1、形核心，大小．。．呼肠孤病毒的核酸特性呼肠孤病毒核酸占病毒粒子总重的，基因组通常由．条双链组成，但是年报道发现了基因组由条双链组成的假鳞斑伊蚊呼肠孤病毒。呼肠孤病毒每条双链都是单拷贝，每条上有个开放读码框。另外还有单链的存在，为些低分子量的寡核苷酸，般认为是病毒不完全转录的产物，约占病毒核酸总量的，主要分布在病毒粒子核心的外面。研究较为深入的正呼肠孤病毒属中，每条双链正义链的端都有甲基化修饰负义链的端都有磷酸化修饰。由于呼肠孤病毒核酸是多节段的，很容易出现基因重组现象，重组频率般为。另外，呼肠孤病毒核酸节段两端存在保守序列。．呼肠孤病毒的蛋白特性在对不同属的呼肠孤病毒蛋白研究中，对蛋白的命名各有不同，正呼肠孤病毒属常以希腊字母命名如入等，其他属多以数字命名。以研究较为深入的正呼肠孤病毒为例，从功能的角度对呼肠孤病毒的蛋白进行阐述，同时。
2、热病毒属等。另外还有入蛋白向核心突起。入具有核苷酸结合位点．锌指结构基序解旋酶和酶特征序列，能够结合双链和锌，具有解旋酶酶活性，参与病毒转录过程中基因组负链的解旋与帽化的能量供应,。在呼肠孤病毒入核壳构象形成中具有十分重要的功能，此外，还具有弱的双链结合能力，对其功能突变分析，结果表明，启动病毒颗粒的装配需要通过入入与间进行相互作用。入为五聚体蛋白，也称为“塔式”蛋白，具有鸟苷酸转移酶即加帽酶和种甲基化酶活性。入为微量核心组分，具有双链病毒共有的聚合酶保守结构域，如及，是呼肠孤病毒的依赖的聚合酶．在病毒复制时与入入及蛋白具有相互作用，也是呼肠孤病毒的分类依据之。为微量核心组分，可能为病毒复制中的种调节蛋白，协同入共同决定酶活性眩。另外，呼肠孤病毒基因组编码数种非结构蛋白，它们般存在在胞质中。正呼肠孤病毒的非结构蛋白有。可以把单链和细胞。
3、完全了解中山大学有关保留使用学位论文的规定，即学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆院系资料室被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印缩印或其他方法保存学位论文。保密的学位论文在解密后使用本规定。学位论文作者签名诬秀扎导师签名纫荡日期侧辉月日日期”年月日中山大学硕士学位论文第章前言及综述．呼肠孤病毒概况呼肠孤病毒的发现与分类呼肠孤病毒是基因组为分节段的双链病毒，首次分离是在世纪年代早期，这个发现首次证实了双链病毒可作为稳定的生命形式存在于自然界。此后，在脊椎动物无脊椎动物植物中发现多种呼肠孤病毒。在年，国际病毒命名委员会将原来的呼肠孤病毒属提升为呼肠孤病毒科。年，国际病毒分类委员会第八次会议报告将呼肠孤病毒分为个属。
4、与其他呼肠孤病毒进行比较。外层蛋白主要作用是细胞接触，在病毒早期感染阶段渗透进细胞。外层蛋白决定了病毒可以感染的细胞类型，决定中和抗体和病毒粒子的相互作用的特异性从而决定病毒的血清型。哺乳动物止呼肠孤病毒外衣壳由和蛋白组成，其中和蛋白是大量组分，相互结合形成多聚体，是病毒接触蛋白，为同源三聚体蛋白在病毒进入细胞时通过构象改变保证膜穿透蛋白协同蛋中山大学硕士学位论文白行使膜穿透功制们．正呼肠孤病毒内衣壳核壳主要的结构蛋白是入和，同时入蛋白从内衣壳向外突起。但是，并非所有的呼肠孤病毒都具有突起，因此，可以根据是否具有突起把呼肠孤病毒分为两类，类是有突起的，称为粗糙型的呼肠孤病毒，有正呼肠孤病毒属裴济病毒属胞浆多角体病毒属水生呼肠孤病毒属水稻病毒属等类是没有突起的，称为光滑型的呼肠孤病毒，有环状病毒属轮状病毒属植物呼肠孤病毒属和科罗拉多壁虱。
