1、布和排泄，作为细胞的防御系统，对机体起保护作用。病理情况下，在相应组织内过表达，除了将细胞内毒性物质泵出胞外之外，还将肿瘤细胞内的化疗药物泵出胞外，导致肿瘤细胞内化疗药物减少，使肿瘤细胞出现多药耐药。抗凋亡蛋白的过表达，是种新的凋亡抑制基因，可通过抑制化疗药物诱导的肿瘤细胞凋亡而产生多药耐药。研究发现，相对于亲本细胞，阿霉素耐药的细胞中的是高表达的。信号转导途径异常介导耐药，如信号通路及信号通路异常活化介导肿瘤细胞多药耐药。经典通路对细胞发生发展和分化具有调控作用。通路是信号通路中重要的环，主要由组成，可以与和三者的复合物结合。在信号通路中起关键作用,复合物中任何个组成部分的改变都可影响肿瘤细胞内的水平，影响下游基因和的表达最终影响肿瘤细胞的耐药性。是类存在于生物体内长度约高度保守的非编码小，通过碱基互补配对与靶基因端非编码区结合。
2、研究发现，表达下调，可引起降解障碍，异常堆积，导致肿瘤如乳腺癌结直肠癌的发生及多药耐药的出现。下调能抑制肿瘤细胞的增殖，且能逆转肿瘤细胞的耐药，增加肿瘤如胃癌食管癌细胞对化疗药物的敏感性。在本实验室前期试验的基础上，本课题拟探讨胞质诱导人乳腺癌细胞对化疗药物和耐药的信号途径及机制。旨在为胞质诱导乳腺癌细胞多药耐药的机制提供理论依据，为从信号转导途径治疗乳腺癌提供新的靶点。万方数据实验材料主要实验仪器万方数据二主要实验材料与实验试剂.细胞株人乳腺癌细胞命名为细胞胞质稳定转染的细胞命名为细胞和胞质稳定转染空载体的细胞命名为细胞均为本实验室保存。瞬时转染模拟物的细胞命名为瞬时转染抑制剂的细胞命名为和瞬时转染阴性对照的细胞命名为。.主要试剂万方数据.培养基及实验试剂配制培养基配法取包的粉末倒到约乘有去离子水的烧杯中，并且将小包内残余的粉末。
3、放射治疗内分泌治疗化学药物治疗中药治疗等。目前，乳腺癌被公认为是种全身性疾病，化学药物治疗是乳腺癌全身治疗的主要治疗手段。首先，化学药物治疗对临床上相对较为局限，手术切除或放射治疗有定难度的乳腺癌，可缩小病灶，减少切除范围，缩小手术造成的伤残其次，化学药物治疗可抑制残留或转移的微小病灶，预防乳腺癌的复发和转移，提高乳腺癌患者的存活率再次，化学药物治疗在已失去手术治疗机会的晚期乳腺癌患者的治疗中起到至关重要的作用。因此，如何进行合理，有效的化学药物治疗是提高乳腺癌治疗效果的重要举措。由于乳腺癌发生发展的阶段不同，以及乳腺癌患者个体间差异的存在，不同类型乳腺癌在不同发展阶段对化疗药物的敏感性具有很大的差异，再者由于目前使用的大多数化疗药并非靶向药物，治疗剂量较大毒副作用明显，且化疗药物使用段时间之后可能产生耐受，以致化疗药物不能有效地。
4、导致靶基因降解或转录后翻译抑制，抑制靶基因表达。多种参与肿瘤发生发展的调控，影响肿瘤细胞对化疗的敏感性，有的可增加肿瘤细胞的化疗敏感性，而有的则作用相反。研究发现，可下调部分肿瘤细胞如白血病细胞肝癌细胞中的表达，部分逆转肿瘤细胞的多药耐药，此外，可靶向信号通路中基因，参与成骨细胞分化的调控。巨噬细胞集落刺激因子，也称为集落刺激因子,是个由单基因编码的包含个链间二硫键的同源二聚体糖蛋白,是种具有谱系特异性的细胞因子，是细胞信号调控网络的重要细胞因子。研究发现，异常表达与妇科肿瘤如乳腺癌卵巢癌宫颈癌,等发生发展有关，且与肿瘤细胞耐药相关。本实验室构建了胞质稳定表达的细胞，通过基因芯片检测发现，胞质稳定转染的细胞中的表达较亲本细胞或细胞的表达上调.倍。芯片结果已证实。经生物信息学软万方数据件和预测，发现腺瘤息肉病基因，可能是的潜在靶基因。
