明亮的散射光或日 光灯下厘米，光照强度在勒克斯左右，不可阳光直 射，每天光照时间小时左右。周后可在外植体周围形成 许多球状物，即类原球茎。若把类原球茎分割或用棒压碎，再接 种到培养基上，便会形成更多的类原球茎。每天分割 次，大花蕙兰每切个芽可繁殖万苗左右。把类原球茎接种到 长苗培养基上，可以长芽生根，形成完整的幼苗。 三培养基配制 培养基为基本培养基，附加每升毫克， 促进分殖和叶片生长，不生根。当把的浓度提高至 毫克升时，即可形成类原球茎。也可以生根。另外，在培养基 中不加，添加定数量的椰乳，对促进类原球茎增殖幼芽 的分化和生长健壮十分有益。 据记载，改良的培养基用于大花蕙兰类的茎尖培养， 有较好的效果。配方如下 硝酸钾毫克 硝酸铵毫克 氯化钙•毫克 硫酸镁•毫克 磷酸二氢钾毫克 乙二胺四醋酸二钠毫克 硫酸锰•毫克 硼酸毫克 氯化锌毫克 碘化钾毫克 钼酸钠•毫克 硫酸铜•毫克 氯化钴•毫克 萘乙酸毫克 维生素毫克 维生素毫克 椰子水毫升 葡萄糖克 蔗糖克 蒸馏水加至毫升 注本配方氢离子浓度为纳摩升 改良的培养基适合于大花蕙兰类和卡特兰的茎尖培养， 其组成成分如下 硝酸钾毫克 硝酸铵毫克 磷酸二氢钾毫克 硫酸镁•毫克 酒石酸铁•毫克 硫酸锰•毫克 硼酸毫克 萘乙酸毫克 苯腺嘌呤毫克 烟酸毫克 椰子水毫升 蔗糖克 蒸馏水加至毫升 注本配方氢离子浓度为纳摩升。 京都培养基狩野 花宝号克 蔗糖克 琼脂克 蒸馏水毫升 在兰科植物中，大花蕙兰属于容易进行茎尖培养的种类。若 想得到脱毒种苗则较困难。必须切取的茎尖非常小，约在 微米以下。外植体越小越难成活。作为般种苗繁殖用的培养， 大花蕙兰通常分成三步。初代培养。使用或京都培养基， 添加蛋白胨克升。目的是使采切的茎尖在培养基上能够成活， 并在定时间后产生少量的类原球茎。增殖培养。为使类原球 茎大量增殖，使用京都培养基，添加毫升升椰 汁。固体和液体培养交替。育苗培养。以培育出健壮的试管苗 为目的。通常使用京都培养基或培养基，在培养基中添加 克升香蕉。 以大花蕙兰开花植株茎尖和试管苗茎段或叶切段为外植体,诱导原球茎, 并获得再生植株,筛选出原球茎诱导培养基或 蔗糖原球茎增殖培养基 或蛋白胨分化及育苗培养基 香蕉匀汁活性炭。 大花蕙兰组培苗落地前炼苗天,可提高成活率,不同栽 培基质影响大花蕙兰组培苗的落地成活率,水苔是较为理想的移栽基质, 其移栽后个月成活率达。瓶苗移栽后浇水时切忌过干或过湿, 等新根长出每周宜进行次根外追肥 大花蕙兰组织培养和快速繁殖技术 中国花卉协会年月日来源 中国花卉协会收集 关闭窗口打印本页打印预览字体大中小 大花蕙兰采用传统的分 株繁殖,繁殖速度慢周期长,尤其对国外新引进的优良品种,难以迅速 占领市场满足需求大花蕙兰类组培快繁国内公开报道的仅限于虎头 兰和水晶多芭等个别品种,因其各种品种间培养有很大差异,对 于新品种西维亚玛利莲梦露, 的最佳激素配比,把原球茎切块分别接种, 为基本培养基的培养基上,测试不同培养基种类对原球茎增殖的影 响结果表明,均可应用于原球茎增殖,但以 效果最佳也能分化和增殖原球茎,但增殖缓 慢色淡附加香蕉泥对原球茎增殖有明显促进作用,使增殖倍数提高 到,且生长健壮,色泽深绿。 