苏通培养 基，培养温度，培养时间天，生产的卡介苗活力高，用培养 天的幼龄苗，有利于制备冻干制品，采用对数生长期的幼龄培养菌代替稳定期 的培养菌生产，可使活菌率由左右提高至。菌膜收集后压平，移 入盛有不锈钢珠瓶内，可加入适量稀释液，低温下研磨，研磨好的原液稀释成各 种浓度的菌苗。 制造过程 菌种 制造卡介苗的菌种，应由中国药品生物制品检定所分发或经同意。严 禁使用通过动物的菌种制造卡介苗。 如果采用次代种子批，单批收获培养物的总代数不得超过代包 括在马铃薯培养基上培育的代数与在液体苏通培养基上的代数。 菌种检定 新收到的菌种或新制备种子批应进行下列检定。 培养特性卡介菌在苏通培养基上发育良好。培育温度在之间。抗酸染色应为抗 酸杆菌。在苏通马铃薯培养基上发育的卡介菌应是干皱成团略呈浅黄色。在牛 胆汁马铃薯培养基上为浅灰色粘膏状菌苔。在鸡蛋培养基上有突起的皱型和扩 散型两类菌落，且带浅黄色。在苏通培养基上卡介菌应浮于表面，为多皱微带 黄色的菌膜。 毒力试验 用结素试验阴性，体重的同性健康豚鼠只，于肌 内侧皮下各注射菌液，注射前称体重，注射后每周观察次 注射部位及局部淋巴结的变化。每周称体重次。周时解剖只，满个 月将另只豚鼠解剂，检查各脏器应无肉眼可见的结核病变。若有可疑病灶时， 应作涂片和组织切片检查，并采取部分病灶磨碎，加少量生理盐水混匀，皮下 注射只豚鼠。若证明系结核病变，该菌种即应废弃。试验经过详细记录备查。 若未满个月试验豚鼠因其他病患死亡应解剖检查，依上法处理。若死亡只 以上应重试。 免疫力试验 用原代种子批以人份的剂量免疫豚鼠，以强毒人型结核分枝杆 菌感染，免疫组与对照组动物的病变指数及脾脏毒菌分离数的对数值经统计学 处理，应有显著差异。如无条件，可送中国药品生物制品检定所进行。 菌种保存 冻干菌种保存于。 菌苗制造 卡介苗制造室必须与其他生物制品部门及实验室分开。所需用具如高 压锅冰箱及玻璃器皿等，均须单独设置并专用。卡介苗制造包装及保存过 程均须避光。 卡介苗制造的工作人员及经常进入卡介苗制造室的人员，必须身体健康，经 线检查无结核病，且以后每年经线检查次，可疑者暂不在卡介苗制造室 工作，其检查记录必须保存备查。 制造用培养基 生产用培养基不得含有能使人产生毒性或变态反应的物质。培养基所用的原料 应符合中国生物制品主要原材料试行标准规定。 菌种传代与培养 冻干菌种在苏通马铃薯培养基胆汁马铃薯培养基以及液体苏通培养基上每传 次为代。马铃薯培养基上培育的菌种放冰箱保存不超过个月。用于生产 菌苗的培养物的总代数不超过代。 原液制造 收集 培养瓶应逐瓶检查，若有污染湿膜混浊等情况应废弃。收集菌膜压干，移 入盛有不锈钢珠瓶内，钢珠与菌体的比例应根据研磨机转速控制在适宜的范 围，并尽可能在低温下研磨。加入适量无致敏原保护液稀释成定浓度的原液。 稀释用中国药品生物制品检定所发给的冻干卡介苗参考比浊标准，以分光光度法或 其他适宜方法测定原液浓度，用保护液将原液稀释成。 纯菌试验 用于制造卡介苗的培养物原液以及稀释后的菌苗均应按生物制品无菌试 验规程抽样做纯菌试验。 菌苗分批 用同代菌种同时制造的菌苗为批，稀释为数瓶者，按瓶分亚批。 分装 分装过程中勿使苗混合均匀。每人份卡介苗应为。 冻干 菌苗原液分装后应立即进行冻干。干燥完毕后立即进行真空封口。亦可充氮封 口。 成品检定 物理化学检查 冻干卡介苗应为白色疏松体或粉末状。加入稀释液后，应于分钟内完全溶解 成均匀悬液。残余水分不应超过。包装前应每支安瓿检查真空，不合格的安 瓿应废弃。 鉴别试验 每批菌苗须做涂片检查，抗酸染色应是抗酸杆菌。 纯菌试验 每亚批菌苗抽样按生物制品无菌试验规程进行。 活菌计数 同代菌种制造的各批冻干卡介苗应抽批做干前活菌计数。同批菌种制造 的各亚批菌苗均应做干后活菌计数，抽安瓿支稀释混合。冻干菌苗活菌数应 在万以上。可与热稳定性试验同时进行。 热稳定性试验 取冻干后菌苗放置天进行加速失活试验，测定活菌数，与保存的同 批菌苗同时进行比较，计算降低的百分离。加温放置制品的活菌数应不少于 冷藏菌苗的，但不得低于万。此试验可与参考菌苗同时进行参考菌 苗加入试验的目的为检查培养基的质量。每机柜冻干菌勒应抽样进行此项 试验。 安全试验 同代菌种生产的各批冻干卡介苗应抽个亚批做安全试验。用结素试验 阴性，体重的同性健康豚鼠只。每只皮下注射相当于 人份的冻干皮内注射用卡介苗，每周称重次，观察周后，解剖检查每只 动物，若肝脾肺等脏器无结核病变，该批菌苗即可发出使用。若有可疑病 灶时，应按项处理。 