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设计是我在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。
据我所知,除文中已经注明引用的内容外,本论文设计不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。
对本论文设计的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了明确说明并表示谢意。
作者签名刘开荣日期年月日毕业论文设计授权使用说明本论文设计作者完全了解红河学院有关保留使用毕业论文设计的规定,学校有权保留论文设计并向相关部门送交论文设计的电子版和纸质版。
有权将论文设计用于非赢利目的的少量复制并允许论文设计进入学校图书馆被查阅。
学校可以公布论文设计的全部或部分内容。
保密的论文设计在解密后适用本规定。
作者签名刘开荣指导教师签名袁盛勇日期年月日日期年月日毕业论文设计答辩委员会答辩小组成员名单姓名职称单位备注田学军教授生命科学与技术学院主席组长沈登荣讲师生命科学与技术学院孙士卿助教生命科学与技术学院罗思助理研究员生命科学与技术学院红河学院本科毕业论文设计摘要应用球孢白僵菌代谢粗提物与高效氯氰菊酯混合对南瓜实蝇进行毒力及增效倍数的测定,了解混合剂对南瓜实蝇的防治效果及增效情况。
利用球孢白僵菌菌株,通过发酵培养后提取其代谢粗提物,并将其粗提物制备成两种简单的水剂和油剂,分别再与稀释倍液的的高效氯氰菊酯以的比例混合,制成生物与化学农药两种混合型药剂,稀释成倍倍和倍个浓度梯度后对南瓜实蝇成虫幼虫蛹进行毒力测定,计算出增效倍数。
结果表明随浓度梯度增大和时间的推延,累计校正死亡率均逐渐增大值逐渐减小增效倍数逐渐增大。
药后第,高浓度油剂混合剂和水剂混合剂对南瓜实蝇幼虫矫正死亡率最大,为和其次对南瓜实蝇成虫,为和最小是南瓜实蝇蛹,为和,高浓度油剂混合剂和水剂混合剂对南瓜实蝇致死中浓度从大到小依次是蛹成虫幼虫,分别为和和和,油剂混合剂对南瓜实蝇成虫增效倍数最大的,为倍,最小是水剂混合剂对南瓜实蝇幼虫,为倍。
关键词球孢白僵菌南瓜实蝇混合剂增效倍数红河学院本科毕业论文设计红河学院本科毕业论文设计前言南瓜实蝇的研究概况球包白僵菌的研究状况混合药剂防治病害的研究现状研究目的及意义材料与方法材料方法结果与分析球孢白僵菌粗提物水剂与高效氯氰菊酯混合对南瓜实蝇不同虫态的毒力及增效倍数的测定球孢白僵菌粗提物油剂与高效氯氰菊酯混合对南瓜实蝇不同虫态的毒力及增效倍数的测定讨论球孢白僵菌粗提物水剂与高效氯氰菊酯混合剂对南瓜实蝇不同虫态的毒力及增效倍数的测定球孢白僵菌粗提物油剂与高效氯氰菊酯混合剂对南瓜实蝇不同虫态的毒力及增效倍数的测定结论球孢白僵菌粗提物水剂与高效氯氰菊酯混合剂对南瓜实蝇不同虫态的毒力及增效倍数测定球孢白僵菌粗提物油剂与高效氯氰菊酯混合剂对南瓜实蝇不同虫态的毒力及增效倍数测定参考文献致谢红河学院本科毕业论文设计前言南瓜实蝇的研究概况南瓜实蝇属双翅目,实蝇科,寡鬃实蝇属,是种不仅对瓜类危害严重,同时还危害些水果类,如芒果人心果罗汉果等的种昆虫。
南瓜实蝇对寄主的选择不同造成的危害也不同,对不同寄主危害程度也不同,在年时南瓜被害率达到,近来几年寄主范围呈逐渐扩大,危害程度呈加深的趋势。
