1、物核苷酸序列注划线部分为引物序列启动子扩增产物核苷酸序列注划线部分为引物序列终止子扩增产物核苷酸序列玉米转基因成分筛查方法.。乙铵乙酸钠溶液乙铵乙酸钠，加入水中，再加入适量氢氧化钠溶液，加热至完全溶解后，冷却至室温，用氢氧化钠溶液，加水定容至。条件下灭菌。羟甲基氨基甲烷盐酸溶液羟甲基氨基甲烷溶解于水中，加水定容至。条件下灭菌。缓冲液分别量取羟甲基氨基甲烷盐酸溶液和乙铵乙酸钠溶液，加水定容至。条件下灭菌。缓冲液羟甲基氨基甲烷，先用水加热搅拌溶解后，加乙铵乙酸钠溶液，然后加水定容到。使用时用水。

2、，垂直向上轻轻拔去梳板。取产物与加样缓冲液混合后加入凝胶点样孔，同时在其中个点样孔中加入分子量标准，接通电源在条件下电泳检测。本标准适用玉米及其制品中内标准基因启动子终止子基因基因基因的定性筛查检测规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本包括所有的修改单适用于本文件。分析实验室用水规格和试验方法转基因植物及其产品检测通用要求农业注划线部分为引物序列。玉米转基因成分筛查方法。进行反应。反应程序按表。

3、。其他相关仪器设备。分析步骤抽样按和农业部号公告规定的执行。试样准备按和农业部号公告规定的执行。试样预处理按农业部号公告规定的执行。玉米转基因成分筛查方法。氢氧化钠溶液在氢氧化钠，溶解后再加水定容到注划线部分为引物序列。玉米转基因成分筛查方法。分子量标准可以清楚的区分的片段。混合溶液将浓度为的种脱氧核糖核苷酸溶液等体积混合。聚合酶反应缓冲液及氯化镁溶液。引物注划线部分为引物序列基因扩增产物核苷酸序列注划线部分为引物序列注划线部分为引物序列基因扩增产物核苷酸序列注划线部分为引物序列基因扩增产。

4、因玉米外源基因引物序列检测基因引物序列扩增片段长度基因性质内标准基因外源基因反应。反应程序按表进行。表反应程序基因名称变性扩增循环次数最终延伸反应结束后取出管，对反应产物进行电泳检测。对照反应在试样反应的同时，应设置阴性对照阳性对照和空白对照。以非转基因玉米基因组作为阴性对照以含有基因的转基的基因组作为阳性对照以水作为空白对照。各对照反应体系中，除模板外，。产物电泳检测按的质成琼脂糖溶液。每琼脂糖溶液中加入溶液，混匀，稍适冷却后，将其倒入电泳板上，插上梳板，室温下凝固成凝胶后，放入缓冲液中。

5、溶液。引物玉米内标准基因和转基因玉米外源基因检测时所用的引物序列见表。表玉米内标准基因和转基因玉米外源基因引物序列检测基因引物序列扩增片段长度基因性质内标准基因外源基因冲液分别量取羟甲基氨基甲烷盐酸溶液和乙铵乙酸钠溶液，加水定容至。条件下灭菌。缓冲液羟甲基氨基甲烷，先用水加热搅拌溶解后，加乙铵乙酸钠溶液，然后加水定容到。使用时用水稀释成。加样缓冲液溴酚蓝，加水，在室温下溶解甲基苯腈蓝，用水溶解蔗糖，用水溶解。混合以上种溶液，加水定容至，在下保存。凝胶成像系统或照相系统。重蒸馏水发生器或纯水。

6、稀释成。加样缓冲液溴酚蓝，加水，在室温下溶解甲基苯腈蓝，用水溶解蔗糖，用水溶解。混合以上种溶液，加水定容至，在下保注划线部分为引物序列基因扩增产物核苷酸序列外源基因外源基因引物溶液用缓冲液或水分别将上述引物稀释到。石蜡油。氢氧化钠溶液在氢氧化钠，溶解后再加水定容到。乙铵乙酸钠溶液乙铵乙酸钠，加入水中，再加入适量氢氧化钠溶液，加热至完全溶解后，冷却至室温，用氢氧化钠溶液，加水定容至。条件下灭菌。羟甲基氨基甲烷盐酸溶液羟甲基氨基甲烷溶解于水中，加水定容至。条件下灭菌。缓回收的产物克隆测序，与玉。

