使着反向转运的功能。

摘要植物家族基因，在植物的生长发育以及生物与非生物胁迫的应答反应中发挥着十分重要定指数为，可能为不稳定蛋白。

其脂肪系数为，带负电荷的残基总数为个，带正电荷的残基总数为个。

该蛋白氨基酸组成中，含量较高的氨基酸包括亮氨酸个，占丝氨酸个，占甘氨酸个，占，半胱甘酸和色氨酸含量较低，各占氨基酸总数的。

亲疏水性分析利用网站的，选择算法，对蛋白的亲疏水性进行了分析。

结果显示，蛋白序列中第位氨基酸最高分值为，第位氨基酸最低分为，疏水性氨基酸个数总体上多于亲水性氨基酸个数，且平均分值大于亲水性氨基酸。

同时，蛋白的平均亲水系数为。

由此可推测，蛋白属于疏水性蛋模式类似在低钾及高盐下，的表达模式也较为致，均在达到最高。

本结果表明，可能广泛参与了花烟草对非生物逆境胁迫的响应，尤其可能在干旱高盐低钾以及氧化胁迫中发挥重要作用。

讨论植物家族基因，在植物的生长发育以及生物与非生物胁迫的应答反应中发挥着十分重要的作用。

其功能的行使，依靠其保守的结构域，该结构域由大约个氨基酸所组成。

本研究克隆的基因所编码的蛋白，也包含了个结构域图。

所以，可以推测隶属于植物的超家族，能够行使植物家族基因所具有的功能。

基于非生物胁迫下花烟草基因表达模式的分析及其基因克隆的研究遗传学论文。

结果目的基因基于非生物胁迫下花烟草基因表达模式的分析及其基因克隆的研究遗传学论文，占，半胱甘酸和色氨酸含量较低，各占氨基酸总数的。

亲疏水性分析利用网站的，选择算法，对蛋白的亲疏水性进行了分析。

结果显示，蛋白序列中第位氨基酸最高分值为，第位氨基酸最低分为，疏水性氨基酸个数总体上多于亲水性氨基酸个数，且平均分值大于亲水性氨基酸。

同时，蛋白的平均亲水系数为。

由此可推测，蛋白属于疏水性蛋白。

的组织表达分析图蛋白的同源性分析采用的方法，分析了在花烟草不同组织与器官中的表达量。

结果图显示，基因在花中表达量最高，茎中次之，根和叶中表达量较低。

该结果了磷酸化位点预测。

结果表明，蛋白可能含有个丝氨酸位点，个苏氨酸位点，个酪氨酸位点。

由此说明，蛋白能被激酶磷酸化，从而参与花烟草的各种生理生化过程。

功能域与信号肽预测通过网站，对蛋白的保守功能域进行了预测。

结果表明，蛋白的第位氨基酸，存在超家族反向转运蛋白的典型保守结构域图，说明蛋白可能行使着反向转运的功能。

结果目的基因的克隆以花烟草幼苗为材料提取总，反转录后进行扩增，用琼脂糖凝胶电泳，在之间有条清晰明亮的条带图。

条带经回收纯化后送样测序。

将测序结果用进行分析并翻译成蛋白序列。

同时，在危害植物的正常生长，而位于植物细胞膜系统的逆向转运蛋白，则是植物抵御盐胁迫的重要组分。

蛋白在植物中主要定位于质膜及细胞内部，后者又可分为定位于液泡膜及类囊体膜两类，。

蛋白的主要功能是参与植物的盐胁迫响应，除此之外，其还广泛参与了植物的生长发育过程，如调控植物的生长参与叶片及花的发育及花色形成等。

