骤至关重要。该步骤能清除些干扰染色物质，如酸及其他些微量物质，提供个清晰，干净背景。甲醛前处理向染色盒中加入甲醛溶液，至覆盖并高出凝胶高度，然后放在摇床上振摇。厚度凝胶需要至少分钟甲醛前处理，但分钟处理能达到最佳对比度。如果使用更厚凝胶，则需要更长时间甲醛前处理。该步骤可能要花费分钟。或者用最初使用方法，把甲醛前处理和银浸渍像结合起来来完成该步骤。可以在后面预期结果中寻找例子。关键步骤对于灵敏度和图像对比度来说，甲醛前处理至关重要。甲醛前处理后，将溶液小心地倒出，不要碰到或损坏凝胶或者用循环水泵将固定液抽出，使凝胶沉到底下。银浸渍塑料盛酸容器普通实验室供给普通实验室手套，关键无粉手套摇床或轨迹震荡仪普通实验室供给盛放银溶液容器向沉淀银中加入普通实验室供给垃圾清理工具，普通实验室供给可选为了把最初凝胶完好地保存，我们用聚酯聚丙烯酰胺凝胶进行，描述种最新方法。循环水泵第二代微型蛋白初产物仪索尼数码相机试剂制备定影液用去离子水将冰醋酸稀释至，室温保存。个容积适合带龙头塑料容器。定影液较稳定，可大量配制。注意溶液有轻微腐蚀性家用食醋浓度为，禁止吸入其蒸气。甲醛溶液向去离子水中加入甲醛。注意该溶液组成成分有毒性，应小心操作。参考当地职业健康与安全法规。关键该溶液必须现配，确保甲醛在室温下保存，因为冷藏如会失活。关键在准备之前，须估量容器是否足够盛放要染色凝胶数量和大小。银溶液将硝酸银溶入去离子水中。注意该溶液组成成分有毒性，应小心操作。参考当地职业健康与安全法规。关键该溶液必须现配。关键在准备之前，估计盛放准备染色凝胶容器容积大小是否合适。硫代硫酸钠存贮溶液将硫代硫酸钠溶入水中配制而成。关键该溶液必须每周重配，所以每次尽量少量配制以免浪费。关键在准备之前，须估量容器是否足够盛放要染色凝胶数量和大小。显影液将溶入去离子水中配制而成。为了加快溶解速度，避免凝集沉积，配置时缓缓加入并快速搅拌。关键该溶液要用时须现配，并在条件下使用。因此，在使用前，监控好温度并将溶液倒入并外壁盛有冰块烧杯里搅拌会使得使用更加方便。如果温度太低，将烧瓶放在热水龙头下冲洗回温。关键在准备之前，须估量容器是否足够盛放要染色凝胶数量和大小。显影终止剂用去离子水将醋酸稀释至。用带有龙头容器盛装，放在冰箱里保存。该溶液较稳定，可大量配制。注意溶液有轻微腐蚀性，禁止吸入其蒸气。关键在准备之前，须估量容器是否足够盛放要染色凝胶数量和大小。仪器配置摇床摇床是最常用最专业化仪器。简单温和地摇动可使实验达到最优效果。这里并不推荐圆周运动，因为它不能将试剂均匀平整地分布到胶体表面。圆周运动会使试剂在凝胶周围旋转，导致中心区域相对停滞。步骤固定选取个干净，四周总面积比凝胶大塑料染色盒。向染色盒中倒入足量纯净固定液，至大约覆盖凝胶，并高出凝胶高度。小心地拆卸装置，把凝胶放入染色盒内。如果是聚酯底凝胶，凝胶面朝上。在摇床上不断地摇动染色盒。对于典型迷你胶来说，至少需要分钟固定时间，但固定分钟可获得较好对比度。如果使用更厚凝胶，则可能需要更长固定时间。这步骤可能需要分钟。关键步骤固定对于染色灵敏度来说至关重要。它主要功能是把分子固定在丙烯酰胺凝胶板上，避免弥散和后续图像处理时影像位移。