后沸水浴灭酶。调值至，离心，弃上清液，沉淀水洗次但的溶解性对的敏感度较低。时，溶解性均逐渐下降时，溶解性均逐渐上升，在等电点值附近时，和的溶解性最差，究其原因是，蛋白质在等电点附近时，溶液正负电荷达到平衡，蛋白质分子间的排斥力很小，更容易形成大的不溶性聚集体，因此，溶解度最低当远离等电点时，平衡被打破，在较酸或较碱环境下，蛋白质溶液带正电荷或负电荷，蛋白质分子间的排斥力增大，体系分散性越好，则溶解性越好。溶解性明显低于，原因是经过酶改性后，大豆蛋白分子内或分子间形成了以共价键键连接的共转谷氨酰胺酶改性大豆分离蛋白的溶解性研究农作物论文蛋白电泳液，本试验要分析硫键的变化规律，因此，需添加巯基乙醇作还原处理进行对比。电泳采用的方法，制得的分离胶浓度为，浓缩胶浓度为，上样量，恒压电泳，电流为，浓缩胶电压为，分离胶电压为。电泳完毕，固定并染色，染色后脱色，然后用扫描仪进行扫描，并分析图谱。转谷氨酰胺酶改性大豆分离蛋白的溶解性研究农作物论文。大豆分离蛋白样品的制备将脱脂豆粕与水按∶∶比例混合，调值至，搅拌后纱布过滤，过滤液离心，上清液调值至，静臵后离心，水试验对试验结果进行检验来改善。参考文献冯建岭，彭云婷，李迎秋大豆分离蛋白的功能特性及应用粮食与食品工业，周冬丽，盖钧镒，魏安池酶法改性大豆分离蛋白研究进展及发展前景粮食加工，焦洁考马斯亮蓝染色法测定苜蓿中可溶性蛋白含量农业工程技术，熊拯大豆分离蛋白溶解性的影响因素研究农产品加工学刊，张海均，程仲毅，贾冬英，等转谷氨酰胺酶聚合改性大豆分离蛋白的功能特性研究食品科技张辉离子强度对大豆分离蛋白结构及表面疏水性的影响食品工业科技张志衡，王升楠，卢亚东，李玉娥，陈振家转谷氨酰胺酶改性大豆分离蛋白浓度为，条带颜色最浅，其余泳道的条带颜色基本保持致，整体比未加入巯基乙醇时的颜色更深。结论与讨论大豆分离蛋白经酶交联后形成了以键连接的更加稳定的蛋白质网络结构，因此，在不同温度盐离子浓度下，的溶解性均低于，在食品行业中可以用以改善因蛋白质溶解酸败而出现的食品问题，具有重要的研究价值。随着温度的升高，的溶解度呈先上升后下降的趋势，在时溶解度最高，溶解度变化不大。的溶解度随值的增加呈先下降后上升的趋势且明显低于，在值即等电点时溶解度最低。的不同盐离子浓度下上清和沉淀的电泳图谱从图可以看出，在非还原电泳图谱中，的上清蛋白亚基主要分布在。随着盐离子浓度的增加，条带颜色逐渐变浅，说明随着盐离子浓度的增加，的溶解度逐渐降低，这与图中的溶解性变化曲线相符不同盐离子浓度条件下，上清液中的蛋白亚基种类没有发生改变，说明盐离子浓度的变化不会改变上清中的亚基分布。在还原电泳图谱中，各泳道浓缩胶消失，相对分子质量大于及的亚基除了和亚基外颜色均变浅，亚基完全消失，说明这些亚基主要是由硫键形成的在的的区间。的亚基条带对于变化较为敏感，值为时颜色较浅，值时亚基条带颜色较深，值在时，亚基条带的颜色随值的升高逐渐加深。在还原电泳图谱中，相对分子质量在及大于的亚基条带颜色明显变浅，在及附近的亚基消失，在的亚基消失，说明这些亚基主要是通过硫键形成在的亚基和的亚基颜色加深，推测是由于亚基断裂形成，这与等研究结果相符。从图可以看出，无论是在非还原还是还原条件下，条泳道的颜色最深，说明等电点附近沉淀中的蛋白含量最高，对应了图上清中蛋白出现新的亚基，这可能是蛋白亚基断裂形成的，与部分学者得出的结果致。由于当前在食品加工中些功能特性的兼容性较差，且很难同时兼具多种功能，而生产上需求的却是专项最佳功能或兼具几种功能平衡的产品。因此，需对其进行改性处理。转谷氨酰胺酶简称是种催化转酰基酶，它能催化蛋白质中赖氨酸上的ε氨基与谷氨酸上羟酰胺基之间发生联合反应，聚合蛋白多肽形成共价聚合物。而酶交联能改变的溶解性凝胶特性疏水性等性质，利用酶交联改性大豆分离蛋白，使的空间结构和功能特性得以改变，能够满足人们的生产要求解性致。在非还原电泳图谱中，上清中的蛋白亚基主要分布在和大于的区间。的亚基条带对于变化较为敏感，值为时颜色较浅，值时亚基条带颜色较深，值在时，亚基条带的颜色随值的升高逐渐加深。在还原电泳图谱中，相对分子质量在及大于的亚基条带颜色明显变浅，在及附近的亚基消失，在的亚基消失，说明这些亚基主要是通过硫键形成在的亚基和的亚基颜色加深，推测是由于亚基断裂形成，这与等研究结果相符。从图可以看出，无论是在非还原还是还原条件下，条图谱中可以明显看出，有条亚基亚基。