5、中山大学硕士学位论文锯缘青蟹呼肠孤病毒与双顺反子病毒检测方法及分子流行病学研究姓名区宇洁申请学位级别硕士专业食品安全生物学指导教师翁少萍锯缘青蟹呼肠孤病毒与双顺反子病毒检测方法及分子流行病学研究中文摘要专业食品安全生物学硕士生区宇洁指导教师翁少萍锯缘青蟹是我国重要的经济蟹类，年从暴发“嗜睡症”的蟹中分离出两种大小不同的病毒，较大的病毒直径为。，经酶及酶消化后确定为双链病毒，基因组由节段的双链组成，属于呼肠孤病毒科，命名为锯缘青蟹呼肠孤病毒较小的病毒直径为，经酶及酶消化后确定为单链病毒，基因组由条单链组成，全基因组测序完成后，经过分析，具有双顺反子病毒科的特征，命名为锯缘青蟹双顺反子病毒，。这两种病毒对锯缘青蟹都有很强的致病性，本文对这两种病毒的检测方法流行病学进行了研究。本文建立了呼肠孤病毒和双顺反子病毒的特异性巢式方法，检测限可分别。
6、中高水平表达非结构蛋白，增加膜的渗透性来进行出芽而在最终的宿主细胞中表送，抑制出芽，病毒裂解细胞。中山大学硕士学位论文蟹类的呼肠孤病毒最早在蟹类中发现的呼肠孤病毒是报道的净化大蟾蟹病毒，后来在地中海真蟹中发现病毒，。近年在我国还分离出中华绒螯蟹呼肠孤病毒和锯缘青蟹呼肠孤病毒并且开始从基因组测序蛋白功能免疫学方面进行研究。对净化大蟾蟹病毒和地中海真蟹病毒的研究较少，仅集中在分离纯化形态描述病理病变核酸分析及电泳图谱等方面。这两种病毒都呈面体对称无囊膜有双层衣壳，侵染结缔组织均有严格的宿主特异性，被证明不能交叉感染在电泳中，均呈现条带矧。而在中华绒螯蟹中发现的呼肠孤病毒有两株，株为，大小为，有条带，不能单独造成病症，可与布尼亚病毒协同感染株为，大小为，有条带。锯缘青蟹呼肠孤病毒平均直径，具有较强的侵染性，病症表现为蟹移动缓慢厌食体色变为淡。
7、到少依次为鳃心脏肝胰腺肌肉血淋巴组织双顺反子病毒分布量从多到少分别是鳃肝胰腺脏血淋巴肌肉。把检测结果与蟹的死亡率联系起来，推测双顺反子病毒与呼肠孤病毒共同作用引起锯缘青蟹死亡。本文进行人工感染实验，分别用注射投喂浸泡禁食浸泡共居的方式研究这两种病毒的感染途径，用巢式和实时荧光定量的方法进行检测。结果表明，呼肠孤病毒及双顺反子病毒能通过人工注射浸泡禁食浸泡投喂共届的方式感染锯缘青蟹。人工注射感染方式感染率最高，而且死亡出现的时最早，投喂感染方式较浸泡共居方式感染率高，而且发病死亡出现的时日更早，狮燎染方式感染率比其他组低。关键词锯缘青蟹呼肠孤病毒双顺反子病毒感染途径检测方法中山大学硕士学位论文,．,中山大学硕士学位论文．,．俞，,．，．中山大学硕士学位论文Ⅱ．强缩略词，氨苄青霉素，杆状病毒细胞凋￡二蛋白抑制因子结构域，碱基对，互补，双蒸。
8、粒的塔式蛋白通道上的帽化结构域进行加帽反应。加帽后的产物可以作为正链与负链结合用于基因组包装亦可以进入细胞质中，在核糖体上翻译产生不同的蛋白剧。呼肠孤病毒翻译遵循依赖帽子结构的翻译机制。翻译起始通过端帽子结构，招募核糖体亚基和真核翻译起始因子复合物。复合物由骨架蛋白帽子结合蛋白和依赖的解旋酶组成．在起始因子介导下，复合物促使病毒的和核糖体亚基结合至的中心区域。与此同时，尾结合蛋白促使端的尾与端的帽子结构结合．之后，核糖体复合物通过扫描机制从端到端寻找合适的起始密码子进行翻译起划。翻译首先合成提供病毒复制所需的酶类，其次是合成病毒的结构蛋白，与子代病毒基因组起装配成子代病毒颗粒，最后还有病毒离开细胞所需要的蛋白。呼肠孤病毒般通过对细胞的裂解离开细胞，但是些以昆虫为媒介的呼肠孤病毒也有通过出芽的方式离开细胞。例如环状病毒属，病毒在昆虫细胞。
