1、“.....实验方法培养基的配制僵蚕活性成分的提取及其对大肠杆菌抑制作用的研究培养基配方蛋白胨酵母粉水。牛肉膏蛋白胨培养基配方牛肉膏蛋白胨琼脂粉水。肉汤培养基牛肉膏蛋白胨蒸馏水。将上述培养基于湿热灭菌,保存。取无菌皿若干副按需要计算,将已融化并冷却至左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基按无菌操作倒入培养皿中,使冷凝成平板。比色法按照如下配方配制超声波提取供试液微波提取供试液煎煮提取供试液冷浸提取供试液溶剂对照丙酮分别无菌操作配制,做组平行,恒温摇床培养,每隔分别取种供试液,用型紫外可见分光光度计在下比色,连续测,取个重复的平均值作为最终结果......”。
2、“.....供试管的吸光度小于对照管表明有抑菌活性,吸光度大于或等于对照管表示无抑菌活性,吸光度越大表明抑菌活性越小。纸片扩散试验药敏纸片的制备参考文献的方法进行。将供试物配成的供试液,取制备好的滤纸片直径放入供试液中浸泡,用无菌镊子夹取滤纸片,稍风干备用将菌液浓度为的用无菌刮铲均匀涂抹在平板上。最后,再将制备好的药敏片分别贴在培养基的号位点,然后置于恒温培养箱中培养,分别测定各自的抑菌圈直径。取个重复的平均值作为最终结果。肉汤倍比稀释法参考文献,的方法进行。先取支灭菌的试管,向号管加肉汤培养基,号每管各加肉汤培养基,再向号试管加供试液,然后吸取至第管,混匀后再吸取至第管,如此连续倍比稀释至第管,并从第管中吸取弃去,号管到号管的供试液浓度以提取浸膏计依次为,,,,,,,,和。然后向号管每管加浓度为的菌液,其中号管作为阴性对照......”。
3、“.....号管加入丙酮和菌液作为溶剂对照。将支试管置于恒温培养箱中培养,然后对各管进行比浊,以确定最低抑菌浓度。供试管的混浊度小于阴性对照管表明有抑菌活性,混浊度与阴性对照管相同表示无抑菌活性,混浊度越大表明抑菌活性越小。结果分析提取方法分析表显示,用乙醇作为提取溶剂,不同提取方法提取的僵蚕活性物质的浸膏得率大小顺序为超声波法微波法煎煮法冷浸法。从而说明超声波法提取浸膏得率最高,故选择超声波法提取僵蚕活性物质。表不同提取方法对僵蚕提取物浸膏得率的影响提取方法提取浸膏克数提取浸膏率超声波微波煎煮冷浸注以上样品均为乙醇提取。表显示,用超声波作为提取方法,不同提取溶剂提取的僵蚕活性物质的浸膏得率大小顺序为乙醇甲醇丙酮水乙酸乙脂石油醚二氯甲烷......”。
4、“.....故选择乙醇提取僵蚕活性物质。表不同提取溶剂对僵蚕提取物浸膏得率的影响提取溶剂提取浸膏克数提取浸膏率石油醚二氯甲烷乙酸乙脂丙酮乙醇甲醇水注以上样品均为超声波提取。抑菌实验结果比色法僵蚕活性成分的提取及其对大肠杆菌抑制作用的研究图显示,不同提取方法得到的提取物对均有明显抑菌作用。纸片扩散试验结果药通讯李冬生,王金华,胡征,李轶群白僵蚕主要化学成分及其挥发油的分析化学与生物工程卫功庆,鞠贵春,李慧萍,等白僵蚕化学成分的分析吉林农业大学学报,,王居祥,朱超林,戴虹僵蚕及僵蛹的药理研究与临床应用时珍国医国药董宏平,袁生球孢白僵菌代谢产物的研究概况生物技术时连根桑蚕病原微生物资源开发利用生物技术周英豪,陈书静,李华,等活血平肝祛痰治疗血管性头痛例成都中医药大学学报,,方志刚,张立钦......”。
5、“.....邓继先,等球孢白僵菌毒素的分离毒力检测及结构鉴定微生物学报,,,刘志军治瘿汤治疗甲状腺瘤例湖南中医杂志胡丰林,樊美珍,李增智种白僵菌代谢产物中生物活性物质的研究Ⅰ具有清除自由基的活性物质的分离和制备菌物系统彭延吉,李露丹,邓奕辉僵蚕抗实验性静脉血栓及作用机理的研究湖南中医学院学报马尚谦中药愈痫胶囊治疗癫痫大发作例山西中医王居祥,朱超林,王晓露僵蚕复方制剂的临床应用近况南京中医药大学学报陈可冀抗衰老中药学北京中医古籍出版社,毛宏德白僵蛹中白僵菌素的分离和鉴定中草药僵蚕活性成分的提取及其对大肠杆菌抑制作用的研究江苏新医学院中药大辞典上海上海科技出版社,李国均中国药材学北京中国医药科技出版社,王金华白僵蚕及白僵蛹活性物质的研究与应用时珍国医国药张曙明,陈建民僵蚕的临床应用近况中医药信息王成树......”。