保存与效期 保存于暗处。自首次活菌计数结束之日起效期为年。 该项目的国内外发展现状 在国家产业政策的支持下，我国疫苗行业取得了快速发展。国内疫苗企业在 技术设备产品质量生产工艺等方面与国外差距逐渐缩小，涌现出批技术 实力强销售规模大的企业。在行业快速发展的背景下，近年来本公司业务规模 不断扩大，整体竞争力持续增强。结核验项目有性状及鉴别试验酸 碱度澄清度水分纯度杂质灰分重金属安全试验热源试验降压 试验效价检定等。项目的产品成熟性 在实验室研究阶段，生产用的菌毒种的构建选用培养遗传稳定性生物组 织的选择有效成分的提取纯化及其理化特性生物特性的分析等研究，取得 制造和质量检定的基本条件和方法。 在小量试制阶段，根据实验研究结果，确定配方，建立制备工艺和检定方法，试 制小批量样品，进行临床安全性和有效性的实验，并制造与检定基本要求。 在中间试制阶段，生产工艺基本定型，产品质量和产率相对稳定，能放大生产 有产品质量标准检定方法保存稳定性资料，并有效测定效价用的参考品或对 照品提供自检和中国药品生物检定所复检合格，并能满足临床研究用量的连续 三批产品制定较完善的制造检定试行规程和使用说明书。 在试生产阶段，完善生产工艺和质量标准及其检定方法，同时按有关规定完成第 Ⅳ期临床试验制品长期稳定性研究和国家药品监督管理局要求进行的其他工 作。 项目产品的可靠性 众多的规定能确保疫苗的安全性和质量，从精确地起始材料到最后的允许疫苗出 厂。并且每批疫苗都要获得世界卫生组织资格认证的实验室进行单独检测，并由 世界卫生组织专家赴现场视察以确保疫苗和生产方法符合国际标准。还有随机检 测和定期再评估程序，以确保生产的持续质量。 从生产场所到使用地点，疫苗必须始终保持在最佳温度。世界卫生组织发表了关 于疫苗国际包装和运输的详细准则，包括检测表格的使用，例如运输物品到达目 的地时应填写疫苗到达报告。 在实际应用中应监测疫苗在大量目标人群常规使用状态下的各种情况，目的是发 现不良反应不良反应并监控有效性效力。对于偶发疾病及罕见疾病，需调查整 个群体以保证统计学的可信性，但般研究常局限于分组人群。多数情况下，采 取病例对照或观察性队列研究。疫苗的最佳应用些高危人群中有效性长期 效果和安全性监控。 进行安全性评价，发现临床试验中不常发生的长期或急性不良反应事件的途径。 发现在以前未能发现的极少数或非预测事件。 第三部分项目产品市场调查与竞争能力预测 项目产品的主要用途，目前主要使用领域的需求量 原用于预防结核，属特异性免疫制剂，后证明它还具有促进巨噬细胞吞噬功能的 作用，为非特异性免疫增强剂。现用于治疗恶性黑色素瘤，或在肺癌急性白血 病恶性淋巴瘤根治性手术或化疗后作为辅助治疗，均收到定疗效。此外，死 卡介苗还用于小儿哮喘性支气管炎的治疗小儿感冒的预防以及慢性气管炎 的防治。预防重于治疗，接种卡介苗可以使人体产生对结核病的抵抗力，以预防 结核病俗称肺痨。婴幼儿的抵抗力最弱，若受到了结核菌的感染，容易发生急 性结核病，如结核性脑膜炎，而危及生命，因此每个婴儿都定要接种卡介苗。 入伍新兵大学新生边远地区派出人员也应列为接种对象边远地区儿童和青少年 在进入城市之前个月应接种卡介苗。 年龄疫苗 出生时卡介苗 岁卡介苗，麻疹疫苗，白喉破伤风二联疫苗 岁卡介苗农村 表中国儿童免疫程序 项目产品的经济寿命期，目前处于的阶段 从上图分析，该产品从过去到现在是出于直线上升阶段，由于该产品在过去的科 学技术条件的限制和菌苗的突变，很难建立个完善的体系来安全有效的生产 该产品，并且对于产品的检定条件也是不够的。这样会产生很大的副作用，严重 时甚至死亡。但是由于科学技术的不断进步，对其进行深入的研究和探索，近年 来，该产品不断的发展，生产制造体系也不断的完善，对其实行严格的控制。保 证受试者的安全，尽量的避免不必要的副反应，使受试者放心的使用。由于不断 的研究还有新的发现，扩大了其主治功能。 市场销售有无行业管制 政府管理市场的原则是让民众有统的充足的和合理价格的免疫服务。对于商 家而言，统的或者单的免疫服务往往是支出大于回收。比如疫苗的价格统 后，厂家对偏远的疫苗运输实际是亏损的，这样政府就要利用公共医疗场所或配 齐私人医疗设施保障统的疫苗服务的供应。另外，制定交叉补贴的经济政策， 防止其他厂家进行竞争。在中国，政府制定疫苗价格上限来控制企业对价格的垄 断。 在疫苗企业中，政府通常制定价格上限来制约厂家蓄利的天性和保护消费者的利 益，同时促进竞争。美国对疫苗产业的职责是制止有害的不纯的假的 质量差的疫苗生产和流通保证疫苗产品