1、估标准,包括基础和操作原理。实验室应通过内部质量控制进行能力建设见。注在中有提供调查菌落计数结果不理想原因移液管初始悬浊液的不均性计数等的方法。实验室人员的能力验证实验室人员的能力应定期评估。包括参与内部质量保证程序能力验证见指南使用参考材料或按对微生物计数方法进行自我评估测试。卫生为了防止污染样品和培养基以及个体感染,应执行下列个人卫生预防措施穿着齐整干净的合身实验服,实验服由防火布料制成,不得在工作区域或衣帽间以外穿着实验服为保持样品不受污染,必要时要带发套保持指甲干净并适当剪短微生物实验操作前后以及上洗手间之后,应立刻用温水将手彻底数学公式所有情况使用的近似公式任何稀释度和平行试管的值由式获得犣犿犿犿槡式中犣阳性试管数犿样品参考质量,单位为克犿阴性管的样品总质量,单位为克犿所有管。

2、合鉴定标准的菌落,按式进行计算。犖犮犞犱式中犖每克毫升样品中的菌落数,犛犖犜犮两个连续稀释度平板上的菌落数平均之和当位置。根据个菌落计数规则进行计数,选择任扇形区,从边缘向中心计数菌落直至计数到个菌落。继续计数已观察到第个菌落的扇形区中所含有的剩余菌落。计数相对同样的扇形区段的菌落,并且根据这两个区段的接种量区分两个区域的菌落数,每部分计数栅适宜的接种量参见各螺旋接种仪操作手册。培养除非有特别说明,接种后立即翻转平板,然后迅速将他们放置于适当温度的培养箱中。如果容易产生脱水现象如培养箱为或空气流动过强时,培养前用塑料袋松散地包好,或采取其他等效的措施。在培养过程中,温度微小变化是不可避免和允许的,例如培养箱开和关的过程。但是,这些犛犖犜过程的变化应该控制到最小,并保证不会影响到实验结果。注意。

3、生。最差是类别结果,被认为高度可疑。假定测试结果是正确的,则预计的组合落在类别,落在类别,落在类别,落在类别。类别的详细说明见表。在多于个稀释度的情况中,正确的个连续稀释度选择未必总是明确的。但是,记录所有阳性管数的可能组合和从表中获得相应类别是容易做到的。然后,应用以下规则示例见表选择类别中的个连续稀释度组合,查出值,如果类别有超过个以上组合,采用最高阳性管数的数值如果没有个类别的组合可用,应用类别组合,如果类别中有超过个以上组合,采用最高阳性管数的数值如果没有个类别的组合板计数琼脂或用于检测目标微生物如霉犛犖犜菌的选择性培养基,制成平板,打开盖在空气中暴露后,培养计数。也可使用其他有效的检测表面污染的方法。操作人员概述人员能力的般要求按的有关条款。能力对每项方法或技术都需建立适当的能力。

4、响。为使生长速度统,保证接种作为个菌落计。各种计算方法见,包括无菌落生长的平板。当使用螺旋接种仪时,根据进行菌落计数。结果表达概述般情况如下每个稀释度接种到个直径平板总菌落数最多数目为每个平板在计数典型菌落或可疑菌落时的总菌落数典型和非典型最好是每个平板典型或可疑菌落的最大数目每个平板接种鉴定或验证的可疑菌落数般每个平板。这些数字由具体标准规定。如果不是使用直径的平板,菌落的最大数目根据平板或滤膜表面积或增或减。下列计算方法是假设实验操作正确的情况。偶尔发生特殊情况时如两个连续稀释度的稀释因子的比率可能差别很多,计数结果需要经过有资质的微生物专家验证,必要情况下可以否定结果。计算方法般情况总菌落或典型菌落的计数为保证结果的有效性,般需要计数个以上平板,平板包含至少个菌落包括总菌落典型菌落或符。

5、条件下,便于操作维护清洁消毒与校准,并保持整洁与良好的工作状态。使用前应核查设备是否符合指定要求,使用过程中应对其性能的有效性进行。根据需要,应对设备和装置进行可溯源至国家标准的校准,并实施再校准和所有必要的期间检查,将校准程序和结果予以文件化。每个实验室应根据仪器型号实验室能力水平和制造商的说明书来决定仪器各项校准核查的频率。定期检查和维护设备,保证安全适用。依据工作条件及结果准确度的要求对设备进行。检,置信区间范围下限,上限。多稀释系统表个连续稀释度对称稀释系统常用每稀释度管或管平行。记录每列试管的阳性管数,从表中读取相应样品量的最可能数。些阳性管数的组合会比其他组合更可能发生。例如比发生的概率低。为量化这种概率,所有阳性结果的组合按分类。类别结果发生概率更高,类别结果少犛犖犜见,不易发。