6、“.....王国基,王俊等僵蚕成分及药理作用研究进展中国蚕业,王俊儒天然产物提取分离与鉴定技术杨凌西北农林科技大学李健强,李六金兽医微生物学实验实习指导西安陕西科学技术出版社,吴国娟,张中文,李焕荣等中草药对奶牛乳房炎种致病菌的抑茵效果观察北京农学院学报童延清,李晖紫花地丁蒲公英体外抗菌作用中华微生物学河面医学杂志显示,用乙醇作为提取溶剂,不同提取方法提取的僵蚕活性物质的抑菌活性大小顺序为超声波法煎煮法微波法冷浸法。从而说明种提取方法提取的僵蚕活性物质对均有抑制作用,但超声波法提取物的抑制作用最明显,故超声波法能够更有效地提取僵蚕活性物质......”。
7、“.....样品浓度为以浸膏计,表中抑菌圈直径是次试验平均值。表显示,用超声波作为提取方法,不同提取溶剂提取的僵蚕活性物质的抑菌活性大小顺序为水甲醇乙醇乙酸乙脂丙酮石油醚二氯甲烷。从而说明图不同提取方法提取的僵蚕活性物质对生长的影响样品浓度以浸膏计丙酮对照超声波提取微波提取煎煮提取冷浸提取僵蚕活性成分的提取及其对大肠杆菌抑制作用的研究种提取溶剂提取的僵蚕活性物质对均有抑制作用,但水提取物的抑制作用最明显,故水能够更有效地提取僵蚕活性物质。表不同提取溶剂提取的僵蚕活性物质对生长的影响提取溶剂抑菌圈直径石油醚二氯甲烷乙酸乙酯丙酮乙醇甲醇水注以上样品均为超声波提取,样品浓度为以浸膏计,表中抑菌圈直径是次试验平均值。僵蚕活性物质的最小抑菌浓度表显示,用乙醇作为提取溶剂......”。
8、“.....其对的最低抑菌浓度依次为,,,。用超声波作为提取方法,不同提取溶剂提取的僵蚕活性物质的抑菌活性大小顺序为水甲醇乙醇乙酸乙脂丙酮石油醚二氯甲烷。其对的最低抑菌浓度依次为,,,,。表僵蚕活性物质的最小抑菌浓度供试样浓度溶剂对照阴性对照阳性对照超声波提取微波提取煎煮提取僵蚕活性成分的提取及其对大肠杆菌抑制作用的研究冷浸提取石油醚二氯甲烷乙酸乙酯丙酮乙醇甲醇水注表示清澈表示较清澈表示较混浊表示混浊。结论与讨论提取方法分析乙醇超声波法提取浸膏得率最高。在提取过程中,二氯甲烷容易挥发,建议增加冷凝回流装置。由于本实验研究仅是初步的尝试,在提取工艺方面还十分欠缺,需要进步深入研究,摸索最佳的提取技术。抑菌实验结果不同提取方法得到的提取物对均有明显抑菌作用。不同提取溶剂得到的提取物对均有明显抑菌作用......”。
9、“.....其对的最低抑菌浓度为。在抑菌实验中,僵蚕的有机溶剂提取物浓度以浸膏计时,容易产生脂溶性沉淀,不适于采用比浊法检测僵蚕的有机溶剂提取物的抑菌活性。僵蚕活性成分的提取及其对大肠杆菌抑制作用的研究致谢衷心感谢导师王敦教授唐光辉教授在实验学习和生活中给予的细心指导和帮助。导师们渊博的知识,严谨的治学态度,忘我的敬业精神和宽宏博大的胸怀,使我学到了许多专业知识和做人的道理,也是我终生学习的榜样。衷心感谢西北农林科技大学食品科学与工程学院的老师们在学习和生活中给予的细心指导和帮助。老师们渊博的知识,严谨的治学态度,忘我的敬业精神和宽宏博大的胸怀,使我学到了许多专业知识和做人的道理,也是我终生学习的榜样。感谢西北农林科技大学植保资源与病虫害治理实验室的吕林老师李萌硕士史彩华硕士和吉瑾同学在实验和学习上给与的许多帮助和关心......”。
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