端切缘组织到癌中心逐渐增强而距肿瘤同距离不同象限基因的表达无统计学差异。基因检测对形态上或表型上与正常细胞无可见差异的癌前细胞或具有潜在转化能力的“正常”细胞有区分力当只有少量癌细胞或微癌灶存在于边缘组织的个区域时，分子病理学角度能做提前判断。蛋白表达异常与复发的关系基因表达异常与发病部位病程肿瘤分期肿瘤生物学分型密切相关。边缘组织中蛋白表达异常与复发关系密切。表明了基因表达下降促进细胞分化功能下降，使分化低的骨肉瘤细胞增多。特别需要指出的是，由于胫骨远端骨肉瘤的特殊解剖，本次研究中，其骨肉瘤外科边界基因表达异常率明显高于其他部位的骨肉瘤，目前胫骨远端保肢的实际效果还是值得商榷。预计今后骨肉瘤分子边界的检测将成为评价和测量骨肉瘤保肢手术远近期效果的种手段。肿瘤骨周围水肿带中基因表达本研究采取肉眼与影像学发现的水肿组织先做病理学检查，未见肿瘤组织，影像学见到水肿组织的范围位于骨肉瘤坏死区域与正常区域之间，实际手术时肉眼也证实该区域的位置。分子生物学表达发现部分水肿带中大部分基因呈阳性，例织块。•例标本中见例有明显的骨肉瘤化疗后水肿区域，分别留取标本。另半瘤骨送病理科进行病理检查，用福尔马林溶液固定固定所有标本，存放入零下度冰箱，资料整理归档。标本保存流程手术标本切片的制作•标本用。•剩余例标本先同时从上下内外四个方向切取距骨肉瘤边缘根据术前结合术后肉眼判断为准的边缘组织，然后用电锯或骨刀沿肿瘤骨的冠状面劈开，将标本平分为两等份，最后取肿瘤中心组细胞的前提下确定截骨长度。所有截肢病人均行超关节的截肢术。标本取得及保存•手术后即取材及保存截除的肿瘤瘤段及截肢后标本，例标本中有例肱骨近端，例胫骨近端标本因肿瘤化疗后坏死区与正常组织难以区分而弃，完成个周期。•手术情况本实验组病人中，行保肢手术例和截肢例。保肢病人根据术前确定的肿瘤浸润范围，软组织扩大切除。同时术中保留的骨端段残段均行术中病理冰冻检查，在确保无肿瘤细胞或异型情及治疗方案化疗可能出现的并发症，征得患者家属得知情权，并签字。化疗药物主要有大剂量甲氨喋呤异环磷酰胺多柔比星顺铂,二线方案的药物主要有阿霉素变在骨内，且病变范围较小，例因引导下经皮细针穿刺未找到阳性结果，在我院骨肿瘤外科行病变开放活检，例在外院行切开活检。•新辅助化疗化疗前查血常规电解质肝肾功能及心电图胸片，向患者家属详细交待病软件•数码相机。治疗方案•病理诊断例患者中例初次在我院门诊就诊，例在我院放射科进行引导下经皮细针穿刺，例在我院骨肿瘤外科行带芯套管针切割抽吸活检，例因为病蜡切片机上海交通大学第六人民医院病理科提供•石蜡包埋机上海交通大学第六人民医院病理科提供•光学显微镜上海交通大学第六人民医院病理科提供•软件•磷酸盐缓冲液二氨基联苯胺上海交通大学第六人民医院病理科提供•鼠抗人蛋白单克隆抗体产品编号试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司，工作浓度均为即用型•石脂肪抑制成像采用水脂分离法获得水抑制和脂肪抑制•直尺手锯手术刀片购买于上海医用器材公司•固定液苏木素，伊红染液，乙醇，振仪器，矩阵，用直径的膝关节专用线圈。序列质子密度像梯度回波序列重，确定的病程天，平均天。主要的仪器设备试剂及测量工具•线平片拍摄病灶骨单位全长正侧位片•全身扫描机,上海交通大学第六人民医院放射科，层厚•核磁共振扫描仪上海交通大学第六人民医院核磁共细血管扩张型例，小细胞型例，混合型例。按部位，胫骨例，股骨例，肱骨例,尺骨例。所有病例均为单侧发病，其中左侧为例，右侧为例。•在符合标准的共例中，男性例，女例。