1、不产生抑菌圈,判定林可霉素阴性试样溶液产生抑菌圈,判定林可霉素阳性并计算含量。用回归方程求出标准工作溶液参考浓度对应的抑菌圈数值作为修正值,按式校正试样溶液抑菌圈读数的平均值,再用回归方程求出试样溶液中林可霉素的实测浓度试样中林可霉素的含量按式计算。式中试样中林可霉素的含量,单位为林可霉素效价单位每千克试样溶液中林可霉素的实测浓度,单位,滤过,分装,灭菌葡萄糖溶液取葡萄糖,加水使成,滤过,分装,灭菌营养琼脂培养基豚氯化钠琼脂肉浸液除琼脂外,混合上述成分,加人琼脂,加热溶化后滤过,分装,灭菌,趁热斜放使凝固成斜面。陈牛肉浸出粉酵母浸出粉葡萄糖琼脂水除琼脂和葡萄糖外,混合上述成分,调节使比最终的值略高。,加人琼脂,加热溶化后滤过,加葡萄糖溶解后。

2、,提取溶液中的林可霉素,每次混合,吸出下层氯甲烷提取液,合并到浓缩瓶中,在水浴中蒸干。放冷至室温后加人。氢甲烷溶解残渣,留做薄层层析用。当天使用。薄层板的制备取硅胶,加水约,研磨至呈粘稠状,铺成块薄层.饲料中林可霉素的测定.,修正值该浓度组中参考浓度标准工作溶液所至抑菌圈读数平均值该浓度标准工作溶液抑菌圈读数平均值。以各组溶液浓度的对数与该组溶液被修正后的抑菌圈数值作线性回归,求出回归方程。相关系数提取称取试样,精确至,置锥形瓶中,准确加人盐酸甲醇,振摇,转移至离心管中,离心准确量取离心管中的上清液到分液漏斗中,加人正己烷,氯甲烷,旋摇,弃去下层氯甲烷,反复操作两次。用氨林可霉素的含量,单位为林可霉素效价单位每千克试样溶液中林可霉素的实测浓。

3、至,混匀。,丁酮丙酮水氯甲烷甲醇浓氨溶液,十十,混合,振摇,静置至上下两层均澄清,分取下层混合液备用。林可霉素标准溶液取林可霉素标准品,加甲醇使溶解,用氯甲烷稀释至浓度为。当天配制。供鉴别用。含测定菌悬液的制备取藤黄微球菌的营养琼脂斜面培养物,接种于盛有营养琼脂培养基第章的培养瓶中,在培.饲料中林可霉素的测定。取盐酸,加水至,混匀。,十,氨溶液取浓氨溶液,加水至,混匀。氨溶液取浓氨溶液,加水至,混匀。,丁酮丙酮水氯甲烷甲醇浓氨溶液,十十,混合,振摇,静置至上下两层均澄清,分取下层混合液备用。林可霉素标准溶液取林可霉素标准品,加甲醇使溶解,用氯甲烷稀释至浓度为。当天配制。供鉴别用。,薄层层液,与标准曲线同时操作和培养。判定与结果计算判定试样溶。

4、下层氯甲烷提取液,合并到浓缩瓶中,在水浴中蒸干。放冷至室温后可霉素标准溶液斑点逐渐显现直至清晰可见,取出薄层板立即观察。比较薄层板上各斑点的位置以及颜色,判定方法如下在两块薄层板上,试样溶液在与标准溶液斑点对应处均无斑点出现,且混合加样点的斑点颜色比标准溶液斑点浅,判定试样中林可霉素阴性两块薄层板中,其中块板上的试样溶液在与标准溶液斑点对应处无斑点出现,而另块板出现斑点,判定试样中林可霉素阴性在两块薄层板上,如果试样溶液在与标准溶液斑点对应处均出现斑点,混合加样点只显现个主斑点与标物检定培养基中华人民共和国兽药典年版部的于燥培养基代替,临用时,照使用说明配制和灭菌。.饲料中林可霉素的测定。,试样溶液的制备用氮溶液调节酸提取液至,用氯甲烷分次。

