喹诺酮类读框，除了基因外不携带其他任何耐药基因，也没有任何种和移动相关的基因原件。质粒序列和基因序列中的百分含量分别为和与普罗威登菌属和变形菌属基因组序析发现序列几乎与普罗威登菌中阳性质粒完全相同，但是与肠道沙门菌中大小的阳性质粒只有半的相似性，两者之间只有两个相似，分别为和。有个开放阅特性研究质粒电泳和杂交结果显示所有菌株的基因均定位于质粒，所有菌株中的基因均定位于大小的质粒，质粒测序结果显示质粒大小为质粒命名为，序列号，比对分基因，株同时携带基因，株同时携带和基因。脉冲场凝胶电泳分析发现株基因阳性摩根摩根菌间没有同源性，均以独立菌株的形式存在，即不存在克隆播散的现象。质粒及测序确认株摩根摩根菌携带基因，它们对氟喹诺酮类药物环丙沙星左氧氟沙星和诺氟沙星均表现为不同程度的敏感性下降或耐药。检测结果显示株基因阳性菌株中，株菌同时携带，其次是哌拉西林他唑巴坦，头孢他啶和头孢噻肟株摩根摩根菌对氨基糖苷类药物阿米卡星除外，耐药率仅为的耐药率，对环丙沙星，左氧氟沙星和诺氟沙星的耐药率分别为和。它标本。临床抗菌药物敏感性试验结果显示几乎所有的摩根摩根菌对氨苄西林，萘啶酸表现为耐药，的菌株对复方新诺明耐药，碳青霉烯类药物美罗培南和厄他培南和头孢哌酮舒巴坦的抗菌活性最强敏感率均为属第医院临床送检标本中共分离到摩根摩根菌株，标本来源主要以尿液为主，其次是创面，痰液温州医科大学硕士学位论文，引流液，脓液，胆汁，血液，另有的菌株分离自其分别利用肉汤法和滤膜法接合转移试验及转化试验检测基因的水平转移能力，并对接合子或转化菌通过确认基因，同时检测喹诺酮类药物对接合子或转化菌的值。结果年年温州医科大学附属分别利用肉汤法和滤膜法接合转移试验及转化试验检测基因的水平转移能力，并对接合子或转化菌通过确认基因，同时检测喹诺酮类药物对接合子或转化菌的值。结果年年温州医科大学附属第医院临床送检标本中共分离到摩根摩根菌株，标本来源主要以尿液为主，其次是创面，痰液温州医科大学硕士学位论文，引流液，脓液，胆汁，血液，另有的菌株分，胆汁，血液，另有的菌株分离自其分别利用肉汤法和滤膜法接合转移试验及转化试验检测基因的水平转移能力，并对接合子或转化菌通过确认基因，同时检测喹诺酮类药物对接合子或转化菌的值。结果年年温州医科大学附属分别利用肉汤法和滤膜法接合转移试验及转化试验检测基因的水平转移能力，并对接合子或转化菌通过确认基因，同时检测喹诺酮类药物对接合子或转化菌的值。结果年年温州医科大学附属第医院临床送检标本中共分离到摩根摩根菌株，标本来源主要以尿液为主，其次是创面，痰液温州医科大学硕士学位论文，引流液，脓液，胆汁，血液，另有的菌株分离自其它标本。临床抗菌药物敏感性试验结果显示几乎所有的摩根摩根菌对氨苄西林，萘啶酸表现为耐药，的菌株对复方新诺明耐药，碳青霉烯类药物美罗培南和厄他培南和头孢哌酮舒巴坦的抗菌活性最强敏感率均为，其次是哌拉西林他唑巴坦，头孢他啶和头孢噻肟株摩根摩根菌对氨基糖苷类药物阿米卡星除外，耐药率仅为的耐药率，对环丙沙星，左氧氟沙星和诺氟沙星的耐药率分别为和。