（定稿）社区设施项目立项投资计划建议书

用打孔器打出直径滤纸圆片，高压灭菌，备用。

将滤纸圆片分别放入不同浓度的蛋清溶菌酶中浸泡。

用无菌镊子夹取已在溶菌酶溶液中浸渍滤纸片，放在上述培养皿中，每皿五片。

静置后置于恒温培养箱中培养，观察抑菌效果，测量抑菌圈直径。

蛋清溶菌酶最小抑菌浓度及最小杀菌浓度的测定采用液体倍比稀释法测定最小抑菌浓度取灭菌试管支，号依次编号，于无菌操作台上。

取无菌葡萄糖酚红肉汤培养基依次加入各管。

然后向第管中加入浓度为的溶菌酶样品液，充分混匀后，吸出加入第管中混匀，按此法依次重复稀释至第管，第管混匀后吸出混合液弃去。

再分别向管中加入测试菌液，第管中加入测试菌液作阳性对照，第管中加入浓度为溶菌酶样品液后混匀，吸出混合液弃去，不加菌液作生长对照。

将支试管置于恒温培养箱中培养，取出，观察结果，以无菌生长管所含最小稀释度的溶菌酶浓度作为。

最低杀菌浓度的测定从无细细菌生长的各管取少量菌液划线接种于固体营养琼脂培养基上，于培养，观察结果，以营养琼脂培养基上菌落数少于个的平板所含最小稀释度的溶菌酶浓度作为。

结果与讨论蛋清溶菌酶具有胞壁质酶活性，能够通过其活性中心和作用于乙酰胞壁酸和乙酰葡萄糖胺之间的，糖苷键，从而破坏革兰氏阳性细菌表面的肽聚糖层，导致细菌瓦解。

但是革兰氏阴性细菌的肽聚糖位于细胞壁结构的内层，其外侧受到外层脂多糖层的保护，溶菌酶很难直接作用于肽聚糖，但是它对于些革兰氏阴性细菌同样具有杀菌作用。

因此最近的研究提出溶菌酶也存在着独立于水解酶活性的抗菌活性。

此种抗菌活性是基于溶菌酶被水解酶消化水解后形成的更小分子的多肽段，此时的水解活性几近消失，但是却仍然具有抗菌活性，通过观察多肽段的结构电荷分布等研究提出，溶菌酶具有部分阳离子抗菌肽活性。

不同浓度的蛋清溶菌酶对大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌的抗菌活性。

结果溶菌酶对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的抗菌活性不同浓度溶菌酶对大肠杆菌及金黄色葡萄球的抑菌效果见图由图可以看出，溶菌酶对两种常见致病菌均有不同程度的抑制作用，并且随溶菌酶浓度增加，抑菌圈明显增大，抑菌效果增强。

其中溶菌酶对大肠杆菌较为敏感，抑菌圈明显大于金黄色葡萄球菌。

在较低浓度下，溶菌酶即可对大肠杆菌产牛抑制作用。

图蛋清溶菌酶对大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的抑制表为溶菌酶对不同菌株的抑菌圈结果汇总表。

由表可知，溶菌酶对两种菌株的抑菌圈直径与溶菌酶浓度呈正相关。

其中，大肠杆菌对溶菌酶最为敏感，当溶菌酶浓度为时对大肠杆菌产生的抑菌圈仍很大。

溶菌酶对金黄色葡萄球菌的抑制效果很微弱，浓度为时抑菌圈不明显，浓度为时抑菌圈直径约为另外两种菌的半。

由此可得出，溶菌酶对大肠杆菌有良好的抑制效果，在浓度稍高时，对金黄色葡萄球菌也起定抑制作用。

表溶菌酶对不同菌株抑菌结果表菌株不同浓度对致病菌抑菌圈大小，刘素英，日本食品业开发的新型防腐剂，食品科技动态，刘军，顾国维，溶菌酶在环境工程中的应用，环境保护，，，，魏祖怡，潘晓勤，母乳中溶菌酶浓度的测定，南京医学院学报，陈慧英，吴晓英，林影溶菌酶分离纯化方法的研究新进展广东药学院学报祈静溶菌酶的紫外分光光度法检测仪器仪表与分析监测常凯，邸海洋，何昭阳溶菌酶的提取及其在焙烤食品中的应用食品科技石军英，郭雄军，陈劲春鸡蛋溶菌酶生产过程活力动态监控食品科技致谢时光荏苒，如白驹过隙，转眼之间，大学生活已经步入尾声。