南瓜实蝇分布范围广,国内外均有分布,在国外主要分布于韩国越南缅甸老挝泰国等地方。
在我国主要分布于海南广州浙江江西湖南湖北四川云南贵州等地,其中华南地区发生量最大。
根据南瓜实蝇的危害特征,有文献报道对南瓜实蝇的主要防治措施是采用农业防治生物防治物理防治和药剂防治。
其中生物防治主要是应用天敌,如蜘蛛可以食成虫。
药剂防治主要是用单的化学农药进行防治,如用敌百虫或溴氰菊酯喷洒,也可以诱杀成虫。
应用混合药剂对南瓜实蝇进行防治尚未见报道。
球包白僵菌的研究状况球孢白僵菌属半知菌亚门丝纲丛梗孢目丛梗孢科球孢白僵菌属,它可以寄生于鳞翅目同翅目膜翅目等个目个科的多种昆虫与螨类,白僵菌是使用最广的真菌杀虫剂。
白僵菌在寄生虫体内进行营养生长的同时还分泌些毒素类代谢物,具有定的毒性,可以直接杀死寄主或加快寄主的死亡,有文献报道病原真菌所分泌的毒素物质在致死寄主过程中起到关键作用。
近几年,许多病原真菌如绿僵菌蜡蚧轮枝菌布氏白僵菌等,用于发酵培养后提取代谢分泌物对粉虱金龟子东亚飞蝗小菜蛾等害虫进行药效研究。
白僵菌代谢物提取用于防治病虫害的相关报道不断增多,大部分是直接将提取物饲喂或血腔注射到虫体内部,李龙,李建庆用白僵菌的代谢粗提物对美国白蛾毒性生测方法的研究,结果采用血腔注射效果更佳。
将提取物制备成药剂剂型后在进行杀虫效果的研究还未见报道。
混合药剂防治病害的研究现状混合药剂是用两种或两种以上的生物农药或化学农药剂根据药剂的特征及作用以不同比例混配而成,混合药剂相对于单剂的药效表现主要在于互补和相加,即表现出增效作用。
混合药剂能降低了农药使用对环境及人类的危害,延前言缓病菌抗药性的发生。
在年时张应阔等就应用两种增效剂对种杀虫剂杀灭家蝇增效的研究,结果增效显著。
近年来应用混合药剂对病害防治的报道增多,李娜等用亿孢子克防治美国白蛾药效试验,结果亿孢子克可湿性粉剂相对于灭幼脲的悬浮剂表现出很好的防治效果。
还有用白僵菌与其他药剂灭幼脲混合防治马尾松毛虫,防治效果可达以上,并具有持续效果。
研究目的及意义本实验主要对球孢白僵菌菌株进行液体发酵培养,提取代谢产物后,分别制成简单的剂型,在剂型中加入化学农药高效氯氰菊酯。
旨在了解化学杀虫剂在生物杀虫剂中对南瓜实蝇的防治效果和增效情况。
混合药剂使用可以降低化学农药的使用,降低生产成本,在药效方面呈相加互补作用,提高社会效益和经济效益,同时通过试验能有效地为实际生产中病虫害防治提供了理论参考依据。
红河学院本科毕业论文设计材料与方法材料供试昆虫供试南瓜实蝇在室内用饲料人工饲养,建立南瓜实蝇种群待用。
供试菌种供试的球孢白僵菌菌株接种于菜青虫上复壮,挑取菌丝于培养基上进行多次分离纯化。
实验仪器养虫笼人工气候箱振荡培养箱离心机分液漏斗旋转蒸发仪和无菌操作台。
方法球孢白僵菌的扩繁将分离纯化的球孢白僵菌接种于萨氏培养基上扩繁,置于培养条件为光照与黑暗比为,温度在,湿度的人工气候箱中培养供试用。
球孢白僵菌的发酵培养将扩繁的球孢白僵菌刮在无菌水和吐温中,制成孢子悬浮液,置于振荡培养箱中振荡后用纱布过滤,用血球计数板计数孢子浓度为个,接种于液体改良察氏培养基中。
的培养瓶中装培养基,按的接种量接种。
置于,的振荡培养箱中培养。
