含甲酸溶解，转移至量瓶中，加甲醇含甲酸至刻度，摇匀，滤过，取续滤液进行分析，以个成分的峰面积为指标，对不同提取方法及时间条件下的提取效果进行比较，见图。结果显示，在回流提取条件下随着提取时间的延长，个丙酰异黄酮苷和的峰面积明显下降，个相应的异黄酮苷和的峰面积显著上升，但异黄酮苷元和的峰面积基本没有变化，推测应为丙酰异黄酮苷在加热条件下转化为相应黄酮苷所致，峰面积变化的影响方法学考察线性范围检测限与定量限将项下制得的混合对照品溶液，每个浓度进样针，分别测定个异黄酮类成分峰面积，以每个成分质量浓度为横坐标，平均峰面积为纵坐标进行线性回归处理，得到个成分的回归方程相关系数及线性范围。进步以号对照品液逐级稀释测定，确定各成分的检测限及定量限，结果显示，种异黄酮类成分在相应浓度范围内，线性关系良好，并具有较高的灵敏度，见表。加样回收率试验取已测定的黄芪药材粉末过号筛约，精密称定，平行份，分别按药材含量对照品∶加入定量的对照品溶液，按项下方法制备供试品溶液，依法测定，计算加样回收率，及的加样回收率分别为，分别为。相对校正因子的确定相对校正测多评法测定黄芪中异黄酮及苷类成分中药炮制论文定质量，分别按回流提取和超声功率，频率种方法分别提取，取出，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失质量，摇匀，滤过，精密量取续滤液，条件下回收溶剂至干，残渣加甲醇含甲酸溶解，转移至量瓶中，加甲醇含甲酸至刻度，摇匀，滤过，取续滤液进行分析，以个成分的峰面积为指标，对不同提取方法及时间条件下的提取效果进行比较，见图。结果显示，在回流提取条件下随着提取时间的延长，个丙酰异黄酮苷和的峰面积明显下降，个相应的异黄酮苷和的峰面积显著上升，但异黄酮苷元和的峰面积基本没有变化，推测应为丙酰异黄酮苷在加热条件下转化为相应黄酮苷所致，与文献报道相致而在超声提取条件下，个异黄酮及苷类成分在提设立及个苷元含量的上限值。同时，还应进步对黄芪药材和饮片的干燥储藏加工等影响质量的关键因素进行考察，积累数据，为修订完善黄芪药材的标准奠定基础。利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突参考文献中国药典部朱嘉欢，黄小平，邓常清黄芪和当归的主要活性成分配伍促进衰老造血干细胞增殖作用的研究中草药，蔡海霞，陈君，李萍测多评法测定黄芪中种异黄酮的含量中国中药杂志，赵懿，郭洪祝，陈有根，等中药多组分含量测定中相对校正因子计算方法的比较与建议中国药品标准，王智民，钱忠直，张启伟，等测多评法建立的技术指南中国中药杂志，王谦，赖慧，陈立，等高效液相色谱法测定种剂型黄芪中黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量中国药业，。表种异黄酮成分的实验选择为内参物，主要考虑该物质在中国药典黄芪药材标准中已有使用，性质稳定且易于获得，故选其作为法的内参物。以为参照物时，各成分的均小于，不同柱温不同体积流量不同色谱柱对的影响较小，表明选择作为内参物建立法可行。黄芪中异黄酮类成分质量标准制定分析本实验结果显示，黄芪中苷类成分含量较高，而苷元含量相对较低。值得注意的是，本实验研究中检测的年采集的批药材成分含量与刚采集时测定的含量相比，含量发生了明显下降，而及含量显著上升，其苷类成分平均总含量与苷元成分平均总含量的比值为∶，明显要低于年采集的批黄芪药材分析方法的建立与优化采用极管阵列检测器，对个异黄酮类成分进行了全波长扫描，结果显示和个成分的紫外光谱图十分相似，均在波长处有最大吸收。研究发现，在波长条件下种待测成分的灵敏度均较好，且色谱图中基线平稳，具有良好的基线分离，可以满足定量分析的要求，因此，最终选择作为检测波长。表法与法测定黄芪中种异黄酮成分的含量本实验对供试品溶液的提取方式进行了较为系统的考察，对提取方式回流和超声提取溶剂甲醇，溶剂体积提取时间进行了考察，同时考虑到丙酰基异黄酮成分中酯键的稳定性，在提取溶剂及供试品溶液甲醇中加入了的甲酸，不仅可以降低丙酰基异黄酮苷的降解转化，提升供试品溶成分色谱峰的定位中药化学成分复杂，色谱图中除了待测成分峰外还存在其它色谱峰，因此待测成分色谱峰的准确定位是实现的前提。对黄芪样品中个待测组分的保留时间进行了考察，采用与参照物的保留时间差法和相对保留时间法进行了分析。结果显示，不同仪器和不同色谱柱对待测成分与参照物保留时间绝对差值的影响较大，超过相对而言，待测成分与参照物相对保留时间的差异较小表，及相对于的相对保留时间均值分别为表明采用待测组分与内参物相对保留时间值来定位具有可行性。