6、的样品总质量,单位为克每个样品参考质量的微生物含量,单位为克般,有时。个系列试管的精确方法单个系列试管的值由式获得犿犿狀狀狕式中犿样品参考质量,单位为克犿每系列试管的样品质量,单位为克自然对数狀个系列中的试管数狕阳性试管数。犛犖犜单稀释度试验精确度估算使用式近似计算的置信区间狓犿犿狀狕狀狕狀狕狀槡熿燀燄燅狀式中狓置信区间的上限或下限犿样品参考质量,单位为克犿每系列试管的样品质量,单位为克自然对数狀个系列中的试管数狕狀阴性试管数。计算下限时使用加号,计算上限时使用减号。大多数试管都是阴性时,近似值不够准确,转盘的接种针头下。样品通过接种针头螺旋状地将样液分布到平板表面上。移开接种好的平板,将接种针头放置到开始的位置。清洗接种针头后,再接种其他平板。培养后,将螺旋平板计数栅放在中间适当位置。根据。

7、在些情况下,计数时为避免混淆样品中的杂质和菌落,将接种的平板放置于保存,与接种培养的平板比较以区分杂质和菌落,也可以使用放大镜区分杂质和菌落。在些情况下,由于实验室工作的需求,在培养前,接种好的平板最长冷藏。如果这面污渍,防止污染平皿。将熔化好保持在的琼脂培养基倒入平皿,平皿般倾注,避免直接倒在含接种物的溶液上。立即将溶液和培养基小心混匀,将平皿置于水平表面冷却凝固凝固时间不能超过。倾注过程避免培养基漏到容器外或平皿盖子上。如果检测中已经预计会有蔓延菌落存在,用灭菌的无营养琼脂或其他指定培养基覆盖凝固的平皿,以防止或减小菌落蔓延。犛犖犜涂布法概述涂布法用于只能在琼脂表面生长的菌落计数,比平板倾注法具有优势,更易观察菌落表面形态,提高分析人员对不同类型菌落的鉴别能力。由于涂布法使微生物不受熔化。

8、到试管壁上。打开灭菌平皿盖,使移液管能够插入即可,排出溶液。从水浴锅中取出琼脂培养基时,用干布擦去瓶子表面污渍,防止污染平皿。将熔化好保持在的琼脂培养基倒入平皿,平皿般倾注,避免直接倒在含接种物的溶液上。立即将溶液和培养基小心混匀,将平皿置于水平表面冷却凝固凝固时间不能超过。倾注过程避免培养基漏到容器外或平皿盖子上。如果检测中已经预计会有蔓延菌落存在,用灭菌的无营养琼脂或其他指定培养基覆盖凝固的平皿,以防止或减小菌落蔓延。犛犖犜涂布法概述涂布法用于只能在琼脂表面生长的菌落计数,比平板倾注法具有优势,更易观察菌落表面形态,提高分析人员对不同类型菌落的鉴别能力。由于涂布法使微生物不受熔化培养基的热力,所以可获得更高的计数量。预先倒好至少有厚的培养基,这个厚度可以使微生物不受气泡和水蒸气的影响。为。

9、养基的热力,所以可获得更高的计数量。预先倒好至少有厚的培养基,这个厚度可以使微生物不受气泡和水蒸气的影响。为使生长速度统,保证接种溶液在内被吸收,可按或相关标准方法使凝固的培养基表面干燥。手工涂布法用灭菌移液管,把液体样品或初始悬浊液般是或转移到培养基平皿中直径均为或。每个稀出口食品微生物学检验通则.洗净,最好使用无需用手操作的水龙头,尽可能使用专用的清洁液体粉状肥皂或合适的消毒剂,使用专用纸张或专用毛巾擦手,这些防范措施适用于实验室人员和来访者操作打开后的样品培养基以及接种时,禁止说话咳嗽等有皮肤感染或疾病的人员,应防止携带的微生物污染样品而使结果无效不得在实验室内进食和饮水,不得将个人消费品放在实验室冰箱或冰柜中禁止用嘴吸移液管。仪器设备为了与良好实验室规范致,实验设备应放置于适宜的环境。