相对分子质量在的亚基在不同温度下主要是以可溶性粒子形式存在于上清液中在等电点附近时主要以沉淀形式存在盐离子浓度的增加不会改变溶液中的亚基分布。在加入巯基乙醇后，亚基的硫键断裂，生成其他新的亚基。本试验结果与部分学者的研究结果相似，不足之处在于试验存在定的误差，可通过多次试验对试验结果进行检验来改善。参考文献冯建岭，彭云婷，李迎秋大豆分离蛋白的功能特性及应用粮食与食品工业，周冬丽，盖钧镒，魏安池酶法改性大豆分离蛋白研究进转谷氨酰胺酶改性大豆分离蛋白的溶解性研究农作物论文解度，再次印证了等电点附近溶解度变化规律。在非还原电泳图谱中，沉淀的亚基主要分布在，值为时亚基条带颜色最浅，值时颜色最深，值在时，各亚基条带颜色随增加越来越浅与图相比，亚基和亚基的颜色在图中较深，在图中较浅，说明亚基和亚基主要存在于上清中，为可溶性单体。在还原电泳图谱中，亚基和大于的亚基颜色明显变浅，说明这些亚基主要是通过硫键连接形成同样，值在的亚基条带随增加颜色逐渐变浅，在出现新的亚基，这可能是蛋白亚基断裂形成的，与部分学者得出的结果析，探究改性前后大豆分离蛋白聚集特性的变化，旨在为改性大豆分离蛋白在食品中的应用提供定的参考。材料和方法材料试验材料与试剂大豆脱脂豆粕购于金源粮油工业有限责任公司，蛋白质转谷氨酰胺酶考马斯亮蓝牛血清蛋白无水乙醇巯基乙醇丙烯酰胺甲双叉丙烯酰胺溴酚蓝过硫酸铵低分子量甲基乙胺分析纯。不同下上清与沉淀电泳图谱由图可知，泳道的亚基条带颜色很浅，说明在此区间蛋白溶解度很低，这与在等电点附近的溶解性致。在非还原电泳图谱中，上清中的蛋白亚基主要分布在和大，盐离子浓度为，其余泳道的亚基条带颜色基本保持致。对比图发现，在和大于的亚基在图中颜色加深，说明这些亚基主要是以不溶性聚集体的形式存在。在还原电泳图谱中，各泳道浓缩胶消失，亚基完全消失，大于的亚基条带颜色变浅，说明这些亚基主要是由硫键连接形成的。在的亚基颜色明显变深，附近出现新的亚基，推测是亚基断裂形成了这些新的亚基。同样是在盐离子浓度为，条带颜色最浅，其余泳道的条带颜色基本保持致，整体比未加入巯基乙醇时的颜色更深。结论与讨论大豆分离蛋白经酶交联后形成了以键连接的更加稳定的如改性后蛋白产物中小分子肽组分含量高，比氨基酸蛋白质更易于被人体消化吸收改性后的大豆蛋白具有更高的应用价值，可以拓宽在食品工业中作为配料应用的范围。国内外很多学者对酶交联改性的功能特性已有定的研究，但温度盐离子浓度对改性溶解性影响的研究却寥寥无几，再者，溶解性作为食品的主要功能特性，具有很重要的研究价值。本研究以脱脂豆粕为原料制备和，研究它们分别在不同温度和盐离子浓度下改性前后大豆分离蛋白的溶解性，并使用电泳技术对改性后的大豆分离蛋白组分进行了亚基道的颜色最深，说明等电点附近沉淀中的蛋白含量最高，对应了图上清中蛋白溶解度，再次印证了等电点附近溶解度变化规律。在非还原电泳图谱中，沉淀的亚基主要分布在，值为时亚基条带颜色最浅，值时颜色最深，值在时，各亚基条带颜色随增加越来越浅与图相比，亚基和亚基的颜色在图中较深，在图中较浅，说明亚基和亚基主要存在于上清中，为可溶性单体。在还原电泳图谱中，亚基和大于的亚基颜色明显变浅，说明这些亚基主要是通过硫键连接形成同样，值在的亚基条带随增加颜色逐渐变浅，在展及发展前景粮食加工，焦洁考马斯亮蓝染色法测定苜蓿中可溶性蛋白含量农业工程技术，熊拯大豆分离蛋白溶解性的影响因素研究农产品加工学刊，张海均，程仲毅，贾冬英，等转谷氨酰胺酶聚合改性大豆分离蛋白的功能特性研究食品科技张辉离子强度对大豆分离蛋白结构及表面疏水性的影响食品工业科技张志衡，王升楠，卢亚东，李玉娥，陈振家转谷氨酰胺酶改性大豆分离蛋白的溶解性研究山西农业科学，。不同下上清与沉淀电泳图谱由图可知，泳道的亚基条带颜色很浅，说明在此区间蛋白溶解度很低，这与在等电点附近的白质网络结构，因此，在不同温度盐离子浓度下，的溶解性均低于，在食品行业中可以用以改善因蛋白质溶解酸败而出现的食品问题，具有重要的研究价值。随着温度的升高，的溶解度呈先上升后下降的趋势，在时溶解度最高，溶解度变化不大。的溶解度随值的增加呈先下降后上升的趋势且明显低于，在值即等电点时溶解度最低。的溶解度在盐离子浓度大于，后随盐离子浓度的升高而下降。本试验结果与大多数学者的研究结果相似，不足之处在于试验方法单，还有待进步研究。从非还原状态下的电转谷氨酰胺酶改性大豆分离蛋白的溶解性研