价状态时，可与氧呈可逆性结合氧合血红蛋白，如果铁氧化为三价状态。

血红蛋白则转变为高铁血红蛋白，就失去了载氧能力。

新课堂互动探究学习目标尝试对血液中血红蛋白的提取和分离。

体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法。

了解色谱法，电泳法等分离生物大分子的原理。

新知预习分离蛋白质的原理与方法分离蛋白质的原理蛋白质特性的差异分子的形状和大小所带电荷的性质和多少溶解度吸附性质对其他分子的亲和力分离蛋白质的方法凝胶色谱法概念根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，也叫分配色谱法。

过程及原理凝胶形态微小的多孔球体组成大多数由多糖类化合物构成结构内部有许多贯穿的通道分离的过程分离原理依据相对分子质量的不同而将蛋白质分离。

电泳法电泳的概念指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。

原理利用了待分离样品中各种分子的带电性质的差异分子本身的大小以及形状的不同，使带电分子在电场中产生不同的迁移速度，从而分离样品中的各种分子。

分离方法琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳等。

其中后者使用时通常加入带负电荷多的，形成“蛋白质复。

电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现的洗涤血红蛋白的释放然后通过凝胶色谱法将样品进步纯化，最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定。

样品纯化的目的是述的过程即是，它包括分离血红蛋白溶液和透析。

样品处理粗分离纯化纯度鉴定防止血液凝固样品处理红细胞。

实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。

加入柠檬酸钠的目的是。

以上所血红蛋白提取和分离的程序可分为四步和安中学月考红细胞中含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带和，可选用猪牛羊或其他哺乳动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。

请回答下列有关问题细胞洗涤去除杂质，如血浆蛋白血红蛋白释放使红细胞破裂，释放血红蛋白分离血红蛋白溶液经过离心使血红蛋白与其他杂质分离开透析除去样品中相对分子质量较小的杂质纯化除去相对分子质量较大的蛋白质典例精析雅色谱操作纯度鉴定聚丙烯酰胺凝胶电泳判断纯化的蛋白质是否达到要求，需要进行蛋白质纯度的鉴定。

鉴定的方法中，使用最多的是聚丙烯酰胺凝胶电泳。

特别提醒样品处理分离与纯化的目的不同目的红的路径长，所以洗脱出来较慢，而较大的蛋白质分子则相反，并且，由于凝胶种类多，孔径大小不同，可进步改变进入凝胶内部不同大小蛋白质的路径。

答案知识点二蛋白质提取和分离的实验过程样品处理及粗分离凝胶胶时的路径吸附部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度将酶或细胞固定在细胞中与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速率解析凝胶是些微小的多孔的球体，较小的蛋白质分子进入凝胶内部，所经过量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。

答案跟踪练习凝胶色谱法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是改变蛋白质分子通过凝分子质量的大小蛋白质所带电荷的多少蛋白质溶解度的大小解析凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质丙烯酰胺凝胶电泳，这是因为该方法分离蛋白质完全取决于分子的大小，而非所带电荷的性质和分子的形状。

典例精析邛崃月考利用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小蛋白质相对复合物，使其迁移速度完全取决于分子的大小特别提醒琼脂糖凝胶电泳操作简单，电泳速度快，样品不需要事先处理电泳后区带易染色，样品极易洗脱，便于定量测定。

测定蛋白质的相对分子质量常用聚方法琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳由于琼脂糖本身不带电荷，各种分子在电场中迁移速度决定于所带电荷性质的差异及分子的大小形状的不同在凝胶中加入，使蛋白质解聚成单链，与各种蛋白质形成蛋白质析相对分子质量大相对分子质量小直径大小大于凝胶颗粒空隙直径小于凝胶颗粒空隙直径运动方式垂直向下运动无规则的扩散运动运动速度较快较慢运动路程较短较长洗脱顺序先从凝胶柱中洗脱出来后从凝胶柱中洗脱出来电泳子的分离，实现了酶的重复利用，节约了生产成本。

不是。

固定化酶的反应柱能进行化学反应，凝胶色谱柱不能进行化学反应。

新课堂互动探究知识点血红蛋白的提取和分离的原理蛋白质分子在凝胶中的运动情况分析子的分离，实现了酶的重复利用，节约了生产成本。

不是。

固定化酶的反应柱能进行化学反应，凝胶色谱柱不能进行化学反应。

新课堂互动探究知识点血红蛋白的提取和分离的原理蛋白质分子在凝胶中的运动情况分析相对分子质量大相对分子质量小直径大小大于凝胶颗粒空隙直径小于凝胶颗粒空隙直径运动方式垂直向下运动无规则的扩散运动运动速度较快较慢运动路程较短较长洗脱顺序先从凝胶柱中洗脱出来后从凝胶柱中洗脱出来电泳方法琼脂糖凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳由于琼脂糖本身不带电荷，各种分子在电场中迁移速度决定于所带电荷性质的差异及分子的大小形状的不同在凝胶中加入，使蛋白质解聚成单链，与各种蛋白质形成蛋白质复合物，使其迁移速度完全取决于分子的大小特别提醒琼脂糖凝胶电泳操作简单，电泳速度快，样品不需要事先处理电泳后区带易染色，样品极易洗脱，便于定量测定。