患者就诊时年龄岁。平均岁。由起病到病理符合标准的共例，肿瘤按分期，其中Ⅰ期为例，Ⅰ期为例，Ⅱ期为例，Ⅱ期为例，Ⅲ期为例。肿瘤按组织学，骨母细胞型例，软骨母细胞型例，成纤维细胞型例，骨膜型骨肉瘤例，皮质旁骨肉瘤例，毛阴性的骨肉瘤,复发的骨肉瘤病例。术前检查时，肿瘤骨附近的关节明显挛缩畸形无明确可辨认的解剖结构关节面术后处理肿瘤标本断层损坏软组织坏死过多，解剖困难者。•能够满足上述条件的为上述例。般资料•或截肢术，病理诊断明确为初发的四肢骨肉瘤术前有完整的影像学检查术后取得完整的大体标本。临床资料完整并随访个月以上。•排除标准脊柱及骨盆的骨肉瘤，术后病理存在异议，不能明确的骨肉瘤，经活检后认为假物学研究，确定肿瘤安全的外科边界。•探究基因表达异常与骨肉瘤复发的关系，确定分子水平上骨肉瘤的无瘤边界。材料和方法临床资料•入选标准年月年月间就诊的，并化疗后手术，手术方式包括瘤段切除假体置换或物学研究，确定肿瘤安全的外科边界。•探究基因表达异常与骨肉瘤复发的关系，确定分子水平上骨肉瘤的无瘤边界。材料和方法临床资料•入选标准年月年月间就诊的，并化疗后手术，手术方式包括瘤段切除假体置换或截肢术，病理诊断明确为初发的四肢骨肉瘤术前有完整的影像学检查术后取得完整的大体标本。临床资料完整并随访个月以上。•排除标准脊柱及骨盆的骨肉瘤，术后病理存在异议，不能明确的骨肉瘤，经活检后认为假阴性的骨肉瘤,复发的骨肉瘤病例。术前检查时，肿瘤骨附近的关节明显挛缩畸形无明确可辨认的解剖结构关节面术后处理肿瘤标本断层损坏软组织坏死过多，解剖困难者。•能够满足上述条件的为上述例。般资料•符合标准的共例，肿瘤按分期，其中Ⅰ期为例，Ⅰ期为例，Ⅱ期为例，Ⅱ期为例，Ⅲ期为例。肿瘤按组织学，骨母细胞型例，软骨母细胞型例，成纤维细胞型例，骨膜型骨肉瘤例，皮质旁骨肉瘤例，毛细血管扩张型例，小细胞型例，混合型例。按部位，胫骨例，股骨例，肱骨例,尺骨例。所有病例均为单侧发病，其中左侧为例，右侧为例。•在符合标准的共例中，男性例，女例。患者就诊时年龄岁。平均岁。由起病到病理确定的病程天，平均天。主要的仪器设备试剂及测量工具•线平片拍摄病灶骨单位全长正侧位片•全身扫描机,上海交通大学第六人民医院放射科，层厚•核磁共振扫描仪上海交通大学第六人民医院核磁共振仪器，矩阵，用直径的膝关节专用线圈。序列质子密度像梯度回波序列重脂肪抑制成像采用水脂分离法获得水抑制和脂肪抑制•直尺手锯手术刀片购买于上海医用器材公司•固定液苏木素，伊红染液，乙醇，磷酸盐缓冲液二氨基联苯胺上海交通大学第六人民医院病理科提供•鼠抗人蛋白单克隆抗体产品编号试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司，工作浓度均为即用型•石蜡切片机上海交通大学第六人民医院病理科提供•石蜡包埋机上海交通大学第六人民医院病理科提供•光学显微镜上海交通大学第六人民医院病理科提供•软件•软件•数码相机。治疗方案•病理诊断例患者中例初次在我院门诊就诊，例在我院放射科进行引导下经皮细针穿刺，例在我院骨肿瘤外科行带芯套管针切割抽吸活检，例因为病变在骨内，且病变范围较小，例因引导下经皮细针穿刺未找到阳性结果，在我院骨肿瘤外科行病变开放活检，例在外院行切开活检。•新辅助化疗化疗前查血常规电解质肝肾功能及心电图胸片，向患者家属详细交待病情及治疗方案化疗可能出现的并发症，征得患者家属得知情权，并签字。化疗药物主要有大剂量甲氨喋呤异环磷酰胺多柔比星顺铂,二线方案的药物主要有阿霉素，完成个周期。•手术情况本实验组病人中，行保肢手术例和截肢例。