遗传育种注入新的活力，并使传统育种技术发生了深刻的变化。

分子标记本质上是指能反映生物个体或种群间基因组中种差异的特异性片段，也称为的指纹图谱。

分子标记的研究始于年，现已有数十种标记技术。

与传统的遗传标记相比，分子标记有很多优点。

以为基础的指纹技术大大加快了分子标记的研究和利用，广泛应用于植物遗传育种高密度遗传图谱的构建基因定位和克隆植物亲缘关系鉴别及遗传多样性研究分子标记辅助选择育种等领域。

第章分子标记技术分子标记技术的类型基于分子杂交技术的分子标记这类标记是基于序列的差异，通过电泳技术分离不同个体的限制内切片段后，利用标记探针进行杂交，来揭示所研究个体的多态性。

标记标记是发展最早的标记技术。

该方法所产生的多态性是由于限制性内切酶酶切位点或位点间区段发生突变造成的。

由于不同的限制性内切酶各有其特异的识序列和切割位点，特定物种的基因组经种限制性内切酶完全酶切后，会产生些分子量不同的限制性片段。

在生物的遗传进化中，由于基因组内出现的由转换插入倒位易位缺失等导致的各种变异会引起酶切位点的改变，因此，特定的片段被酶切后可以产生特定大小的不同片段，及特有分子指纹图谱，反映出遗传多态性。

通常分析步骤是的提取的限制性内切酶酶切用片段的凝胶电泳分离片段的杂交分析结果。

对线粒体和叶绿体进行的这种多态性差异检测在年之前就己出现由于线粒核普酸，稳定性比好，但是多态性较差。

标记标记是由加拿大蒙特利尔大学的等首先提出的该技术根据基因组内广泛存在的微卫星序列设计单引物引物通常或端通常锚定个核营酸以增加扩增时的稳定性，对两侧具有反向排列的段序列进行扩增，然后进行电泳染色，根据谱带的有无及大小，来获得不同样品间的分子指纹图谱。

由于广泛分布于真核生物基因组中，其重复单位和重复次数的变异非常丰富，因而可以检测到高的多态性。

加拿大哥伦比亚大学公布了条引物，研究者可以根据不同的材料进行选择张青林和罗正荣，。

不需要预先获得序列信息，仅采用半随机引物扩增，其产物多态性远比，更加丰富，可以提供更多的关于基因组的信息，而且比技术更加稳定可靠，实验重复性更好孙洪等，。

标记简单重复序列又称为微卫星，般为以个碱基为核心序列的串联重复序列，。

真核生物基因组中的分布是广泛并随机的，大约每隔就有个。

它既可以存在于内含子中，又可存在于外显子中。

在不同的生物体间，的数量重复次数和单位拷贝数变异及染色体分布等有着很大的差别。

由于基本核心序列的重复次数不同，因而在不同菌株的间存在多态性。

复制时的链滑动是多态性产生的首要原因，。

每个座位两侧的序列般比较保守，可用于设计特异引物扩增该座位。

第二章结果与分析构建遗传图谱遗传图谱既是遗传研究的重要内容，又是作物资源育种及分子克隆等应用研究的理论依据和基础。

遗传图谱可以为育种工作者提供关于物种完整详细的基本资料，可以很容易将所需要的基因定位，使育种目的性更强，效率更高。

传统的形态和生化方法很难使遗传图精密，很难反映基因组的全部情况。

但随着各种分子标记技术的发展和完善，为构建高饱和度的连锁图提供了有力的工具。

目前已有种蔬菜作物构建了遗传图谱。

亲缘关系和遗传多样性的研究基因型不同的品种或不同亲缘关系的物种，基因组内核苷酸序列存在差异，利用分子标记可以检测出不同品种间的多态性，这些多态性反映了被检测材料的遗传多样性。

在分子图谱帮助下对品种之间的比较可覆盖基因组，大大提高了基因组的可靠性。

可用于品种资源的鉴定与保存，研究作物的起源和发展进化，杂交亲本的选择等。

利用分子标记通过相关性聚类等数量遗传学分析手段，还可以对不同亲缘种间的分类遗传距离系统发育亲缘关系等进行研究，从而确定亲本之间的遗传距离，直到杂交育种亲本选配，减少杂交组合数，有效划分杂种优势群，为提高育种效率提高依据。