5、溶液,每组滴加至少个双碟,于培养测量各组参考浓度标准工作溶液和该组标准工作溶液抑菌圈数值,分别计算平均值,再计算所有双碟参考浓度标准工作溶液抑菌圈的总均值,作为修正与标准曲线同时制备的至少个双碟,按标准曲线的制备方法分别滴加试样溶液和参考浓度标准工作溶液,与标准曲线同时操作和培养。判定与结果计算判定试样溶液不产生抑菌圈,判定林可霉素阴性试样溶液产生抑菌圈,判定林可霉素阳性并计算含量。用回归方程求出标准工作溶液参考浓度对应的抑菌圈数值作为修正值,按式校正试样溶液抑菌圈读数的平均值,再用回归方程求出试样溶液中林可霉素的实测浓度试样中林可霉素的含量按式计算。式中试样中取盐酸,加水至,混匀。,十,氨溶液取浓氨溶液,加水至,混匀。氨溶液取浓氨溶液,加。

6、,摇匀,分装,灭菌培养基可以采用相词成分的抗生素微生与标准曲线同时制备的至少个双碟,按标准曲线的制备方法分别滴加试样溶液和参考浓度标准工作溶液,与标准曲线同时操作和培养。判定与结果计算判定试样溶液不产生抑菌圈,判定林可霉素阴性试样溶液产生抑菌圈,判定林可霉素阳性并计算含量。用回归方程求出标准工作溶液参考浓度对应的抑菌圈数值作为修正值,按式校正试样溶液抑菌圈读数的平均值,再用回归方程求出试样溶液中林可霉素的实测浓度试样中林可霉素的含量按式计算。式中试样中,修正值该浓度组中参考浓度标准工作溶液所至抑菌圈读数平均值该浓度标准工作溶液抑菌圈读数平均值。以各组溶液浓度的对数与该组溶液被修正后的抑菌圈数值作线性回归,求出回归方程。相关系数提取称取试样,。

7、,单位为林可霉素效价单位每毫升。试样的稀释倍数试样质量,单位为克测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留至整数位。重复性同操作者对同试样同时两次平行测定所得结果的相对偏差不大于附录规范性附录溶液及培养基的配置灭菌氮化钠溶液取氯化钠,加水使成,滤过,分装,灭菌磷酸盐缓冲液取磷酸氢钾与磷酸氢钾。,加水使成。为参考浓度标准工作溶液。取当天制备好的双碟平均分为组,标准工作溶液每浓度为组。每个双碟的个不锈钢小管中,间位的个滴加参考浓度标准工作溶液,另外个滴加该组标准工作溶液,每组滴加至少个双碟,于培养测量各组参考浓度标准工作溶液和该组标准工作溶液抑菌圈数值,分别计算平均值,再计算所有双碟参考浓度标准工作溶液抑菌圈的总均值,作为修正值。各浓度组的抑菌圈。

8、水除琼脂和葡萄糖外,混合上述成分,调节使比最终的值略高。,加人琼脂,加热溶化后滤过,加葡萄糖溶解后,摇匀,分装,灭菌培养基可以采用相词成分的抗生素微生物检定培养基中华人民共和国兽药典年版部的于燥培养基代替,临用时,照使用说明配制和灭菌。预饱和卜,再浸人展开剂中展开,取出,通风挥干。将展开后的薄层板放置在充满碘蒸气的密闭容器内,注意观察,薄层板上的林可霉素标准溶液斑点逐渐显现直至清晰可见,取出薄层板立即观察。比较薄层板上各斑点的位置以及颜色,判定方法如下在两块薄层板上,试样溶液在与标准溶液斑点对应处均无斑点出现,且混合加样点的斑点颜色比标准溶液斑点浅,判定试样中林可霉素阴性两块薄层板中,其中块板上的试样溶液在与标准溶液斑点对应处无斑点出现,而。

