粘质沙雷菌耐药性及其对碳青霉烯类抗生素耐药机制研究_学位论文

临床常用抗菌药物敏感性试验表明粘质沙雷菌对环丙沙星和复方新诺明的敏感性最高，为其次为丁胺卡那霉素敏感率和左旋氧氟沙星敏感率对呋喃妥因的耐药率最高为。

值得注意的是，我院临床分离粘质沙雷菌对亚胺培南美罗培南厄他培南这三种碳青霉烯类抗生素均有较高的耐药率，分别是，和。

株碳青霉烯类耐药粘质沙雷菌中有株外排泵表型试验阳性，以亚胺培南美罗培南厄他培南作为底物，分别有株株株菌在的条件下值降低倍或倍以上，其中有株菌同时对两种不同药物有明显的外排作用，外排泵对多种抗菌药物都有影响，但对不同抗菌药物的影响存在差异在体外能不同程度地提高粘质沙雷菌对多种抗菌药物的敏感性，尤其对亚胺培南和厄他培南的敏感率分别提高了和外排泵编码基因的扩增均阴性。

株亚胺培南耐药株以株亚胺培南敏感株作对照检测，未发现明显的外膜蛋白条带缺失。

株碳青霉烯类耐药株中，改良试验阳性株检出率，科玛嘉显色阳性株检出率，方法株检测基因检出率有株产型金属内酰胺酶检出率有株细菌产型金属内酰胺酶检出率未检出等耐药基因。

株含基因的粘质沙雷菌接合转移试验全部接合成功，提示基因可以通过接合转移的方式在不同种属细菌间传播。

结论临床分离的粘质沙雷菌对抗菌药物的总体敏感性较好，但出现较高比例的碳青霉烯类抗生素耐药株，值得关注。

产碳青霉烯酶和主动外排是本地区粘质沙雷菌耐碳青霉烯类药物的主要机制，外排泵抑制剂在体外能降低多种抗菌药物对粘质沙雷菌的，尤其对碳青霉烯抗菌药物作用明显，外排泵抑制剂在克服细菌的耐药性方面有定的应用前景。

编码碳青霉烯酶的耐药基因可位于质粒上，在不同菌种间通过接合等方式传播，急需引起临床和实验室的重视。

本研究中没有检测到外膜蛋白的缺失，部分耐药粘质沙雷菌机制未知，需进步探索研究。

温州医学院硕士学位论文关键词粘质沙雷菌碳青霉烯类耐药机制外排泵外膜蛋白改良试验接合转移温州医学院硕士学位论文值分布抗菌药物耐药株数亚胺培南年年年年年年年小计美罗培南年年年年年年年小计厄他培南年年年年年年年小计结果发现，近年来亚胺培南美罗培南和厄他培南对粘质沙雷菌有明显的耐药率升高趋势，从年年的零分离率，逐渐升高至亚胺培南，美罗培南和厄他培南，不同药物对相同年份分离株的耐药率没有明显差异。

从分布频度看，每年分离菌株中亚胺培南与美罗培南的耐药率相当，厄他培南的耐药率高于亚胺培南和美罗培南，我们对亚胺培南和厄他培南根据值不同分成两组进行比较，卡方检验结果，结果显示菌株对亚胺培南和厄他培南耐药率的差异有统计学意义。

亚胺培南敏感的粘质沙雷菌中，值的菌株占，值的菌株占而美罗培南敏感的粘质沙雷菌中，温州医学院硕士学位论文值的菌株占，值的菌株占，提示对粘质沙雷菌，亚胺培南比美罗培南有更好的潜在抗菌活性。

分析与讨论粘质沙雷菌是条件致病菌，近年来该菌在国内外医院感染中占有较重要的地位，多引起泌尿系统下呼吸道伤口感染及菌血症。

从本实验结果可以看出，粘质沙雷菌临床分离率逐年上升，应引起重视。

分离到的菌株具有病区集中趋势，神经外科呼吸内科和烧伤科总的检出构成比超过，与病人患基础疾病抵抗力差有关。

本研究中，株粘质沙雷菌主要标本来源是痰液占，其次为尿液血液导管和创口，说明粘质沙雷菌在临床上主要引起呼吸道感染，其次是泌尿道感染，也是血行感染的病原菌，另外烧伤感染，创口感染等也不容忽视。