盐胁迫下，位于植物细胞膜系统的和，建立了跨膜的电化学势梯度，并由此驱动将细胞质内过多的排出细胞或区域化到液泡中，从而避免或减轻了对植物细胞的伤害。

跨膜结构预测为了明确是否为跨膜蛋白，采用分析软件，对的跨膜区进行了分析。

从分析的摘要植物家族基因，在植物的生长发育以及生物与非生物胁迫的应答反应中发挥着十分重要的作用。

为了探究花烟草逆向转运蛋白的生理功能，为花烟草耐盐分子机制的研究提供参考。

采用同源克隆的方法进行基因克隆，对花烟草进行非生物胁迫，并运用的方法进行基因表达模式分析。

结果表明，从花烟草中克隆了个属于逆向转运蛋白家族的基因。

该基因的开放阅读框全长为，编码了个氨基酸残基。

生物信息学分析结果表明，该基因编码的蛋白分子量为，等电点为具有逆向转运蛋白家族典型的保守结构域该蛋白属于疏水性蛋白，包含个跨膜区。

基因主要定位于细胞质膜，并含有多个磷酸化位点。

同源性分析的结果显示，基因与美家族反向转运蛋白的典型保守结构域，属于植物的超家族。

该基因的表达具有组织特异性，响应非生物胁迫的诱导，并且对高盐及低钾有强烈的响应，能够在花烟草离子胁迫响应中行使相应的功能。

参考文献李静，刘明，孙晶，等转运蛋白基因的研究进展大豆科学，李平，王晓宇，徐惠，等蓖麻质膜型逆向转运蛋白基因克隆及表达载体构建分子植物育种，陈江飞，余津铭，杨建坤，等茶树逆向转运蛋白基因的克隆及表达分析茶叶科学，刘威，李慧，蔺经，等杜梨基因的克隆表达分析及功能验证果树学报，张雪薇，刘仑，鲁黎明，等烟草基因的克隆表达载体构建及表达分析长势致的烟苗，分别进行低温干旱高盐低钾及处理，每个处理设个重复，每重复株烟苗。

在处理后，分处理重复进行整株取样，并臵于液氮中保存，用于总的提取。

低钾培养基钾离子终浓度为的配制，参照张雪微等方法进行。

此外，分别取正常生长周烟苗的根茎叶，以及处于盛花期的烟花，保存于液氮中，用于目的基因的组织表达分析。

目的基因克隆总的提取及反转录采用法提取烟苗的总，然后，参照合成试剂盒的方法，进行反转录及合成。

基于非生物胁迫下花烟草基因表达模式的分析及其基因克隆的研究遗传学论文。

此外，苹果和因的表达具有组织特异性，响应非生物胁迫的诱导，并且对高盐及低钾有强烈的响应，能够在花烟草离子胁迫响应中行使相应的功能。

参考文献李静，刘明，孙晶，等转运蛋白基因的研究进展大豆科学，李平，王晓宇，徐惠，等蓖麻质膜型逆向转运蛋白基因克隆及表达载体构建分子植物育种，陈江飞，余津铭，杨建坤，等茶树逆向转运蛋白基因的克隆及表达分析茶叶科学，刘威，李慧，蔺经，等杜梨基因的克隆表达分析及功能验证果树学报，张雪薇，刘仑，鲁黎明，等烟草基因的克隆表达载体构建及表达分析植物研究，鲁黎明烟草钾转运体基因的电子克隆及生物信息学分析中国农业科学，马玉花，冶贵生及处理后，其表达量有明显的上升。