保肢病人根据术前确定的肿瘤浸润范围，软组织扩大切除。同时术中保留的骨端段残段均行术中病理冰冻检查，在确保无肿瘤细胞或异型细胞的前提下确定截骨长度。所有截肢病人均行超关节的截肢术。标本取得及保存•手术后即取材及保存截除的肿瘤瘤段及截肢后标本，例标本中有例肱骨近端，例胫骨近端标本因肿瘤化疗后坏死区与正常组织难以区分而弃用。•剩余例标本先同时从上下内外四个方向切取距骨肉瘤边缘根据术前结合术后肉眼判断为准的边缘组织，然后用电锯或骨刀沿肿瘤骨的冠状面劈开，将标本平分为两等份，最后取肿瘤中心组织块。•例标本中见例有明显的骨肉瘤化疗后水肿区域，分别留取标本。另半瘤骨送病理科进行病理检查，用福尔马林溶液固定固定所有标本，存放入零下度冰箱，资料整理归档。标本保存流程手术标本切片的制作•标本脱钙前后的处理将术中留取的标本，分阶段集中处理，用手术刀片或小电锯切成约厚的完整薄片，浸泡在脱钙液中约周左右。标本的制作•依据肿瘤所在的平面设定相应的参照点，以此为准，垂直肿瘤骨纵轴水平间隔，将标本水平分成若干块，并根据石蜡标本盒大小，进步纵向分割。事前记录肿瘤分割图的详情，并编号。每石蜡标本盒记录相应编号及方向。•石蜡包埋将带有标记的石蜡小盒自来水浸洗各级酒精梯度脱水二甲苯透明浸蜡包埋石蜡切片机上切成石蜡切片。病理组织学染色•乙醇脱蜡至水•浸入苏木素染液，染色分钟•自来水浸洗•浸入盐酸酒精溶液进行分化，分钟•自来水浸洗•浸入淡氨水中，使细胞核蓝化•率骨肉瘤中心距骨肉瘤上方距骨肉瘤下方距骨肉瘤内侧距骨肉瘤外侧基因在骨肉瘤及其切缘组织中的表达癌中心及其切缘组织阳性标本例阴性标本例合计例阴性率骨肉瘤中心距骨肉瘤上方距骨肉瘤下方距骨肉瘤内侧距骨肉瘤外侧骨肉瘤及其边界组织中病理组织学及蛋白的表达的结果例骨肉瘤患者中的瘤体中心组织有例发现低表达的蛋白。病理组织学检测到例骨肉瘤瘤体中心标本中异型的分化差的骨肉瘤细胞，经统计两者存在相关性。提示蛋白的表达可成为预测骨肉瘤边界的检测手段。不同象限内基因表达为阴性结果的例数上方下方左侧右侧与肿瘤的位置关系基因阴性例数的阴性表达与病理特征的关系临床特征阴性表达值性别男女年龄岁岁病程天肿瘤部位股骨胫骨肱骨尺骨的阴性表达与病理特征的关系临床病理特征阴性表达值肿瘤分期ⅡⅡⅢ肿瘤类型骨肉瘤切缘组织中基因表达异常的多因素分析经检测在例骨肉瘤标本中，在距骨肉瘤的切缘组织共发现例标本其切缘组织中基因的表达异常，多因素相关分析表明骨肉瘤切缘组织基因的表达下降与患者年龄性别无关，但与发病部位及病程存在相关性。骨肉瘤切缘组织基因的表达下降与肿瘤分期肿瘤分型密切相关均小于。六病例随访结果•例患者手术后均得到随访，随访时间为至个月，平均个月。•随访资料随访资料显示，例患者中例行保肢手术的患者有例出现了骨肉瘤复发，分别为术后月，月，月，月，另有例因肺转移死亡。例截肢患者中有例出现超关节的远处转移，另有例出现肺转移而死亡。出现复发的例保肢患者第次手术的标本中距离骨肉瘤切缘的边界基因表达均为异常。经卡方检验出现复发与骨肉瘤边界基因表达异常存在相关性。骨肉瘤水肿带中蛋白表达异常的例患者均未出现复发。•有例胫骨近端假体置换术后患者因假体感染而行截肢术。其余患者随访期间情况尚可。病例随访结果•骨肉瘤保肢术后患者基因阴性表达与复发的关系组别例数阴性百分比骨肉瘤复发组骨肉瘤未复发组七典型病例病例赵，女，岁。右上臂疼痛月，外院行右肱骨上段病灶活检术，术后病理考虑骨肉瘤可能大，后在我院行右肱骨上段瘤段切除假体置换术。术后病理证实为毛细血管扩张型骨肉瘤。病例•离骨肉瘤外上象限外组织学病理检查结果低倍镜大部分区域