在这四年多的日子里，收获的不仅仅是专业知识和实验技能，还有在实验进行中所培养的思维方式和广阔视野。

很庆幸这些年来我遇到了许多良师诤友，无论在学习上还是生活上都给予了我无私的帮助和热心的照顾，让我在诸多方面都得以成长。

在本文完成之际，特别感谢指导老师梁保红工程师从论文的立题构思实验到撰写，都倾注了老师的智慧和才能。

梁老师丝不苟的指导勤奋刻苦的工作作风和积极乐观的人生态度已经并将继续对我今后的工作和生活产生深刻的影响，谨此致以诚挚的敬意和由衷的感谢。

感谢赵润柱老师在实验室中给与的帮助，给我们提供了优越的硬件条件而且在他的领导下，实验室成员之间始终维持着兄弟姐妹般的融洽关系，让大家在个如家般的环境中工作学习。

在实验进行期间，同实验室中的诸多同学给了我许多帮助，在此表示深深的谢意同时其他实验室的师兄弟姐妹和我起度过了人生中令人难忘的段时光，衷心感谢他们的关心和帮助。

最后，感谢直以来给我无限关爱和支持的家人及亲朋好友们。

董磊年月日星期六大肠杆菌金黄色葡萄球菌溶菌酶的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度液体倍比稀释法测得溶菌酶对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度，结果见表。

可知，溶菌酶对两种供试菌株的和分别是大肠杆菌为和，金黄色葡萄球菌为和。

表溶菌酶对不同供试菌株的和菌株溶菌酶对不同供试菌株的和大肠杆菌金黄色葡萄球菌讨论革兰氏阴性菌的细胞壁外层覆盖着大量的脂多糖，细胞表面结构的复杂性决定了细胞表面特性的差异性，如表面电荷表面疏水性以及外膜通透性等，同时也决定了细菌对抑菌剂的敏感程度。

溶菌酶主要作用于细菌的肽聚糖层，由于革兰氏阴性菌的外膜脂多糖的阻碍，溶菌酶较难与肽聚糖相结合，从而使得溶菌酶的抑菌效果不明显。

但是仍然有些革兰氏阴性菌对溶菌酶敏感，说明溶菌酶对革兰氏阴性菌的作用效果受到细胞的些其他特性的影响，这反映出溶菌酶抑菌机制的复杂性。

存在问题由于各类溶菌酶的作用特性强，只对特定的微生物有充份的溶解作用，因此需要充分掌握溶菌酶的酶学特性在最大程度发挥溶菌酶的活力。

目前溶菌酶的产量普遍较低，成本较高，导致溶菌酶的价格比较高，难以得到普遍的推广与应用，下步应着重研究摸索出利用国产廉价原料分离纯化工艺并获得廉价纯化的溶菌酶。

国内企业生产的溶菌酶主要是蛋清溶菌酶，然而从生物材料提取溶菌酶有其固有缺陷受生物材料来源限制，生物材料由于取自不同生物体，保险程度不，难以保证不受病毒和其他有害物质污染，这会造成产品质量不稳定。

由于革兰氏阳性菌的肽聚糖层位于细胞壁外层，因此溶菌酶对大多数革兰氏阳性菌都有较好的抑菌效果而革兰氏阴性菌的肽聚糖层位于细胞膜的中间层，其外部还有细胞外膜物质脂多糖的阻挡，使得溶菌酶难作用品名称零件名称轴材料牌号钢毛坯种类锻件毛坯外形尺寸备注工序号工序名称设备名称设备型号程序编号夹具代号夹具名称冷却液车间铣数控车床三爪自定心卡盘虎钳油基切屑液法兰克车间工步号刀具号刀具各称刀具参数补偿量备注键槽铣刀键槽铣刀编制审核批准共页第页十三课程设计心得体会经过两星期的奋战，今天终于完成了整套课程设计，看着努力奋斗的结果，心里无限感慨，因为这两星期以来我们遇到了很多困难，但在彭老师的细心教导下得以圆满解决。

在整个设计的过程当中，我们学到了很多专业知识，让我明白了自已的知识很欠缺，需要更加专心刻苦学习专业知识，打牢基础。

在设计输出轴的机械加工工艺规程及数控加工工序编制的整个过程中，从开始拿到零件图到手工绘图，彭老师的严厉就让我明白了自已以前的不严谨，最后我的手工图经过了多次绘制才基本满意，这让我明白了在以后从事机械工作的过程中，时刻都要处于种严谨的态度，切都要按照国标，行业标准，企业标准行事，因为只有这样才能设计好的产品，才能真正的在机械行业中立足。

在此次设计当中，为了让自己学到更多知识，我查找许多相关书籍，其中的知识让我明显的感觉到自己以后还要加倍努力的学习，才能胜任机械加工工作。

在设计中不仅巩固了以前所学知识，更让自己学到了很多新知识。

在设计结束之际，我内心深处业充满了感激之情，我要感谢我的指导老师彭京城老师，在此次设计中她不仅教会了我们该如何运用自己所学知识，如何使用参考文献，更是教导了我们种学习工作的态度，我想这给我以后的工作都是种深深的启发。

再次感谢彭老师，并祝老师工作顺利身体健康，左冷禅四十参考文献机械加工工艺手册李洪主编北京出版社机械制造工艺徐宏海主编化学工业出版社数控加工工艺与编程周虹编主编人民邮电出版社机械制造工艺学及夹具设计弈继昌主编中国人民出版社机械加工工艺设计手册张耀宸主编航空工业出版社金属切削速查速算手册陈宏钧主编机械工业出版社机械制造基础刘建亭主编机械工业出版社数控机床加工工艺华茂发主编机械工业出版社机床夹具设计肖继德主编机械工业出版社数控原理与编程实训周虹主编人民邮电出版社金属机械加工工艺人员手册上海科学出版社增订组编机械工人切削手册机械工业出版社机械工程师简明手册河南科学技术出版社度为。