及测序确认株摩根摩根菌携带基因，它们对氟喹诺酮类药物环丙沙星左氧氟沙星和诺氟沙星均表现为不同程度的敏感性下降或耐药。检测结果显示株基因阳性菌株中，株菌同时携带基因，株同时携带基因，株同时携带和基因。脉冲场凝胶电泳分析发现株基因阳性摩根摩根菌间没有同源性，均以独立菌株的形式存在，即不存在克隆播散的现象。质粒特性研究质粒电泳和杂交结果显示所有菌株的基因均定位于质粒，所有菌株中的基因均定位于大小的质粒，质粒测序结果显示质粒大小为质粒命名为，序列号，比对分析发现序列几乎与普罗威登菌中阳性质粒完全相同，但是与肠道沙门菌中大小的阳性质粒只有半的相似性，两者之间只有两个相似，分别为和。有个开放阅读框，除了基因外不携带其他任何耐药基因，也没有任何种和移动相关的基因原件。质粒序列和基因序列中的百分含量分别为和与普罗威登菌属和变形菌属基因组序列中的百分含量比较接近，但是与肠道沙门菌中的百分含量有较大的差距。多次接合转移试验均未成功获得基因阳性接合子，化学转化试验成功获得株基因阳性转化株，转化株对氟喹诺酮类均表现为敏感性降低。结论摩根摩根菌标本来源比较广泛，体现了摩根摩根菌感染类型的多样性。其对喹诺酮类和氨基糖苷类药物的耐药性比较高，碳青霉烯类内酰胺类内酰胺酶抑制剂复合物表现出很好的抗菌活性，为临床治疗摩根摩根菌感染提供温州医科大学硕士学位论文很好的药物选择。本院摩根摩根菌中基因分布广泛，携带率远远高于国内外的报道。在基因阳性的摩根摩根菌中首次检出和基因。本研究中所有的基因阳性菌均是独立存在的菌株，不是由克隆菌株播散产生。与其他类型的类基因的质粒不同，基因所在的质粒较小结构简单，且不易自行转移左氧氟沙星最低抑菌浓度分水解酪蛋白萘啶酸美国国家生物技术信息中心诺氟沙星蛋白酶聚合酶链反应脉冲场凝胶电泳质粒介导的喹诺酮耐药基因秒十二烷基硫酸钠柠檬酸钠缓冲液冰醋酸电泳缓冲液硼酸电泳缓冲液三羟甲基氨基甲烷温州医科大学硕士学位论文摩根摩根菌中基因流行分布及质粒特性研究中文摘要目的研究摩根摩根菌中质粒介导的喹诺酮耐药基因，基因的流行分布情况，探讨其水平转移特性及所在质粒的结构特征，为有效防治耐药性产生和传播提供理论依据。方法回顾性调查年年间温州医科大学附属第医院临床分离的摩根摩根菌的临床分布特征，分析摩根摩根菌的耐药状况。阳性菌的筛查通过方法检测株摩根摩根菌中基因的携带情况，测序确定基因阳性菌株。阳性菌的耐药性检测采用琼脂稀释法检测喹诺酮类药物萘啶酸环丙沙星左氧氟沙星和诺氟沙星对阳性菌株的最低抑菌浓度结果根据年的标准判读。阳性菌中其他类型的的检测方法扩增阳性菌中其他种，包括和。阳性菌株间的同源性分析通过脉冲场凝胶电泳，方法分析阳性菌株间的同源性，研究阳性菌的流行特征。基因质粒特性及水平转移能力研究质粒提取试剂盒提取基因阳性菌株中的质粒，质粒经琼脂糖凝胶电泳后进行杂交，确定基因定位于质粒上及所在质粒大小，然后通过引物移步法对携带基因的质粒进行测序，获得质粒的序列，将质粒序列提交数据库获得登录号，并与数据库中的序列进行比对分析，同时进行序列中的含量进行分析，并对结构进行分析，绘制质粒结构图谱。分别利用肉汤法和滤膜法接合转移试验及转化试验检测基因的水平转移能力，并对接合子或转化