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人脐带源间充质干细胞移植对肝纤维化大鼠氧化应激的影响(论文全文) 人脐带源间充质干细胞移植对肝纤维化大鼠氧化应激的影响(论文全文)

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症评分纤维化分级纤维化定量人脐带源间充质干细胞移植对肝纤维化大鼠氧化应激的影响论文全文较染色及天狼猩红染色结果显示,与正常对照组比较,模型组大鼠肝小叶结构紊乱,中央静脉周围及汇管区可见纤维沉积增多,肝纤维化形成,提示肝纤维化造模成功。模型对照组大鼠随造模时间延长,肝板排列紊乱,肝细胞水肿,汇管区的炎性细胞浸润亦明显增多,纤维条索明显增多,空泡样变在注射第周时最多。与模型对照组相植组大鼠体重均随实验时间延长而降低,各组间差异均有统计学意义,时间与组间均存在交互作用,即模型对照组大鼠体重下降幅度大于移植组。进步两两比较结果显示,模型对照组与移植组大鼠体重均低于正常对照组,移植周组大鼠体重分别高于模型对照周组。人脐带源间充质干细胞移植对肝纤维化大鼠氧化应激的影响论文全文食饮水体毛和精神状态等。造模结束后,将大鼠臵于代谢笼,禁食不禁水,每组随机取只处死,取肝制成石蜡切片,苏木精伊红染色染色天狼猩红染色观察肝组织形态学变化,评价模型状态。模型对照组与移植组大鼠肝脏炎症评分纤维化分级和纤维化定量均随实验时间延长而升高,各组间差异均有统计学意义,时间与组间均存在交互作原代培养细胞后全量换液,弃去非贴壁细胞,之后每换新鲜培养液,当的细胞融合时,用胰酶消化,∶传代。应用倒臵相差显微镜观察形态,第代形态学上显示成纤维细胞形态,呈漩涡样生长,则细胞生长状态良好。采用流式细胞技术分析其免疫表型和,对人光镜下观察肝脏病理变化。肝脏炎症评分及纤维化分级按我国病毒性肝炎的组织病理学分级及分期标准,采用计算机图像分析法对肝组织胶原染色切片的胶原纤维进行定量分析。实验动物成年健康雄性大鼠只,由河北省实验动物中心提供,生产许可证号为冀,清洁级,体重,饲养于河北医科大学第医院,使用许可证号重,饲养于河北医科大学第医院,使用许可证号为冀。实验前适应性饲养周,光照明暗,温度,自由摄食饮水。实验动物处理方法符合我国科学技术部发布的关于善待实验动物的指导性意见。方法分离培养及鉴定用消毒的手术剪将脐带剪成长约的块,经直径的粗滤网过滤,获得直径脐带组织块。脐带和,对人特异性标志物和呈阳性,对和呈阴性,则分离培养的细胞为。大鼠肝纤维化模型制作大鼠适应性喂养周后,按随机数字表法分为组,正常对照组只,生理盐水模型组只,以的剂量肢轮流皮下注射橄榄油溶液,每周次模型对照周组。见表。表各组大鼠肝脏炎症及纤维化程度比较各组大鼠肝指数及肝功能比较模型对照组与移植组大鼠体重均随实验时间延长而降低,各组间差异均有统计学意义,时间与组间均存在交互作用,即模型对照组大鼠体重下降幅度大于移植组。进步两两比较结果显示,模型对照组与移植组大鼠体重均低于正常对照组,移植周人脐带源间充质干细胞移植对肝纤维化大鼠氧化应激的影响论文全文冀。实验前适应性饲养周,光照明暗,温度,自由摄食饮水。实验动物处理方法符合我国科学技术部发布的关于善待实验动物的指导性意见。方法分离培养及鉴定用消毒的手术剪将脐带剪成长约的块,经直径的粗滤网过滤,获得直径脐带组织块。脐带组织加入完全培养液,接种于细胞培养瓶质量体重。取肝组织,按倍质量比加入冰生理盐水匀浆,以离心半径为,离心,取上清液检测和等抗氧化指标,按相关试剂盒说明书操作。组织学观察取肝左叶同部位肝脏组织,大小为,以多聚甲醛固定,常规石蜡包埋,切片后染色和天狼猩红染色,中性树胶封固,组大鼠随造模时间延长,肝板排列紊乱,肝细胞水肿,汇管区的炎性细胞浸润亦明显增多,纤维条索明显增多,空泡样变在注射第周时最多。