9、达到．和．，运用该方法检测不同感染时期不同组织中的呼肠孤病毒和双顺反了病毒，在注射感染早期的样品中，只用步可以在心肝胰腺肠胃食道肌肉胸神经节鳃血中检测到呼肠孤病毒只用步可以在心肝胰腺肠食道肌肉胸神经节鳃血淋巴中检测到双顺反子病毒，用巢式可以在胃中检测到双顺反子病毒在濒死的样品中，只用步就可以在上述共九种组织中检测到这两种病毒。运用巢式于年月蛰月对粤中海区共种野生蟹类进行流行病学调查，均未检测出两种病毒，但是，于年至中山人学影学位论文年对广州南沙及珠海养殖场的锯缘青蟹检测结果表明，呼肠孤病毒感染率较高，在以上，双顺反子病毒的感染率在以上。建立了针对这两种病毒的特异性荧光实时定量方法探针法，运用该方法检测不同感染时期不同组织中呼肠孤病毒和双顺反子病毒的量，结采显示，这两种病毒在锯缘青蟹心脏鳃肌肉肝胰腺血淋巴中均有分布，呼肠孤病毒量组织从多。
10、，包括正呼肠孤病毒属，环状病毒属，轮状病毒属，科罗拉多蜱传染症病毒属，东南亚十二节段病毒属，水生呼肠孤病毒属，虫源呼肠孤病毒属，质型多角体病毒属，斐济病毒属巧，植物呼肠孤病毒属，水稻病毒属吻弦洲护埘，苍蝇呼肠孤病毒属。呼肠孤病毒的生物学特性．呼肠孤病毒的形态学特征在负染电镜下，呼肠孤病毒科成员外形均为立体对称的二十面体球形，成熟病毒无包膜，科罗拉多蜱传染症病毒属东南亚十二节段病毒属环状病毒属及轮状病毒属在增殖完成离开细胞前会有短暂的内质网膜或细胞膜成分的披膜。病毒大小。通常认为呼肠孤病毒颗粒有双层衣壳但是质型多角体病毒属和水稻病中山大学硕士学位论文毒属外衣壳结构不明显，外衣壳结构属间存在差异明显，较易被蛋白水解酶消化，被认为是有助于病毒粒子被激活内衣壳结构则较为保守，含个壳粒，呈二十面体对称，内衣壳大．。内衣壳之内是蛋白与核酸复合体的。
11、，二乙基焦碳酸盐，脱氧核糖核酸，三磷酸脱氧核苷，双链，溴化乙锭，大肠杆菌，乙二胺四乙酸，小时，国际病毒分类委员会，千碱基对，锯缘青蟹双顺反子病毒，锯缘青蟹呼肠孤病毒，分钟，信使，光密度，开放阅读框，磷酸盐缓冲液，聚合酶链式反应，依赖的聚合酶中山大学硕士学位论文。峨觚呜，核糖核酸陀，逆转录聚合酶链式反应，秒醋酸电泳缓冲液，桃拉综合症病毒，单位，微克，微升，每分钟转速，非翻译区，白斑综合症病毒，黄头病毒原创性声明本人郑重声明所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果口除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名踢扎日期们。年月譬日学位论文使用授权声明本人。
12、架连起来磷酸化蛋白，还能进行基因组包装。可以选择翻译起始位点。为基础蛋白，可以阻断细胞周期过程。具有单链结合能力，可能与基因组包装的功能有关，。中山大学硕士学位论文呼肠孤病毒的感染过程呼肠孤病毒般通过对宿主细胞细胞膜的穿透或内吞作用进入细胞，如通过蛋白介导的细胞内吞作用”依赖于的渗透作用通过外层蛋白上的突起进行细胞接触，受体介导的内吞作用等。病毒进入细胞过程中通常会形成内体或溶酶体膜成分的披膜，由于外层蛋白较易被蛋白水解酶消化的特性而完成脱壳，产生亚病毒颗粒。呼肠孤病毒的转录与复制在亚病毒颗粒中进行，由病毒核心所携带的聚合酶和其它复制酶共同完成。在病毒核心内，首先由亲代双链负链为模板，转录出正链，再以该正链为模板，合成负链，合成自单位点起始，以．方向进行。负链合成完成后与正链结合形成子代双链。复制酶依赖负链为模板合成正链，通过亚病毒颗。
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迢迢牵牛星十五夜望月寒食古诗三首PPT课件（39页） 编号53