它也能清除和中和化学杂质，如能干扰染色尿素和缓冲液。当凝胶在染色时，将凝胶装置和玻璃板清洗干净。然后，组装装置为下次制胶做准备。用乙醇清洗组装好装置来提高干燥度，再把装置放在无尘环境中以备后用。溶液配制当凝胶在固定时，准备充足显影液，至倒入染色盒时能覆盖并高出凝胶高度量。关键步骤本方法中为下步准备该溶液和其他溶液应在此时配制，这样不仅能确保溶液新鲜度，还能统筹俭省时间。硫代硫酸钠溶液和显影终止剂可之前配制，且可在此时使用在显影液中以比例添加硫代硫酸钠溶液。在冰箱中冷藏显影剂。配制足够甲醛溶液，至倒入染色盒时能覆盖并高出凝胶高度量。配制足够银溶液，至倒入染色盒时能覆盖并高出凝胶高度量。清洗凝胶固定之后，小心地将溶液倒出，不要碰到或损坏凝胶或者用循环水泵将固定液抽出，使凝胶沉到底下。清洗凝胶，向染色盒中倒入去离子水，至覆盖并高出凝胶高度。把染色盒放在摇床上不间断地摇晃分钟。如果凝胶厚度大于，则需要更长时间。如果清洗时间过长大于分钟，则染色效果变差，条带清晰度不高。清洗之后，如步骤样，小心地将溶液倒出。用去离子水再清洗遍。关键步骤清洗步骤至关重要。该步骤能清除些干扰染色物质，如酸及其他些微量物质，提供个清晰，干净背景。甲醛前处理向染色盒中加入甲醛溶液，至覆盖并高出凝胶高度，然后放在摇床上振摇。厚度凝胶需要至少分钟甲醛前处理，但分钟处理能达到最佳对比度。如果使用更厚凝胶，则需要更长时间甲醛前处理。该步骤可能要花费分钟。或者用最初使用方法，把甲醛前处理和银浸渍像结合起来来完成该步骤。可以在后面预期结果中寻找例子。关键步骤对于灵敏度和图像对比度来说，甲醛前处理至关重要。甲醛前处理后，将溶液小心地倒出，不要碰到或损坏凝胶或者用循环水泵将固定液抽出，使凝胶沉到底下。银浸渍引起图像褪色。如果显影速度过快，则马上终止反应，防止过度显影。根据这个原因，显影终止剂应在下保存，这样能使它尽可能快起作用低温能降低显影速度，能让酸有足够时间起作用。掌握何时终止反应需要通过定练习，因为反应很容易过头。凝胶背景呈淡橘黄色对实验无干扰，因为黑白照片或背光照明下该颜色基本消失。用平面观察灯检视凝胶，解读信息，用相片记录凝胶信息。将显影终止剂倒出，用去离子水清洗凝胶。如果有必要，可用照片记录凝胶。用夹子夹住聚丙烯酰胺凝胶角，凉晚上。干燥凝胶无毒性，能安全操作。染色染好，图像将不会褪色或变暗，永久性记录实验经作者记录，年凝胶依旧完美。但是，在个极其干燥环境中，凝胶会变得卷曲，易碎。因此，我们建议将凝胶保存在带有拉链塑料袋里。问题与讨论时间步骤，固定核酸，配制溶液分钟同时操作步骤，清洗凝胶分钟步骤和，甲醛前处理分钟步骤，银溶液浸渍分钟步骤，图像形成，分钟步骤，终止反应分钟问题与解决办法问题可能原因解决方法显影不清低质量试剂换成级试剂显影不清试剂过期现配储备液显影不清低温储存，使甲醛液活性降低适当储存，现配溶液人为污染粘印在凝胶上指印，灰尘和其他生物材料或操作不当戴手套，防其他物体触碰凝胶表面，直到图像形成人为阴影去污剂残留在电泳玻璃板上用去离子水清洗电泳玻璃板，如必要，可用乙醇或盐酸清洗人为表面污染玻璃板上有污染物用电泳玻璃板同面进行实验，用标记该面胶内污点污点横穿胶体可能会阻止条带延伸。