与模型对照组相比,移植组肝细胞坏死空泡样变炎性细胞浸润及纤维沉积均减少。人脐带源间充质干细胞移植对肝纤维化大鼠氧化应激的影响论文全文。模型对照组与移植组大鼠肝脏炎症评分纤组织加入完全培养液,接种于细胞培养瓶中。人脐带源间充质干细胞移植对肝纤维化大鼠氧化应激的影响论文全文。肝指数及抗氧化指标测定无菌条件下切开皮肤进入腹腔,迅速分离整个肝脏,生理盐水冲洗,称重,观察大鼠肝脏色泽质地表面是否光滑体积大小等,于液氮中冷冻后保存在冰箱中待用。计算肝指数,肝指数肝,造模周期为。每日观察大鼠的进食饮水体毛和精神状态等。造模结束后,将大鼠臵于代谢笼,禁食不禁水,每组随机取只处死,取肝制成石蜡切片,苏木精伊红染色染色天狼猩红染色观察肝组织形态学变化,评价模型状态。实验动物成年健康雄性大鼠只,由河北省实验动物中心提供,生产许可证号为冀,清洁级,组大鼠体重分别高于模型对照周组。原代培养细胞后全量换液,弃去非贴壁细胞,之后每换新鲜培养液,当的细胞融合时,用胰酶消化,∶传代。应用倒臵相差显微镜观察形态,第代形态学上显示成纤维细胞形态,呈漩涡样生长,则细胞生长状态良好。采用流式细胞技术分析其免疫表型维化分级和纤维化定量均随实验时间延长而升高,各组间差异均有统计学意义,时间与组间均存在交互作用,即随实验时间延长,模型对照组均比移植组升高幅度大。进步两两比较结果显示,模型对照组与移植组大鼠的肝脏炎症评分纤维化分级和纤维化定量均高于正常对照组,移植周组大鼠肝脏炎症评分纤维化分级和纤维化定量分别低人脐带源间充质干细胞移植对肝纤维化大鼠氧化应激的影响论文全文初体积逐渐增大,至注射第周肝脏表面明显粗糙不平,体积明显变小。与模型对照组相比,移植组大鼠肝脏色泽稍红润,表面相对光滑。各组大鼠病理组织学比较染色及天狼猩红染色结果显示,与正常对照组比较,模型组大鼠肝小叶结构紊乱,中央静脉周围及汇管区可见纤维沉积增多,肝纤维化形成,提示肝纤维化造模成功。模型对床和亚临床试验中用于多种疾病的治疗均取得进展,。研究表明,间充质干细胞对多种原因引起的肝损伤具有明显修复作用,可改善甚至逆转肝纤维化。人脐带源是种新型,取材于脐带血,易获得,不涉及伦理问题,目前为研究热点。有研究显示可分化为功能性肝细胞,从而改善诱导的大肝指数和均高于正常对照组,体重和均低于正常对照组均移植周组大鼠的肝脏炎症评分纤维化分级纤维化定量肝指数和分别低于模型对照周组,体重和分别高于模型对照周组均。结论比,移植组肝细胞坏死空泡样变炎性细胞浸润及纤维沉积均减少。摘要目的研究人脐带源间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化的治疗作用及对氧化应激的影响。方法大鼠只,分为正常对照组和模型组,模型组采用制备肝纤维化模型,然后随机分为移植周组和模型对照周组,分别经尾静脉注射和同。各组大鼠肝脏形态正常对照组大鼠肝脏颜色暗红,有光泽,质软,表面细腻光滑,边缘锐利。模型对照组大鼠随造模时间延长,肝脏逐渐肿胀,色泽逐渐晦暗,表面粗糙不平,起初体积逐渐增大,至注射第周肝脏表面明显粗糙不平,体积明显变小。与模型对照组相比,移植组大鼠肝脏色泽稍红润,表面相对光滑。各组大鼠病理组织学用,即随实验时间延长,模型对照组均比移植组升高幅度大。进步两两比较结果显示,模型对照组与移植组大鼠的肝脏炎症评分纤维化分级和纤维化定量均高于正常对照组,移植周组大鼠肝脏炎症评分纤维化分级和纤维化定量分别低于模型对照周组。见表。表各组大鼠肝脏炎症及纤维化程度比较各组大鼠肝指数及肝功能比较模型对照组与特异性标志物和呈阳性,对和呈阴性,则分离培养的细胞为。大鼠肝纤维化模型制作大鼠适应性喂养周后,按随机数字表法分为组,正常对照组只,生理盐水模型组只,以的剂量肢轮流皮下注射橄榄油溶液,每周次,造模周期为。每日观察大鼠的
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