对粘质沙雷菌的耐药性统计表明，对粘质沙雷菌的抗菌活性最好的为环丙沙星和复方新诺明，仅有株耐药，其他均为敏感其次为丁胺卡那霉素左旋氧氟沙星这几种药物可以作为临床治疗粘质沙雷菌的首选药物。

亚胺培南对肠杆菌科细菌的抗菌活性很好，众多研究均证实这点，但是本院分离得到的粘质沙雷菌对亚胺培南美罗培南厄他培南这三种碳青霉烯类抗生素均有较高的耐药率，分别是，和，远远超出年中国细菌耐药性监测公布的，急需引起重视。

临床定要合理用药，防止因抗菌药物筛选作用而产生耐药菌株。

本院陈坚等曾统计过院内年年分离到的粘质沙雷菌对临床常见药物的耐药性，报道耐亚胺培南菌株，耐药率为，与本研究中前年统计所得耐药率相符。

然而，陈坚等的研究在对药敏折点的判断上采取的是年以前的标准，该标准规定亚胺培南的折点是为敏感，为中介，为耐药而本研究采用的是年最新修订方案，对亚胺培南的折点规定是为敏感，为中介，为耐药。

本院年分离到的株粘质沙雷菌对亚胺培南为，按新旧折点均应判断为耐药。

但随着临床分离粘质沙雷菌数量的扩大，药敏折点的改变对菌株碳青霉烯类耐药率敏感率的统计有较大影响。

比如亚胺培南对株肠杆菌科细菌的为，按旧折点是敏感菌，按新折点就应该判为耐药。

这也可能是本研究数据与目前国内文献对粘质沙雷菌碳青霉烯类抗生素耐药率，和年中国细菌耐药性监测公布的数据相比偏高的原因。

温州医学院硕士学位论文本院亚胺培南美罗培南厄他培南这三种碳青霉烯类抗生素的耐药率分别于年年年迅速上升，从年的的上升到年的，和。

此耐药性变迁的发生与临床用药密切相关，由于前几年临床大量使用碳青霉烯类药物，导致其耐药性上升。

从亚胺培南美罗培南厄他培南对粘质沙雷菌的值频数分布来看，亚胺培南敏感的粘质沙雷菌中，值的菌株数量多于美罗培南敏感的粘质沙雷菌中值的菌株，提示对粘质沙雷菌，亚胺培南比美罗培南有更好的潜在抗菌活性。

亚胺培南是目前临床应用的抗菌活性最广泛抗菌作用最强大的抗生素但随着近年临床越来越广泛的应用，导致耐药菌株也逐年增多。

值得注意的是，亚胺培南厄他培南敏感的粘质沙雷菌其值也有明显上升趋势，而这些菌株的出现，无疑给临床抗感染治疗带来巨大的困难，。

氨基糖苷类药物中，妥布霉素不敏感率达，庆大霉素不敏感率为，适合作为临床经验用药本研究中株粘质沙雷菌临床连续分离株对呋喃妥因和阿莫西林棒酸的耐药率均高于，这可能与临床较早且广泛的应用该类药物有关，使得耐药率大大升高。

是近年来粘质沙雷菌耐药机制研究的热点之，它是粘质沙雷菌对三代头孢菌素耐药的主要原因。

大量研究表明，在粘质沙雷菌中的检出率日益上升，。

本研究三代头孢类药物中，头孢曲松不敏感率达，头孢噻肟达，头孢他啶为，这可能与此药物在临床的广泛使用有关，临床必须控制合理有效的用药，以期控制耐药性的传播。

细菌耐药性是临床感染治疗的重要问题和难题，掌握本地区临床细菌耐药性发生和发展趋势，对于指导临床合理应用抗菌药物制定各种感染的经验治疗方案和预防细菌耐药性产生及传播都有极大的参考意义。