7、进行。表反应程序基因玉米转基因成分筛查方法.注划线部分为引物序列基因扩增产物核苷酸序列注划线部分为引物序列基因扩增产物核苷酸序列注划线部分为引物序列注划线部分为引物序列基因扩增产物核苷酸序列注划线部分为引物序列启动子扩增产物核苷酸序列注划线部分为引物序列终止子扩增产物核苷酸序列相系统拍照。如需通过序列分析确认扩增片段是否为目的片段，。产物回收按产物回收试剂盒说明书，回收扩增的片段。产物测序验证将回收的产物克隆测序，与玉米内标准基因基因序列参见附录进行比对，确定扩增的片段是否为目的片段。结果。

8、于凝胶成像系统或紫外透射仪上成像。根据分子量标准估计扩增条带的大小，将电泳结果形成电子文件存档或用照启动子终止子基因基因和基因，检测结果为阴性。在试样反应中，内标准基因得到扩增，且扩增片段大小与预期片段大小致启动子终止子基因基因和基因中任何个得到扩增，且扩增片段大小与预期片段大小致，表明试样中检测出转基因成分。结果表述为试样中检测出，检测结果为阳性。附录资料性附录基因扩增产物核苷酸序列玉米转基因成分筛查方法.注划线部分为引物序列基因扩增产物核苷酸序列量浓度称量琼脂糖，加入缓冲液中，加热溶解。

9、析与表述对照检测结果分析阳性对照的反应中，内标准基因和外源基因均得到扩增，且扩增片段大小与预期片段大小致，而在阴性对照中仅扩增出内标准基因片段，空白对照中没有任何扩增片段，表明反应体系正常。否则表明反应体系不正常，需要查找原因重新检测。样品检测结果分析和表述在试样的反应中，内标准基因得到扩增，且扩增片段大小与预期片段大小致而注划线部分为引物序列注划线部分为引物序列基因扩增产物核苷酸序列分子量标准可以清楚的区分的片段。混合溶液将浓度为的种脱氧核糖核苷酸溶液等体积混合。聚合酶反应缓冲液及氯化镁。

10、因成分。结果表述为试样中未检测出玉米内标准基因和转基因玉米外源基因检测时所用的引物序列见表。表玉米内标准基因和转基因玉米外源基因引物序列检测基因引物序列扩增片段长度基因性质内标准基因外源基因外源基因外源基因注划线部分为引物序列注划线部分为引物序列基因扩增产物核苷酸序列注划线部分为引物序列基因扩增产物核苷酸序列注划线部分为引物序列注划线部分为引物序列基因扩增产物核苷酸序列外源基因外源基因外源基因外源基因引物溶液用缓冲液或水分别将上述引物稀释到。石蜡油。凝胶成像分析电泳结束后，取出琼脂糖凝胶，。

11、，配制成琼脂糖溶液。每琼脂糖溶液中加入溶液，混匀，稍适冷却后，将其倒入电泳板上，插上梳板，室温下凝固成凝胶后，放入缓冲液中，垂直向上轻轻拔去梳板。取产物与加样缓冲液混合后加入凝胶点样孔，同时在其中个点样孔中加入分子量标准，接通电源在条件下电泳检测。凝胶成像分析电泳结束后，取出琼脂糖凝胶，置于凝胶成像系统或紫外透射仪上成像。根据分子量标准估计扩增条带的大小，将电泳结果形成电子文件存档或用照相系统拍照。如需通过序列分析确认扩增片段是否为目的片段，。产物回收按产物回收试剂盒说明书，回收扩增的片段。

12、内标准基因基因序列参见附录进行比对，确定扩增的片段是否为目的片段。结果分析与表述对照检测结果分析阳性对照的反应中，内标准基因和外源基因均得到扩增，且扩增片段大小与预期片段大小致，而在阴性对照中仅扩增出内标准基因片段，空白对照中没有任何扩增片段，表明反应体系正常。否则表明反应体系不正常，需要查找原因重新检测。样品检测结果分析和表述在试样的反应中，内标准基因得到扩增，且扩增片段大小与预期片段大小致而启动子终止子基因基因和基因均未得到扩增，或扩增片段大小与预期片段大小不致，表明试样中未检测出转基。

参考资料：

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