10、度系统标准不确定度可以由式获得犛犈犳槡狀式中犛犈标准偏差犳连续稀释度间的稀释因子狀每稀释度管数。估算值乘以或除以犛犈的逆对数可以近似地得到置信区间的上限和下限。这个步骤可能会使置信区间上限偏大。犕犘犖表单稀释度系统表附录中的表表列出了值和每个测试样个个个和个平行管数的置信区间每管接种同稀释度。要表示每样品参考质量或体积的结果,乘以值和限值的比率参考质量除以测试样质量,不要乘以不确定标准对数。食品微生物中参考质量般为。测试样质量要与作为接种液的样品的量相符合,例如的均匀样等于。示例倍稀释的样品接种到管双料肉汤。培养后,管有生长。样品中最可能细菌密度是多少表给出每管值,置信上限,下限。测试样为,相当于样品,所以每克样品的值为平板倾注法吸取规定量的检测稀释液,将移液管尖部靠试管壁使移液管剩余液体粘。

11、使生长速度统,保证接种立和实施食品和动物饲料微生物学微生物检验试验样品及初始悬浊液和十倍制稀释液的制备水质微生物培养计数指南乳和乳制品微生物检验试验样品及初始悬浊液和十倍制稀释液制备通用指南乳和乳制品微生物实验室内质量控制第部分菌落计数用分析性能评定乳和乳制品微生物实验室内质量控制第部分平行板和后续稀释步骤的菌落计数可靠性测定食品和动物饲料微生物学可替代方法的确认程序食品和动物饲料微生物学定量检测的测量不确定度评估指南实验室场所概述本条款是实验室设计通用要求,注意样品的接收和制备应与其他检测样品有效隔离,以防止交叉污染。安全要求实验室设计应遵守不同微生物类型的安全要求。微生物分成个危害等级危害等级低个体危害,低群体危害不会导致人类和动物疾病的微生物。危害等级中等个体危害,低群体危害能引起。

12、个菌落计数规则进行计数,选择任扇形区,从边缘向中心计数菌落直至计数到个菌落。继续计数已观察到第个菌落的扇形区中所含有的剩余菌落。计数相对同样的扇形区段的菌落,并且根据这两个区段的接种量区分两个区域的菌落数,每部分计数栅适宜的接种量参见各螺旋接种仪操作手册。培养除非有特别说明,接种后立即翻转平板,然后迅速将他们放置于适当温度的培养箱中。如果容易产生脱水现象如培养箱为或空气流动过强时,培养前用塑料袋松散地包好,或采取其他等效的措施。在培养过程中,温度微小变化是不可避免和允许的,例如培养箱开和关的过程。但是,这些犛犖犜过程的变化应该控制到最小,并保证不会影响到实验结果。注意在些情况下,计数时为避免混淆样品中的杂质和菌落,将接种的但当阳性管数增加时,近似值会提高。对称多稀释度试验的精确度估算对称多稀。

参考资料：

[1]QLM 0001 S-2019 肉粉肠（第9页，发表于2022-06-26）

[2]DB65T 2764-2007 无公害农产品 猴头菇生产技术规程（第6页，发表于2022-06-26）

[3]TCNFIA 005.5-2019 坚果籽类食品质量等级 第5部分：生干开心果（第11页，发表于2022-06-26）

[4]DB5205T 5-2020 地理标志产品 大方冬荪（第10页，发表于2022-06-26）

[5]DB65T 2818-2007 白杏（第7页，发表于2022-06-26）

[6]DB65T 3221-2011 聚酯（PET）食用油壶（第10页，发表于2022-06-26）

[7]QSZN 0017 S-2019 藏诺牌锌硒片（第8页，发表于2022-06-26）

[8]QLHSP 0005 S-2019 油炸类方便菜肴（第8页，发表于2022-06-26）

[9]QSZN 0013 S-2019 藏诺牌钙片（第8页，发表于2022-06-26）

[10]TCNFIA 005.8-2019 坚果籽类食品质量等级 第8部分：生干杏核和杏仁（第11页，发表于2022-06-26）

[11]DB21T 2624-2016 出口板栗区域化基地质量安全控制规范（第11页，发表于2022-06-26）

[12]QQJSX 0001 S-2019 花色挂面（第5页，发表于2022-06-26）

[13]QLTB 0001 S-2019 预调利口酒（配制酒）（第8页，发表于2022-06-26）

[14]TCNFIA 005.1-2019 坚果籽类食品质量等级 第1部分：生干核桃（第11页，发表于2022-06-26）

[15]QYZL 0007 S-2019 极元牌参景芪苓胶囊（第15页，发表于2022-06-26）

[16]JJF 1825-2020 麦氏细菌浊度分析仪校准规范（第15页，发表于2022-06-26）

[17]DB44T 2054-2017 地理标志产品 观音阁花生（第10页，发表于2022-06-26）

[18]DB50T 867.2-2018 安全生产技术规范 第2部分：通用要求（第77页，发表于2022-06-26）

[19]QQGM 0003 S-2019 红腰豆罐头（第5页，发表于2022-06-26）

[20]QWSWT 0002 S-2019 饸饹卤（第7页，发表于2022-06-26）