指纹库的建立同物种的各个品种间存在着大量的多态性标记，如果品种具有区别于其他品种的独特标记即些特异性片段的组合就称为该品种的指纹。

各品种的独特的指纹片段构成物种的指纹库，它具有类似于人的指纹那样的高度个体特异性和稳定性。

例如魏臻武利用标记技术构建了个苜蓿品种系的指纹图谱，用于苜蓿品种鉴定。

指纹在植物育种中具有广泛应用，例如每个品种指纹差异可直接提供与目标性状有关的水平的信息，避免了环境的干扰，可以大大提高杂交育种中对亲本及后代理想单株的选择效率通过检测品种是否具有该品种特有的指纹片段，可以有效地鉴定品种纯度与真伪新品种登记和品种知识产权保体和叶绿体较小，前三个步骤就完全可能检测出片段的差异，所以往往不必要后面的几个步骤黎裕等，。

真菌线粒体不含内含子和基因间隔区，很少经历重组，进化速度较核快，其分析对真菌种间或种内分类灵敏度高。

具有以下优点变异丰富比形态学更变异稳定，其表现不受环境条件影响比生化变异范围更广泛，区分能力更强无显隐性之分，均为共显性，非等位基因间无上位效应其它变异均是从表型或基因作用产物来研究遗传和变异的，而则是直接研究基因的构成构建连锁图时要比传统方法快得多可探测到数量性状基因位点周洪生，标记在生物体存在的串联重复序列区域中，小卫星串联重复序列基本单元的核普酸数目为个，微卫星重复序列基本单元的核普酸数目为个。

小卫星和微卫星合称为重复数可变串联重复标记。

多位于基因的非编码区，广泛分布，其基本原理与大致相同，只是其限制性内切酶的酶切位点必须位于重复序列之外，且必须采用小卫星序列或微卫星序列作为分子杂交探针。

标记的快速鉴定技术有两种对已知序列不太长的座位，可利用扩增产物电泳结果比较其长度变异对于太长的座位，则只能通过杂交来检测。

基于技术的分子标记技术又叫多聚酶链式反应技术，它采用分子技术模拟核酸在体内的复制，是年美国公司人类遗传学研究室等人首创的项扩增技术。

技术是在模板引物和种脱氧核糖核营酸存在的条件下，聚合酶催化的体外合成反应。

技术的特异性主要决定于引物和模板结合的特异性。

该技术以微量样品为模板，在短时间内合成样品的大量拷贝，结合适宜的检测技术可实现样品的简易快捷检测。

目前广泛使用的分子标记技术大多基于技术。

标记标记是由美国杜邦公司的和加利福尼亚生物研究所的等人创立的分子标记方法，。

该方法使用短的个左右碱基任意序列的寡核普酸片段作为引物，对模板或进行扩增。

由于引物结合位点序列的改变以及引物结合位点之间序列的改变均可导致扩增片段数目和长度的差异，可用普通电泳进行多态性显示和比较。

标记具有如下优点引物通用性。

设计的引物没有种属特异性，无需知道物种序列信息即可使用反应直接性。

不需要克隆制备探针作同位素标记和印迹杂交等预备性工作分析快捷性。

操作简便易行，设备相对简单高灵敏性。

用量极少，灵敏度高，特别适于检测种下变异对纯度要求相对较低分析过程可实现程序化，用套引物可得到大量分子标记，最后可以借助计算机进行统计分析。

但是，不足之处也十分明显其标记为显性标记，不能完全反应个体间的遗传变异，无法鉴别纯合子与杂合子的差异单倍体除外扩增反应条件要求较高，结果重复性差每次反应提供的信息量少可能有假带出现，给实验结果分析带来困难张日清等，与原理类似的有标记和标记。

标记所使用的引物般为个核昔酸，比引物短，因而与模板结合时具有更多的结合位点，扩增的条带数目更多，多态性更高，但其稳定性较差。

标记所使用的引物通常为第二章内容构建遗传图谱数量性状基因位点的分子标记辅助选择第三章结论和建议参考文献亲缘关系和遗传多样性的研究指纹库的建立