通常因为电泳缓冲溶液或溶液中有污染物使用洁净缓冲液或使用其他缓冲液胶内污点聚丙烯酰胺质量不高检查丙烯酰胺和是否现配表测试不同操作方法。检查不同操作方法中不同步骤。其他方法甲醛银浸渍单独进行甲醛前处理，分钟，分钟，分钟，分钟，分钟单独进行银浸渍显影液中加甲醛显影终止剂室温下图像形成和终止结果为了举例说明银染法些其他可能选择，将聚酯如描述中那样进行操作。凝胶上有条含有标记物泳道，条泳道中含有从实验得来扩增产物。将组同样样品装填入块凝胶中每块胶上组样品用空白泳道隔开，在同电泳仪中背对背同时电泳。将聚酯凝胶切成相同片状，然后各用不同方法进行处理。当图像达到最佳对比度时用眼观察，终止显影反应。所用种方法如表中所列，所得结果如数据所示。根据实验所用方法来分析新数据，要求核酸分离和显像。例如，就映像来说，是根据具有不同流动性或呈现性无毒条带来评价多态标记物，这些标记物可用来建立分离分子标记物和表型之间遗传连接。通过银染条带分离，再放大，克隆和后续处理，实现了主导标记方法向以为基础共同主导标记方法转变。银染法也可运用到标记法。或者使用大量分子标记指纹图谱可运用到些需要鉴定种属小生物样品鉴定是植物，动物，细菌还是真菌。可直接观看或处理后观看图像，然后依次进行定量关系测定。从干燥银染凝胶中重新分离，使得法医和证据档案建立成为可能。作为电子档案或打印图像与次级图像进行对比。数据聚丙烯酰胺凝胶电泳银染分离任意初始扩增产物图像依次展示了种不同操作方法结果，在表中进行描述。种不同任意样品被装载进入横穿块凝胶通道，同时在中电泳移动。为了使不同银染法能够直接进行比较成为现实，在染色和电泳之后将凝胶切成相同部分。在同时间段内，用相同设置索尼数码相机对图像进行拍照。用截取图像，调节色彩平衡和亮度，尽量与实物相近。保存颜色信息显示染色所产生不同色彩。不能进行其他图像处理。不能进行污染和损伤有价值地运用该方法主要在于核实小分子核酸个核苷酸。例如，我们已经按该方法用浓度凝胶检测了商业供应引物。随着对其他小分子核酸关注，如微小抑制剂和微型，相信在未来时间里该方法将会被运用更加广泛。本文所更新和优化银染法与之前文章所述方法相比具有明显优势。参考文献略原文中文字出处，译文聚丙烯酰胺凝胶上银染法本文描述了种简单但更优越的银染法，应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳之后的片段以及其他有机分子显像。其灵敏度与同位素放射方法相当，能准确检测单位量范围内的。塑料盛酸容器普通实验室供给普通实验室手套，关键无粉手套摇床或轨迹震荡仪普通实验室供给盛放银溶液容器向沉淀银中加入普通实验室供给垃圾清理工具，普通实验室供给可选为了把最初凝胶完好地保存，我们用聚酯聚丙烯酰胺凝胶进行，描述种最新方法。循环水泵第二代微型蛋白初产物仪索尼数码相机试剂制备定影液用去离子水将冰醋酸稀释至，室温保存。个容积适合带龙头塑料容器。定影液较稳定，可大量配制。注意溶液有轻微腐蚀性家用食醋浓度为，禁止吸入其蒸气。甲醛溶液向去