球孢白僵菌代谢粗提物提取将发酵培养的菌丝与培养基用滤纸过滤分开,发酵液经离心机离心,取上清液多次萃取减压浓缩至原体积的,从而得代谢产物粗提物。
药剂剂型配制代谢粗提物水剂剂型制备及混合药剂配制提取代谢产物用旋转蒸发仪浓缩至快干,加蒸馏水至浓缩前体积的润洗提取物,配制的洗衣粉溶液加入提取液中,配制成含有的提取液制剂,制成水剂。
取稀释过倍的高效氯氰菊菊酯和水剂以比例混配,制成混配杀虫剂供试。
材料与方法代谢粗提物油剂剂型制备及混合药剂配制将用旋转蒸发仪浓缩的提取物体积到原体积时取出,与食用油以比例形成含有的提取液制剂,制成油剂。
取稀释过倍的高效氯氰菊酯和油剂以比例混配,再加入十二烷基苯磺酸钠制成混配杀虫剂供试。
不同制剂对南瓜实蝇的毒力测定死亡率死亡个数供试总虫数校正死亡率处理死亡率对照死亡率对照死亡率增效比值单剂的值单剂增效剂的值供试制剂对南瓜实蝇成虫的毒力测定将供试制剂分别稀释成倍倍和倍三个浓度梯度,用清水作对照。
用长宽高分别为的两侧面与上面可通气长方体塑料盒子,先在盒子底部铺层报纸,取头成虫置于瓶内,将各浓度的制剂均匀喷洒在盒壁和虫体上,正常饲养,每个浓度三个重复,连续观察,每天记录虫累计死亡数量。
供试制剂对南瓜实蝇幼虫的毒力测定将供试制剂分别稀释成倍倍和倍三个浓度梯度,用清水作对照。
选取大小均匀的南瓜实蝇幼虫置于溶液中后取出,用毛笔挑起置于有幼虫饲料的培养皿中,保鲜膜封口,防止幼虫爬出,用针刺小洞,置于为的人工气候箱中,连续观察,每天记录幼虫的累积死亡数量。
供试制剂对南瓜实蝇蛹的毒力测定将供试制剂分别稀释成倍倍和倍三个浓度梯度,用清水作对照。
选择同天化成的蛹粒,浸泡后取出晾干,置于放有少量沙子并保持湿度在左右的广口瓶内,用保鲜膜封口,并用针刺小洞,设三个重复。
置于为的人工气候箱,连续观察,每天记录虫累计死亡及羽化数量。
数据统计与分析数据采用进行数据分析,根据校正死亡率进行概率值转换,浓度转换成其对数,计算出回归式,分别估计计量效应和相关系数,在根据公式计算出增效比值。
红河学院本科毕业论文设计结果与分析球孢白僵菌粗提物水剂与高效氯氰菊酯混合对南瓜实蝇不同虫态的毒力及增效倍数的测定球孢白僵菌代谢粗提物水剂与高效氯氰菊酯混合剂对南瓜实蝇幼虫的毒力及增效倍数测定球孢白僵菌粗提物单剂与高效氯氰菊酯和水剂混合剂对南瓜实蝇幼虫的毒力测定如表和在个浓度下第开始就出现幼虫死亡,并且单剂在浓度下其校正死亡率都达到以上,药后第对幼虫毒力最强的单剂其校正死亡率达,混合剂对其校正死亡率达防治效果最差的单剂浓度后为。
随浓度增大和时间增长,单剂和混剂对南瓜实蝇幼虫的累计校正死亡率都呈上升趋势,在第后死亡率呈缓慢上升趋势表,表致死中浓度逐渐减少,呈下降趋势,单剂致死中浓度从第到第由减少到,混合剂则由减少到,同时二者混合剂对南瓜实蝇幼虫的致死中浓度小于单剂的致死中浓度增效倍数逐渐增大,呈上升趋势,都大于,最大为倍表。
在水平上,与和处理之间累积校正死亡率有显著差异,和之间无差异表。
表粗提物单剂对南瓜实蝇幼虫的毒力测定浓度累计校正死亡率表水剂混合剂对南瓜实蝇幼虫的毒力测定混合浓度累计校正死亡率结果与分析表球孢白僵菌代谢粗提物水剂与高效氯氰菊酯混合对南瓜实蝇幼虫的致死中浓度时间天混合比例回归方程相关系数致死中浓度增效倍数球孢白僵菌代谢粗提物水剂与高效氯氰菊酯混合剂对