9、值按式修正,。式中。该浓度标准工作溶液被修正后的抑菌圈数值到分液漏斗中,加人正己烷,氯甲烷,旋摇,弃去下层氯甲烷,反复操作两次。用氨溶液调节分液漏斗中溶液的值至约必要时可向溶液中加滴酚酞指示剂,帮助确认,加人氯甲烷,旋摇提取,仔细分出下层氯甲烷,反复操作次。合并氯甲烷提取液于旋转蒸发器中,低于减压蒸干,量取磷酸盐缓冲液适量到蒸发瓶中,超声不少于,使残渣中的林可霉素完全溶出,准确定容使溶液中林可霉素的浓度在。之间制成试样溶液。于当天使用。,用磷酸盐缓冲液稀释使成。浓度的标准工作溶液。以。为参考浓度标准工作溶液。取当天制备好的双碟平均分为组,标准工作溶液每浓度为组。每个双碟的个不锈钢小管中,间位的个滴加参考浓度标准工作溶液,另外个滴加该组标准工。

10、高符合中华人民共和国兽药典年版部的要求。不锈钢小管,高士,外径士,内径士符合中华人民共和国兽药典。年版部的要求。.饲料中林可霉素的测定。,薄层层析用,修正值该浓度组中参考浓度标准工作溶液所至抑菌圈读数平均值该浓度标准工作溶液抑菌圈读数平均值。以各组溶液浓度的对数与该组溶液被修正后的抑菌圈数值作线性回归,求出回归方程。相关系数提取称取试样,精确至,置锥形瓶中,准确加人盐酸甲醇,振摇,转移至离心管中,离心准确量取离心管中的上清液到分液漏斗中,加人正己烷,氯甲烷,旋摇,弃去下层氯甲烷,反复操作两次。用氨营养琼脂培养基豚氯化钠琼脂肉浸液除琼脂外,混合上述成分,加人琼脂,加热溶化后滤过,分装,灭菌,趁热斜放使凝固成斜面。陈牛肉浸出粉酵母浸出粉葡萄糖琼。

11、块板出现斑林可霉素效价单位每毫升。试样的稀释倍数试样质量,单位为克测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留至整数位。重复性同操作者对同试样同时两次平行测定所得结果的相对偏差不大于附录规范性附录溶液及培养基的配置灭菌氮化钠溶液取氯化钠,加水使成,滤过,分装,灭菌磷酸盐缓冲液取磷酸氢钾与磷酸氢钾。,加水使成,滤过,分装,灭菌葡萄糖溶液取葡萄糖,加水使成,滤过,分装,灭菌与标准曲线同时制备的至少个双碟,按标准曲线的制备方法分别滴加试样溶液和参考浓度标准工作溶液,与标准曲线同时操作和培养。判定与结果计算判定试样溶液不产生抑菌圈,判定林可霉素阴性试样溶液产生抑菌圈,判定林可霉素阳性并计算含量。用回归方程求出标准工作溶液参考浓度对应的抑菌圈数值作为修正。

12、确至,置锥形瓶中,准确加人盐酸甲醇,振摇,转移至离心管中,离心准确量取离心管中的上清液到分液漏斗中,加人正己烷,氯甲烷,旋摇,弃去下层氯甲烷,反复操作两次。用氨超过两周取平板培养基第章加热融化,冷却至士,加人适量菌悬液以参考浓度标准工作溶液所至抑菌圈直径在士为宜,必要时,每培养基中可加人葡萄糖溶液,摇匀。每个双碟加人,均匀摊布,放置水平台上冷却,待培养基凝固后,将双碟倒置于冷藏以上。临用前取出,圆周上等距离放置个不锈钢小管标准曲线的制备量取林可霉素标准储备液,用磷酸盐缓冲液稀释使成。浓度的标准工作溶液。.饲料中林可霉素的测定.析用,全玻璃配有针头。浓缩瓶,容量,具塞,底部具。刻度尾管。玻璃板,规格,展开槽,立式,双槽,规格,平底双碟,直径约。

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