5、分类号密级编号硕士学位论文胞质通过上调激活信号通路诱导人乳腺癌细胞对和耐药研究生姓名廖焕云指导教师姓名职称唐圣松教授汪煜华副教授学科专业名称药理学研究方向肿瘤药理学年月万方数据南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名年月日南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读博硕士学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以其它单位的名义发表。本人同意南华。
6、打火机酒精棉球废液缸吸管烧杯温度计完全培养基记号笔。操作步骤将准备好的物品放到超净工作台内照台，然后吹台。从冰箱取出需要复苏的细胞迅速放到温水中，快速溶解。的酒精棉球擦拭细胞冻存管的表面后，在超净工作台内拧开冻存管，用移液枪将冻存管内的液体吸到装完全培养基的细胞培养瓶中，左右晃动培养瓶，使细胞分布均匀。的酒精棉球擦拭细胞培养瓶表面，拧松瓶盖，置于，的培养箱中培养，第二天观察生长情况。.细胞换液倒掉旧的培养基，加入完全培养基，的酒精棉球擦拭细胞培养瓶表面，拧松瓶盖，置于，的培养箱中培养。.细胞传代待细胞汇合度达时，在超净工作台内倒掉原来的培养基，用灭菌的洗两遍。用吹打管加滴.的胰蛋白酶，盖好瓶盖，晃动培养瓶使胰蛋白酶能覆盖整个瓶底，在倒置显微镜下观察细胞的形态变化，待细胞开始变圆变亮，在超净工作台内迅速倒掉培养瓶内的胰酶，然后盖好瓶。
7、多药耐药表达的影响.三胞质对细胞药物敏感性的影响.四胞质对细胞中抗凋亡蛋白和万方数据表达的影响.五生物信息学方法分析的靶基因六胞质对细胞中的影响.讨论结论参考文献综述硕士期间发表论文致谢万方数据胞质通过上调激活信号通路诱导人乳腺癌细胞对和耐药硕士研究生廖焕云指导老师唐圣松教授汪煜华副教授目的探讨胞质诱导人乳腺癌细胞对和耐药的信号途径及机制。方法常规培养细胞细胞和亲本人乳腺癌细胞。通过生物信息学软件和预测可能靶基因，用和分析胞质对细胞及相关基因表达的影响。法观察或对细胞增殖活性的影响，并以评价细胞对或敏感性。用抑制剂模拟物和阴性对照分别瞬时转染细胞，或用抑制剂预处理细胞，以分析和在胞质诱导细胞对和耐药过程中的作用。结果细胞蛋白及的表达显著低于细胞或细胞，而和蛋白和的表达则显著高于细胞或细胞。相对于细胞或细胞而言，转染的细胞蛋白和的表。
8、，混匀后避光静置，然后高压蒸汽灭菌，冰箱存放。溶液的配法称粉末于避光的离心管中，用溶解，避光保存。的的配法.,.，加双蒸水定容到，调到.。的配法用双蒸水定容到。封闭液的配法伊利脱脂牛奶使牛奶充分溶解，保存。的配法双蒸水，调至.，室温存放。电泳缓冲液的配法.，甘氨酸，溶于双蒸水中，加，用双蒸水定容到，室温保存。电转的配法，甘氨酸，.，双蒸水定容到，室温存放。电转的配法电转无水甲醇，用双蒸水定容到，现配现用。的配法以配为例，称.过硫酸铵，加去离子水，使粉末充分溶解，避光保存。最好现配现用，配好的溶液可保存周，过期会失去催化作用。的配法，硼酸.，.双蒸水中加.充分搅拌，溶液此时为乳白色，加双蒸水定容到，调至.。万方数据.引物序列.本实验主要抗体,北京博奥森生物科技有限公司万方数据实验方法．细胞培养.细胞复苏物品准备培养瓶移液枪蓝色头酒精。