测定蛋白质的相对分子质量常用聚丙烯酰胺凝胶电泳，这是因为该方法分离蛋白质完全取决于分子的大小，而非所带电荷的性质和分子的形状。

典例精析邛崃月考利用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小蛋白质相对分子质量的大小蛋白质所带电荷的多少蛋白质溶解度的大小解析凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。

答案跟踪练习凝胶色谱法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是改变蛋白质分子通过凝胶时的路径吸附部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度将酶或细胞固定在细胞中与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速率解析凝胶是些微小的多孔的球体，较小的蛋白质分子进入凝胶内部，所经过的路径长，所以洗脱出来较慢，而较大的蛋白质分子则相反，并且，由于凝胶种类多，孔径大小不同，可进步改变进入凝胶内部不同大小蛋白质的路径。

答案知识点二蛋白质提取和分离的实验过程样品处理及粗分离凝胶色谱操作纯度鉴定聚丙烯酰胺凝胶电泳判断纯化的蛋白质是否达到要求，需要进行蛋白质纯度的鉴定。

鉴定的方法中，使用最多的是聚丙烯酰胺凝胶电泳。

特别提醒样品处理分离与纯化的目的不同目的红细胞洗涤去除杂质，如血浆蛋白血红蛋白释放使红细胞破裂，释放血红蛋白分离血红蛋白溶液经过离心使血红蛋白与其他杂质分离开透析除去样品中相对分子质量较小的杂质纯化除去相对分子质量较大的蛋白质典例精析雅安中学月考红细胞中含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带和，可选用猪牛羊或其他哺乳动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。

请回答下列有关问题血红蛋白提取和分离的程序可分为四步和。

实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。

加入柠檬酸钠的目的是。

以上所述的过程即是，它包括分离血红蛋白溶液和透析。

样品处理粗分离纯化纯度鉴定防止血液凝固样品处理红细胞的洗涤血红蛋白的释放然后通过凝胶色谱法将样品进步纯化，最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行纯度鉴定。

样品纯化的目的是。

电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。

通过凝胶色谱法将相对分子量大的杂蛋白除去分子的大小解析血红蛋白提取和分离的程序可分为四步，分别是样品处理粗分离纯化纯度鉴定。

在实验中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固样品处理包括红细胞的洗涤血红蛋白的释放分离血红蛋白溶液和透析四步。

样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子量大的杂蛋白除去，进而使聚丙烯酰胺凝胶电泳法中迁移速率只取决于分子大小。

电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的大小形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。

跟踪练习下图甲乙表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请回答下列问题血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有功能。

甲装置中，是血红蛋白溶液，则是乙装置中，溶液的作用是不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于电荷的多少分子的大小肽链的多少分子形状的差异解析使用聚丙烯酰胺电泳的过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小。

答案红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的。

我们可以选用猪牛羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题分离蛋白质分子的种常用方法是凝胶色谱法，也叫做，是根据分离蛋白质的有效方法。

血红蛋白提取和分离的程序可分为和纯度鉴定。

分配色谱法相对分子质量样品处理粗分离纯化洗涤红细胞的目的是，以利于后续步骤的分离强化。

采集的血样要及时分离红细胞，分离时采用低速短时间，然后用胶头吸管吸出上层透明的，将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入洗涤，如此重复，直至上清液中没有黄色。

将洗涤好的红细胞倒入烧杯中，加入和充分搅拌，红细胞破裂，释放出血红蛋白。

去除杂蛋白离心黄色血浆五倍体积的生理盐水蒸馏水体积的甲苯解析凝胶色谱法也叫分配色谱法，其依据是相对分子质量的大小血红蛋白提取和分离的步骤为样品处理粗分离透析纯化和纯度鉴定红细胞洗涤目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化洗涤红细胞是采用低速短时间离心血红蛋白释放时要加入蒸馏水和甲苯，分离血红蛋白是采用高速长时间离心的方法。

红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带和，我们可以选用猪牛羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。

请回答下列有关问题实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是。

洗涤红细胞时要用填溶液反复洗涤离心。

要让红细胞破裂，释放血红蛋白时要加入。

得到的血红蛋白溶液装入透析袋中透析，即血红蛋白的粗分离，目的是。

然后通过填方法将样品进步纯化，最后进行纯度鉴定，使用最多的是填方法。

防止血液凝固生理盐水蒸馏水和甲苯去除样品中相对分子质量较小的杂质凝胶色谱法聚丙烯酰胺凝胶电泳解析提取和分离血红蛋白时，新鲜的血液加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。

洗涤红细胞时要用生理盐水反复洗涤离心。

要让红细胞破裂，释放血红蛋白时要加入蒸馏水和甲苯。

得到的血红蛋白溶液装入透析袋中透析，即血红蛋白的粗分离，目的是除去样品中相对分子质量较小的杂质。

通过凝