表不同高效液相不同色谱柱下各组分测得的相对保留时间样品含量测定及法的验证按项下方法，分别制备采集的批不同产地黄芪药材以及批市售量测定结果与法测得的结果相比差异较小表明法检测的含量结果较为准确。讨论在前期研究及文献报道的基础上，首次建立了以为内参物，同步测定及等种异黄酮类成分的方法，该方法检测简便耐用性好准确度高成本较低，可以为黄芪药材和饮片质量标准的修订提供技术依据。本研究在现有文献以及前期黄芪丙酰基异黄酮苷化学成分研究的基础上，首次以为内参物，从供试品溶液制备色谱条件优化方法学考察及相对校正因子等多个方面，建立同步测定黄芪药材及饮片中及种异黄酮类成分的测多评赵懿，郭洪祝，陈有根，等中药多组分含量测定中相对校正因子计算方法的比较与建议中国药品标准，王智民，钱忠直，张启伟，等测多评法建立的技术指南中国中药杂志，王谦，赖慧，陈立，等高效液相色谱法测定种剂型黄芪中黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量中国药业，。表不同色谱柱在不同高效液相色谱仪条件下测得的待测成分色谱峰的定位中药化学成分复杂，色谱图中除了待测成分峰外还存在其它色谱峰，因此待测成分色谱峰的准确定位是实现的前提。对黄芪样品中个待测组分的保留时间进行了考察，采用与参照物的保留时间差法和相对保留时间法进行了分析。结果显示，不同仪器和不同色谱柱对待测成分与参照物保留时间绝对差值的影响较大，超过相对而言，待测成含量较高，而苷元含量相对较低。值得注意的是，本实验研究中检测的年采集的批药材成分含量与刚采集时测定的含量相比，含量发生了明显下降，而及含量显著上升，其苷类成分平均总含量与苷元成分平均总含量的比值为∶，明显要低于年采集的批黄芪药材中两者∶的比值。有学者研究发现，在温度及润湿条件下，药材或饮片中丙酰基异黄酮苷及异黄酮苷成分会发生酶解而转化生成异黄酮苷元，使得苷类成分含量下降而苷元成分显著升高。本研究中年采集药材存放时间较长，且所在地区夏季温润潮湿，易于酶解，这可能是导致该年度样本中异黄酮苷含量降低而异黄酮苷元含量相对升高的原因。黄芪饮片在临床及制剂工艺中大多以水煎煮提取为主，其水提取物及配测多评法测定黄芪中异黄酮及苷类成分中药炮制论文片供试品溶液，依法测定，进步采用外标法，和法对所测得的数据分别进行含量计算，并以相对误差，进行评价，以验证法测定上述种异黄酮类成分含量的准确性，结果见表。结果显示，在批不同产地来源药材及批市售饮片均能测得个异黄酮成分，其样品法含量测定结果与法测得的结果相比差异较小表明法检测的含量结果较为准确。讨论在前期研究及文献报道的基础上，首次建立了以为内参物，同步测定及等种异黄酮类成分的方法，该方法检测简便耐用性好准确度高成本较低，可以为黄芪药材和饮片质量标准的修订提供技术依电子天平十万分之，梅特勒托利多仪器有限公司数控超声仪昆山禾创超声仪器有限公司。材料与试剂批号，质量分数批号，质量分数均购于中国食品药品检定研究院。批号，质量分数，批号，质量分数均购于南京金益柏生物科技有限公司。对照品均由实验室自制，经分析，质量分数乙腈色谱纯，美国公司甲醇色谱纯，江苏汉邦科技有限公司，甲酸色谱纯，公司超纯水超纯水系统制备。表不同色谱柱在不同高效液相色谱仪条件下测得的待酮成分的含量本实验对供试品溶液的提取方式进行了较为系统的考察，对提取方式回流和超声提取溶剂甲醇，溶剂体积提取时间进行了考察，同时考虑到丙酰基异黄酮成分中酯键的稳定性，在提取溶剂及供试品溶液甲醇中加入了的甲酸，不仅可以降低丙酰基异黄酮苷的降解转化，提升供试品溶液的稳定性，而且弱酸性条件还可以使得样品中异黄酮成分更好地呈现分子态，保证溶剂提取的效果。本实验色谱条件优化过程中发现，不同型号色谱柱对异黄酮类成分的分离效果影响显著，在考察的已有种型号色谱柱中，仅种色谱柱可以实现对个异黄酮组分的有效分离，其余色谱柱的分离效果均，质量控制方法。该法检测成本低，耐用性强重现性好准确度高，可以为黄芪药材及饮片质量标准的制订或修订提供技术依据，并可为黄芪的品质评价生产加工以及资源开发等研究提供支撑。仪器与试剂仪器型高效液相色谱仪，检测器，色谱工作站美国公司高效液相色谱仪，紫外检测器，色谱工作站美国公司高效液相色谱仪，检测器，色谱工作站公司色谱柱，与参照物相对保留时间的差异较小表，及相对于的相对保留时间均值分别为表明采用待测组分与内参物相对保留时间值来定位具有可行性。表不同高效液相不同色谱柱下各组分测得的相对保留时间样品含量测定及法的验证按项下方法，分别制