核生物的基因片段大小致,因此达到了对微生物的基因的扩增目的。重组子的筛选和鉴定以聚合酶扩增后的产物末端都带有单个碱基,载体,其结构图谱如图所示,具有个碱基的粘性末端,它们既可按碱基互补配对原则,将目的片段与载体相连,构建成重组子。载体不仅含有多克隆酶切位点,还含丝状噬菌体的复制起始区,用于产生环状含有和聚合酶启动子在多克隆区域具有编码半乳糖苷酶的基因,插入失活肽可在指示平板上通过蓝白菌落直接筛选重组菌落。图结构图谱本实验采用了内切酶Ⅰ对重组质粒进行了切割,Ⅰ酶的切位点如图所示。阳性重组子经酶切后有目的基因片段电泳亮斑,并和Ⅶ中长度为的核酸片段亮斑位置相致。由检测图可知,连接反应已将扩增后的基因连接到了载体上,并在感受态菌株中得到了表达,形成白色菌落。图Ⅰ酶切示意图图Ⅶ图酶切后的质粒电泳图部分分析通过序列经校对后,与中数据库做相似性分析,选取相似度较高的菌株将结果记录如表。等认为当细菌的序列的相似性大于或等于时,则可以认为是同个属,当序列相似性大于或等于时,可以认为是同个种。从平板上分离得到的株菌通过序列分析结果表明有机白萝卜表皮附生乳酸菌主要分为和属表,其中,以为代表的株分离菌株属于属,它们的序列与的序列相似性为,因此以为代表的株菌被鉴定为,占所有菌株的以为代表的株菌属于属,它们的序列与的序列相似性为,因此以为代表的株菌被鉴定为,占所有菌株的以为代表的株菌属于属,它们的序列与的序列相似性为,因此以为代表的株菌被鉴定为,占所有菌株的以为代表的株菌属于属,它们的序列与的序列相似性为,因此以为代表的株菌被鉴定为,占所有菌株的以为代表的株菌属于属,它们的序列与的序列相似性为,因此以为代表的株菌被鉴定为,占所有菌株的以为代表的株菌属于属,它们的序列与的序列相似性为,因此以为代表的株菌倍被鉴定为,占所有菌株的。表序列比对结果属簇群相似菌株相似性菌株数量链霉素抗性分析结果查询欧洲抗微生物药物敏感委员会关于微生物对不同抗生素敏感阈值的数据库可知,和对链霉素的敏感阈值分别是和在分离得到的株乳酸菌中,共有菌株表因及基因区间在临床细菌学检验中的应用青岛大学医学院学报鹿连明,姚锦爱,张利平等柑橘黄龙病菌亚洲种和间隔区的及序列分析中国农学通报王洪升,王素珍,马净丽耐盐乳酸菌在高盐稀态酱油中的应用中国酿造,,东秀珠,蔡妙英常见细菌系统鉴定手册北京科学出版社张晓春,刘艳姿,高大威等自然发酵酸菜汁中乳酸菌的分离鉴定及抑菌活性的分析黑龙江畜牧兽医陈建华,朱望银,杜亚填湘西泡菜优质乳酸菌的筛选与应用研究食品科学,贺稚非,李洪军,徐毅等鲜辣椒微生物区系的研究中国酿造,王夫杰,鲁绯,渠岩等酱醅中乳酸茵的分离与鉴定中国酿造,出了对链霉素的抗药性,占所有乳酸菌的其中,在株中,有株菌表现出对链霉素的抗药性和对链霉素都表现为敏感和分别有株菌表现出对链霉素的抗药性。表有机白萝卜表皮附生乳酸菌对链霉素的与抗药性菌株阈值或注代表耐药,代表敏感结论从有机白萝卜表皮分离得到的株菌分别属于和属,其中,株菌被鉴定为,占所有菌株的株菌被鉴定为,占所有菌株的株菌被鉴定为,占所有菌株的株菌被鉴定为,占所有菌株的株菌被鉴定为,占所有菌株的株菌被鉴定为,占所有菌株的。在分离得到的株乳酸菌中,共有菌株表现出了对链霉素的抗药性,占所有乳酸菌的其中,在株中,有株菌表现出对链霉素的抗药性和对链霉素都表现为敏感和分别有株菌表现出对链霉素的抗药性。总结与体会通过本次论文,我很好的总结了四年大学的学习,并将所学的知识很好的应用到了实验中,对自己的理论应用能力有了很好的锻炼和提高。毕业设计不仅是对大学前三年所学知识的检测,也是对自己的思维和实验能力的种锻炼,并使之有所提高。通过这次毕业设计我发现原来自己学的知识是比较有限的,而且真正要自己设计个实验,并亲手把它做出来,是已经很不容易的事,还需要学习的东西很多。在实验过程中遇到了很多困难,开始不知道怎么下手,通过指导老师和师兄的帮助,我渐渐进入了毕业设计的正轨。我也明白了知识必须通过应用才能实现其价值,学以致用,是个提升的过程。这次毕业设计既锻炼了自己独立思考的能力与人合作的能力和应对困难的心理,还在理论知识和实验技能上得到了提高。此次实验是在西华大学生物工程古法
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