用固体培养基培养最差,增殖速度慢,且易导致原球茎块死亡,继 代不及时易分化出芽,但适合芽和根的分化培养液体培养增殖较快, 但生长不够健壮,色黄绿,质地较疏松半固体培养基减少琼脂用量 最佳,原球茎增殖量大,色深绿,健壮,每隔对半固体培养基的 培养瓶震荡,摇动次,生长增殖效果更好。 生长健壮的原球茎不切割接种在固体分化培养基上,可 诱导出丛生芽,继续培养左右可发育成小苗,当培养瓶内丛生芽长 出左右时,将苗与新增殖的原球茎分开,原球茎继续增殖培养,苗 转入生根壮苗培养基中,每瓶个小苗,当苗长出片叶,根长 到左右时,即可开盖于温室内炼苗通过添加不同水平的 比较,以为最佳。 炼苗后即可将苗取出,用清水洗净根部的琼脂,植于温室苗床 内,栽培基质为松针苔藓粗砂,苗床底部垫以碎石碎砖块,用稀薄的 营养液喷雾,每隔周喷次倍的多菌灵溶液,温度保持在 ,在大棚里亦可生长良好,个月后统计移栽成活率可达以上 年后上盆,栽培基质用泥炭土蕨根树皮,每周浇次液肥 分析讨论 大花蕙兰属热带气生兰,靠根系附着在林中树木及岩石上生长, 多数种类有内生菌共生因此,外植体灭菌采用步处理据笔者经验, 大花蕙兰外植体灭菌比其它植物有定难度我们曾采用抗生素处理, 效果不佳对于供试品种是否由于存在内生菌而引起外植体灭菌处理 困难,以及内生菌在植物体内的分布传播情况有待进步研究 培养基添加香蕉泥对大花蕙兰增殖和分化有明显的促进作用, 这与香蕉泥中的有机质和天然激素有关,同时能使培养物在适宜的酸 性条件下生长 培养过程中,不同品种增殖成苗及幼苗分生情况有定差异 其中梦露明显比其它品种增殖快且易分生子苗,索菲亚增殖最 慢,很少分生子苗,这可能与品种固有特性有关 原球茎切块细小稀疏的培养瓶内,群体生长较慢,而切块较大 且密集的瓶内,生长十分健壮,表现类似于群体生长效应因此切割时 不可过细,直径要在以上,每瓶可接种多个培养块,可使瓶内 营养得以充分利用 接种时,采用大罐头瓶把培养块次夹入或铲入,稍加晃动半固 体培养基即可使培养块分散开来,既节约时间成本,又降低了污染率 用改良无机盐减半培养大花蕙兰,无机盐用量比其它报 道用培养基大大减少,增殖分化效果均佳采用降低琼脂用量制成 半固体培养基可简化接种步骤,而且培养块浸在培养基内,降低了培养 块黄枯和切口褐化的机会定期摇动培养瓶,能使培养瓶内营养得以充 分利用无机盐和琼脂在培养成本中占有很高的比例,采用以上技术可 大大节约成本,利于大规模生产应用 生产过程中,我们用自来水代替蒸馏水,用绵白糖代替蔗糖,用 廉价的琼脂条代替琼脂粉,降低了成本,效果没有丝毫降低由于大花 蕙兰原球茎增殖不必用小容器和相对较高的罐头瓶,可用透光性好的 大容器代替 采用次定植,不经移栽,可以减少对幼苗根系的损伤和节约人 力只要保证温室内相对湿度,对成活率无显著影响,但组培苗前期生 长缓慢根据赵杨景对种内生菌与大花蕙兰共生对矿质营养吸收影响 的研究,内生菌对吸收矿质营养促进幼苗生长有明显的作用我们拟 