为有效防止细菌耐药性的产生和播散，医院应严格执行消毒隔离制度，临床医师必须遵循抗菌药物使用原则合理用药，实验室也应加强与临床的沟通，使药敏检测更准确更迅速更有针对性的为临床提供依据。

粘质沙雷菌的耐药性已经受到了临床医生和临床微生物实验室的关注。

医源性感染可以导致个病区耐药菌株的爆发流行，等报道在意大利威尼斯医院的病区，曾先后两次出现产粘质沙雷菌的感染爆发。

在我国也常有耐药粘质沙雷菌感染散发和爆发的报道。

为有效防止细菌耐药性的产生和播散，临床医师必须遵循抗菌药物使用原则，合理用药，实验室也应加强与临床的沟通，使药敏检测更准确更有针对性地为临床提供依据。

细菌耐药性是临床感染治疗的重要问题和难题，掌握本地区临床细菌耐药性发生和发展趋势，对于指导临床合理应用抗菌药物制定各种感染的经验治疗方案和预防细菌耐药性产生及传播都有极大的参考意义。

为有效防止细菌耐药性的产生和播散，医院应严格执行消毒隔离制度，温州医学院硕士学位论文临床医师必须遵循抗菌药物使用原则合理用药，实验室也应加强与临床的沟通，使药敏检测更准确更迅速更有针对性的为临床提供依据。

粘质沙雷菌的耐药性已经受到了临床医生和临床微生物实验室的关注。

为有效防止细菌耐药性的产生和播散，临床医师必须遵循抗菌药物使用原则合理用药，实验室也应加强与临床的沟通，使药敏检测更准确更有针对性的为临床提供依据。

温州医学院硕士学位论文第二部分粘质沙雷菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究材料与方法材料菌株来源年年在温州地区不同医院分离收集得到碳青霉烯类耐药粘质沙雷菌株，送至本院微生物科检测，加上论文第部分由本院保存并存活的株耐碳青霉烯类抗菌药物菌株，共株非重复耐药粘质沙雷菌用于论文第二部分实验。

株耐药菌中来自痰液株尿液株血液株导管株创口和呼吸机管口各株所有菌株经自动化分析系统鉴定确认。

质控菌株大肠埃希菌购自卫生部临床检验中心产阳性对照菌耐利福平大肠埃希菌由浙江大学附属邵逸夫医院俞云松教授惠赠产阳性对照株为本室保存经测序确认的鲍曼不动杆菌。

主要试剂名称厂家或来源，蛋白质分子量标准低立陶宛公司科玛嘉显色系列培养基干粉法国科玛嘉公司考马斯亮蓝美国公司溴化乙锭美国公司十二烷基硫酸钠美国公司乙二胺四乙酸钠美国公司羰基氰氯苯腙，美国公司二甲基亚砜美国公司冰乙酸分析纯上海第试剂厂扩增试剂上海生工生物工程有限公司三羟甲基氨基甲烷碱上海生工生物工程有限公司琼脂糖粉西班牙公司产品哥伦比亚琼脂基础琼脂粉胰蛋白胨酵母提取物英国公司亚胺培南药品杭州默沙东制药有限公司分装产品美罗培南厄他培南药品中国食品药品检定研究院主要仪器温州医学院硕士学位论文硕士学位论文论文题目粘质沙雷菌耐药性及其对碳青霉烯类抗生素耐药机制研究研究生姓名学科专业临床检验诊断学指导教师二年五月温州医学院硕士学位论文温州医学院硕士学位论文目录缩略词表中文摘要英文摘要前言第部分粘质沙雷菌临床感染分布及耐药特性研究材料和方法结果分析与讨论第二部分粘质沙雷菌对碳青霉烯类抗生素耐药机制的研究材料和方法结果分析与讨论小结正文参考文献附录致谢综述及参考文献论文独创性声明温州医学院硕士学位论文缩略词表