9、大学有关保留使用学位论文的规定，即学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印缩印或其它手段保留学位论文学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入中国优秀博硕士学位论文全文数据库，并按中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到中国学位论文全文数据库，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。作者签名导师签名年月日年月日万方数据目录中文摘要.主要英文缩略语索引.前言.实验材料.主要实验仪器.二主要实验材料与实验试剂.实验方法.细胞培养.二细胞瞬时转染实验.三实时定量.四噻唑蓝实验五蛋白质印迹法检测蛋白的表达六统计学分析.实验结果.胞质转染细胞后表达水平分析二胞质对细。
10、杀死手术后残留复发和转移的乳腺癌细胞，最终导致治疗失败。导致治疗失败的主要原因就是乳腺癌细胞多药耐药性，的产生。前期研究表明乳腺癌耐药是个极其复杂且具有可变性的过程，这过程是由多基因多因子参与，并通过多途径完成的。方面的研究仅能从这个方面来解释乳腺癌细胞耐药的原因。因此，深入阐明乳腺癌细胞耐药的机制，完善调控乳腺癌细胞耐药的信号通路网，对从信号转导途径治疗乳腺癌具有重要的理论意义和现实指导意义。肿瘤细胞多药耐药是指肿瘤细胞对抗肿瘤药物产生耐药性的同时,对其它结构和作用机制不同的抗肿瘤药物也产生交叉性耐药。肿瘤细胞多药耐药的形成涉及到多个基因多个因子多个环节及多条信号转导途径。主要包括耐药蛋白的过表达，型糖蛋白，是结合盒式蛋白，超家族中发现最早的蛋白，也是目前研究最广泛和最深入的蛋白。正常生理情况下，主要参与内外源药物的吸万方数据收。
11、上调，与此同时下游基因和蛋白和的表达均下调转染的细胞蛋白和的表达下调，下游基因和蛋白及各自的表达均上调。抑制剂预处理后，细胞的和蛋白和的表达显著下调。细胞对和的敏感性明显低于细胞或细胞.转染的细胞对和的敏感性明显高于细胞.转染的细胞对和的敏感性明显低于细胞.。万方数据结论胞质抑制细胞的表达，诱导细胞和的表达。胞质通过上调细胞的表达，激活信号通路，诱导细胞对和耐药。关键词多药耐药人乳腺癌细胞万方数据.,,万方数据,.,.,.，.万方数据主要英文缩略语索引万方数据万方数据前言乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之，据世界卫生组织统计，亚洲女性乳腺癌发病率呈逐年递增的趋势且趋向年轻化，严重威胁着女性的生命健康。因此，弄清乳腺癌发病机制，减少乳腺癌发病率，改善乳腺癌治疗效果，降低乳腺癌死亡率成为当前急需解决的重要问题。乳腺癌主要的治疗方法有手术治。
12、洗净，倒入烧杯中。再向烧杯中加.，定容到。调，使其在之间。.微孔滤膜过滤，分装，保存。.胰酶的配法以.胰酶为例，的中加.胰酶，.，定容到。.微孔滤膜过滤，分装，保存。的配法.加双蒸水定容到。的配法取倒到个洗净的烧杯中，加双蒸水定容到，分装，高压蒸汽灭菌，冰箱存放。双抗的配法取瓶规格为.的菌必治粉针剂，用移液器吸灭的双蒸水到瓶内，使瓶内的粉末溶解，待其溶解后将瓶内的溶液转移到灭菌的离心管中。然后，用灭菌的双蒸水将装菌必治粉末的瓶子洗两次，洗后将溶液转移到原来的的离心管中。最后，用灭菌的双蒸水将离心管内的溶液补足到。万方数据细胞冻存液的配法血清和按的比例配若配冻存液则血清，。去离子水的配法双蒸水经纯水系统美国公司的超纯水器去掉双蒸水中的离子，当水的电导率达到，打开开关接水，做好标记。水的配法取干净的烧杯，装去离子水，再用移液器取溶于其。
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《积极心态》精品PPT课件范文 编号85