对大花蕙兰内生菌的分离与再接种,以及如何缩短幼苗期提早开花等 进行进步研究 大花蕙兰组织培养生产流程及降低成本的研究 王秋洁 摘要本论文通过建立大花蕙兰品种„修女‟的组织培养体系，研究 大花蕙兰组织培养生产中各个环节的主要影响因子结合„贵妃‟„梦幻‟ „碧玉‟和„玉婵‟等个品种，采取不同的降低成本措施，探索适合大花 蕙兰不同生长阶段的低成本培养的可能性推导单株组培苗成本的计 算公式，根据市场消耗品价格计算出大花蕙兰单株组培苗生产成本的 降低幅度，为大花蕙兰组织培养生产体系的建立和成本的降低提供理 论依据。实验结果表明，以品种„修女‟的茎尖为外植体，表面灭菌方 式采取酒精浸泡后升汞灭菌为宜。最佳原球茎诱导培养基 为。最佳原球茎增殖培养基为 。最佳原球茎分化培养基为 。最佳生根培养基为。泥炭水 苔泥炭珍珠岩或水苔珍珠岩的成活率均可达。 步成苗等简化组织培养生产流程的方法具有可行性。生产中可以用 自来水白砂糖代替高成本的蒸馏水蔗糖减少琼脂用量降低糖 浓度可以促进原球茎的增殖自然光照对原球茎的分化生根有抑制 作用，最适光照时间因品种而异。经过试验培养基最多可以降低 的成本，单株组培苗的成本可以下降。 大花蕙兰繁殖技术组织培养繁殖 组培操作 在春季月大花蕙兰新芽萌发期，选长厘米左右的新 芽从基部与老假鳞茎相连接处切断。尽量采用露在外面，不被栽 培材料埋起的芽。采芽前数日减少叶面喷水，可减少菌类污染。 采下的芽先用肥皂和流动自来水冲洗分钟，然后在无菌 条件下切去芽的上半段，并剥除最外面的枚叶片，在 的酒精中蘸下秒，立即浸泡在的次氯酸钠水溶液 中。分钟，稍加摇动。取出后立即用无菌水冲洗，再剥去 片叶，放入次氯酸钠水溶液中，分钟后用无菌水冲洗， 剥至留下最后枚叶片。以生长点为中心，切取立方 厘米的组织块，浸泡在次氯酸钠分钟后取出，用无菌水冲 洗数次，用解剖刀切成数块，分别放入已准备好的培养基上。每 瓶最好只接种块外植体，以免相互感染。 切取生长点的大小依培养目的不同而异。在大花蕙兰茎尖培 养中，再分裂增殖的部位不仅在生长点部分，生长点与叶原基的 中间也有较强的分生能力。切取茎尖时带有两个左右的叶原基， 即较大的组织块效果较好。 二培养和增殖 接种好的培养瓶放在室温，有明亮的散射光或日 光灯下厘米，光照强度在勒克斯左右，不可阳光直 射，每天光照时间小时左右。周后可在外植体周围形成 许多球状物，即类原球茎。若把类原球茎分割或用棒压碎，再接 种到培养基上，便会形成更多的类原球茎。每天分割 次，大花蕙兰每切个芽可繁殖万苗左右。把类原球茎接种到 长苗培养基上，可以长芽生根，形成完整的幼苗。 三培养基配制 培养基为基本培养基，附加每升毫克， 促进分殖和叶片生长，不生根。当把的浓度提高至 毫克升时，即可形成类原球茎。也可以生根。另外，在培养基 中不加，添加定数量的椰乳，对促进类原球茎增殖幼芽 的分化和生长健壮十分有益。 据记载，改良的培养基用于大花蕙兰类的茎尖培养， 有较好的效果。配方如下 硝酸钾毫克 硝酸铵毫克 氯化钙•毫克 硫酸镁•毫克 磷酸二氢钾毫克 乙二胺四醋酸二钠毫克 硫酸锰•毫克 硼酸毫克 氯化锌毫克 碘化钾毫克