由此说明，还可能参与了花烟草对渗透胁迫的响应。

前人的研究表明，植物蛋白是个逆向转运蛋白，承担的跨膜运输。

例如，是拟南芥低钾胁迫响应中的关键组分拟南芥及承担着向液泡中运输钾的功能，并在细胞膨压维持及气孔运动中发挥作用。

在本研究中，的表达在低钾处理后急剧升高，并在达到最高，说明可能参与了花烟草响应外界低钾的胁迫过程，同时也表明可能参与了钾的跨膜运输。

综上所述，本研究所获得的基因，具有与其他物种共同的功能属性，如参与与的运输以及渗透胁迫等。

同时，基因可能还具有不同于其他物基于非生物胁迫下花烟草基因表达模式的分析及其基因克隆的研究遗传学论文物研究，鲁黎明烟草钾转运体基因的电子克隆及生物信息学分析中国农业科学，马玉花，冶贵生，龙晓晨，等柴达木盆地梭梭基因的克隆及其编码蛋白的结构预测西北林学院学报，张雨良，张智俊，杨峰山，等新疆盐生植物车前基因的克隆及生物信息学分析中国生物工程杂志，严诺，孙淑斌，等菊芋逆向转运蛋白基因的克隆与表达分析西北植物学报，郭强，孟林，李杉杉，等马蔺基因的克隆与基因表达分析植物生理学报，刘雪华，宋琎楠，张玉喜，等苦荞麦基因的克隆及表达分析华北农学报，鲁琳，赵希胜，刘维东，王艳婷，吴玲莉，鲁黎明花烟草基因的克隆及其在非生物胁迫下的表达模式生物技术通报，基金贵州省烟草科学研究院科技项同的功能属性，如参与与的运输以及渗透胁迫等。

同时，基因可能还具有不同于其他物种的自身独特的功能。

本研究还观察到，的表达受低温及的强烈诱导，这是以往基因功能研究未见报道的。

所以，本结果暗示，可能还参与了如氧化胁迫和低温胁迫响应等非生物胁迫的应答，也说明了该基因功能的复杂与多样性。

因此，本研究的结果为花烟草基因功能研究以及响应非生物胁迫机制研究，提供了有价值的线索。

花烟草的克隆及表达模式分析，只是为花烟草基因的功能研究提供了有益的借鉴，其在花烟草生长发育及非生物胁迫响应中的分子机制，有待更进步的深入研究。

结论花烟草基因所编码的蛋白具有超基因的表达具有组织表达特异性，花中表达量最高，茎中次之，根和叶中表达量较低。

在高盐干旱低温低钾及等非生物胁迫下，的表达呈现种不同的表达模式。

其中，对高盐及低钾胁迫的响应强烈。

本研究的结果表明，基因属于逆向转运蛋白家族，可能参与了花烟草高盐和低钾胁迫，以及其它非生物胁迫响应在内的众多生理过程。

关键词逆向转运蛋白低钾胁迫基因克隆生物信息学耐盐性花烟草遗传学植物在生长过程中，易遭受到土壤盐渍化的威胁，造成其生长发育受阻，严重时会导致植物的死亡。

研究表明，高浓度的土壤盐分，主要从离子毒害和渗透胁迫两个方面来危害植物的正常生长，而位于植物细胞膜系统的逆向转运蛋白，则是植物抵御盐胁迫的重要组拟南芥对胁迫有显著的转录响应过程。

本研究也得出了相同的结果，在及处理后，其表达量有明显的上升。

由此说明，还可能参与了花烟草对渗透胁迫的响应。

前人的研究表明，植物蛋白是个逆向转运蛋白，承担的跨膜运输。

例如，是拟南芥低钾胁迫响应中的关键组分拟南芥及承担着向液泡中运输钾的功能，并在细胞膨压维持及气孔运动中发挥作用。

在本研究中，的表达在低钾处理后急剧升高，并在达到最高，说明可能参与了花烟草响应外界低钾的胁迫过程，同时也表明可能参与了钾的跨膜运输。

综上所述，本研究所获得的基因，具有与其他物种，龙晓晨，等柴达木盆地梭梭基因的克隆及其编码蛋白的结构预测西北林学院学报，张雨良，张智俊，杨峰山，等新疆盐生植物车前基因的克隆及生物信息学分析中国生物工程杂志，严诺，孙淑斌，等菊芋逆向转运蛋白基因的克隆与表达分析西北植物学报，郭强，孟林，李杉杉，等马蔺基因的克隆与基因表达分析植物生理学报，刘雪华，宋琎楠，张玉喜，等苦荞麦基因的克隆及表达分