毛坯直径，粗车其外圆表面预留加工余量，表面为自由尺寸公差，表面粗糙度值要求为此时直径余量已能满足加工要求考虑其直径为，长度为，毛坯直径为，粗车外圆表面直径至，为自由尺寸公差，表面粗糙度为，只要求粗加工，此时直径余量满足加工要求查机械制造工艺设计简明手册，其中公差值为，上偏差为，下偏差为毛坯直径为，粗车外圆表面直径至，为自由尺寸公差，表面粗糙度为，只要求粗加工，此时直径余量满足加工要求及外圆长度为，表面粗糙度为，考虑其两边都有退刀槽，因此加工余量保证在。

毛坯直径为，粗车外圆表面直径至，为自由尺寸公差，表面粗糙度为，只要求粗加工，此时直径余量满足加工要求考虑其直径为，长度，表面粗糙度为，其中开有键槽上偏差为，下偏差为，表面粗糙度为。

公差值上以于营养琼脂平板培养基中涂布均匀。

用打孔器打出直径滤纸圆片，高压灭菌，备用。

将滤纸圆片分别放入不同浓度的蛋清溶菌酶中浸泡。

用无菌镊子夹取已在溶菌酶溶液中浸渍滤纸片，放在上述培养皿中，每皿五片。

静置后置于恒温培养箱中培养，观察抑菌效果，测量抑菌圈直径。

蛋清溶菌酶最小抑菌浓度及最小杀菌浓度的测定采用液体倍比稀释法测定最小抑菌浓度取灭菌试管支，号依次编号，于无菌操作台上。

取无菌葡萄糖酚红肉汤培养基依次加入各管。

然后向第管中加入浓度为的溶菌酶样品液，充分混匀后，吸出加入第管中混匀，按此法依次重复稀释至第管，第管混匀后吸出混合液弃去。

再分别向管中加入测试菌液，第管中加入测试菌液作阳性对照，第管中加入浓度为溶菌酶样品液后混匀，吸出混合液弃去，不加菌液作生长对照。

将支试管置于恒温培养箱中培养，取出，观察结果，以无菌生长管所含最小稀释度的溶菌酶浓度作为。

最低杀菌浓度的测定从无细细菌生长的各管取少量菌液划线接种于固体营养琼脂培养基上，于培养，观察结果，以营养琼脂培养基上菌落数少于个的平板所含最小稀释度的溶菌酶浓度作为。

结果与讨论蛋清溶菌酶具有胞壁质酶活性，能够通过其活性中心和作用于乙酰胞壁酸和乙酰葡萄糖胺之间的，糖苷键，从而破坏革兰氏阳性细菌表面的肽聚糖层，导致细菌瓦解。

但是革兰氏阴性细菌的肽聚糖位于细胞壁结构的内层，其外侧受到外层脂多糖层的保护，溶菌酶很难直接作用于肽聚糖，但是它对于些革兰氏阴性细菌同样具有杀菌作用。

因此最近的研究提出溶菌酶也存在着独立于水解酶活性的抗菌活性。

此种抗菌活性是基于溶菌酶被水解酶消化水解后形成的更小分子的多肽段，此时的水解活性几近消失，但是却仍然具有抗菌活性，通过观察多肽段的结构电荷分布等研究提出，溶菌酶具有部分阳离子抗菌肽活性。

不同浓度的蛋清溶菌酶对大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌的抗菌活性。

结果溶菌酶对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的抗菌活性不同浓度溶菌酶对大肠杆菌及金黄色葡萄球的抑菌效果见图由图可以看出，溶菌酶对两种常见致病菌均有不同程度的抑制作用，并且随溶菌酶浓度增加，抑菌圈明显增大，抑菌效果增强。

其中溶菌酶对大肠杆菌较为敏感，抑菌圈明显大于金黄色葡萄球菌。

在较低浓度下，溶菌酶即可对大肠杆菌产牛抑制作用。

图蛋清溶菌酶对大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的抑制表为溶菌酶对不同菌株的抑菌圈结果汇总表。

由表可知，溶菌酶对两种菌株的抑菌圈直径与溶菌酶浓度呈正相关。

其中，大肠杆菌对溶菌酶最为敏感，当溶菌酶浓度为时对大肠杆菌产生的抑菌圈仍很大。

溶菌酶对金黄色葡萄球菌的抑制效果很微弱，浓度为时抑菌圈不明显，浓度为时抑菌圈直径约为另外两种菌的半。

由此可得出，溶菌酶对大肠杆菌有良好的抑制效果，在浓度稍高时，对金黄色葡萄球菌也起定抑制作用。

表溶菌酶对不同菌株抑菌结果表菌株不同浓度对致病菌抑菌圈大小，刘素英，日本食品业开发的新型防腐剂，食品科技动态，刘军，顾国维，溶菌酶在环境工程中的应用，环境保护，，，，魏祖怡，潘晓勤，母乳中溶菌酶浓度的测定，南京医学院学报，陈慧英，吴晓英，林