1、“.....若出现杂交带,表明目的基因转录出了。提取检测目的基因是否翻译成蛋白质方法抗原抗体杂交苏云金杆菌毒素蛋白将毒蛋白注射小鼠体内从小鼠血管抽出血液分离出抗毒素的抗体抗体蛋白质出现杂交带脱分化组织培养若不能表达,要对抗虫基因再进行修饰。怎样检验抗虫基因在棉细胞内是否表达呢没有抗虫基因的棉植株有抗虫基因的棉植株棉铃虫虫没有死虫被杀死没有表达目的基因表达类型步骤检测内容方法结果显示分子检测第步目的基因是否进入受体细胞分子杂交和之间是否成功显示出杂交带第二步目的基因是否转录出分子杂交技术和之间是否成功显示出杂交带第三步目的基因是否翻译出蛋白质抗原抗体杂交是否成功显示出杂交带个体水平鉴定包括抗虫抗病的接种实验,以确定是否有抗性以及抗性的程度基因工程产品与天然产品的活性比较,以确定功能是否相同等。目的基因的表达和检测提示分子杂交技术首先提取受体细胞中的,然后高温解成单链,再与同位素标记的探针杂交抗原抗体杂交所用到的抗体是用表达出的蛋白质注射动物进行免疫......”。
2、“.....将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中,然后在含有四环素的培养基上培养大肠杆菌。如果表达载体未进入大肠杆菌中,大肠杆菌会不含有抗四环素基因而死掉如果培养基上长出大肠杆菌菌落,则表明珠蛋白基因已进入其中。培养进入了珠蛋白基因的大肠杆菌,收集菌体,破碎后从中提取珠蛋白。生相应的抗体,并提取出而来的。归纳基因工程的基本操作程序.获取目的基因从基因文库利用化学方法人工合成.构建基因表达载体目的基因启动子终止子标记基因.将目的基因导入受体细胞转化法微生物农杆菌转化法植物显微注射法动物.目的基因的检测与鉴定检测是否插入转录翻译为什么要构建基因文库直接从含有目的基因的生物体内提取不行吗构建基因文库是获取目的基因的方法之,并不是唯的方式。如果所需要的目的基因序列已知,就可以通过方式从含有该基因的生物的中,直接获得,也可以通过反转录,用方式从中获得,不定要构建基因文库。但如果所需要的目的基因的序列完全不知,或只知道目的基因序列的段,或想从种生物体内获得许多基因......”。
3、“.....或者想知道种生物在个体发育的不同阶段表达的基因有什么不同,或者想得到种生物的全基因组序列,往往就需要构建基因文库。利用大肠杆菌可以生产出人的胰岛素,联系前面有关细胞器功能的知识,结合基因工程操作程序的基本思路,思考下,若要生产人的糖蛋白,可以用大肠杆菌吗有些蛋白质肽链上有共价结合的糖链,这些糖链是在内质网和高尔基复合体上加工完成的,内质网和高尔基复合体存在于真核细胞中,大肠杆菌不存在这两种细胞器,因此,在大肠杆菌中生产这种糖蛋白是不可能的。寻根问底根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理,你能分析出农杆菌不能将目的基因不能导入单子叶植物的原因吗若将个抗病基因导入小麦中,理论上讲你应该怎样做要选择合适的农杆菌菌株,因为不是所有的农杆菌菌株都可以侵染单子叶植物要加趋化和诱导的物质,目的是使农杆菌向植物组织的受伤部位靠拢趋化性和激活农杆菌的诱导的基因,使转移并插入到染色体上。酚类诱导物主要在双子叶植物细胞壁中合成,通常不存在于单子叶植物中......”。
4、“.....当它的成分异常时,动物有可能患种疾病,如镰刀形细胞贫血症。假如让你用基因工程的方法,使大肠杆菌生产出鼠的珠蛋白,想想,应如何进行设计从小鼠中克隆出珠蛋白基因的编码序列。将前接上在大肠杆菌中可以适用的启动子,另外加上抗四环素的基因,构建模板特异性引物耐热聚合酶体系基本组成成分对寡核苷酸序列与目的基因的起始段互补总结的基本反应步骤变性˚延伸˚退火˚总结聚合酶酶活性温度技术扩增与复制的比较技术复制相同点原理原料条件不同点解旋方式场所酶结果碱基互补配对四种脱氧核苷酸模板能量酶在高温下变性解旋解旋酶催化体外复制细胞核内热稳定的聚合酶细胞内的聚合酶大量的片段形成整个分子根据已知蛋白质的氨基酸序列,推测出相应的序列,然后按照碱基互补配对原则,推测出它的结构基因的核苷酸序列,再通过化学方法,以单核苷酸为原料合成目的基因......”。
5、“.....使其出现个切口,露出。用切断目的基因,使其产生。将切下的目的基因片段插入质粒的处,再加入适量,形成了个重组分子重组质粒限制酶黏性末端同种限制酶相同的黏性末端切口连接酶.过程二构建表达载体核心质粒分子限制酶处理个切口两个黏性末端两个切口获得目的基因连接酶重组分子重组质粒同种过程.基因表达载体的目的使目的基因在受体细胞中稳定存在并可以遗传给下代使目的基因能够表达和发挥作用。科学家在培育抗虫棉时,经历了多次失败,才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中,然后导入棉花的受精卵中,结果抗虫基因在棉花体内没有表达。然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子抗虫基因首端,导入棉花受精卵,长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子抗虫基因的质粒中插入终止子抗虫基因末端,导入棉花物细胞等。•将目的基因导入受体细胞的原理借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。转化目的基因进入内......”。
6、“.....将目的基因导入植物细胞•农杆菌转化法•基因枪法•花粉管通道法农杆菌转化法特点易感染双子叶植物和裸子植物,对大多数单子叶植物没有感染能力原理质粒上的可以转移到受体细胞,并整合到受体细胞染色体的上。转化过程质粒目的基因构建表达载体导入植物细胞插入植物细胞染色表达新性状转入农杆菌基因枪法又称微弹轰击法,是利用压缩气体产生的动力,将包裹在金属颗粒表面的表达载体打入受体细胞中,使目的基因与其整合并表达的方法。基因枪法适用于单子叶植物花粉通道法植物花粉在柱头上萌发后,花粉管要穿过花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物受粉后,花粉形成的花粉管还未愈合前,剪去柱头,然后,滴加含目的基因,使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。适用于被子植物胚珠花药花丝柱头花柱子房壁子房雄蕊雌蕊.将目的基因导入动物细胞方法显微注射法将基因表达载体提纯......”。
7、“.....将目的基因导入微生物细胞思考为什么要用处理受体细胞用处理,增加细菌细胞壁的通透性受体生物植物动物微生物受体细胞导入方法受精卵体细胞受精卵细胞个体农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术用处理成感受态细胞采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的作法正确的是.将毒素蛋白注射到受精卵中.将编码毒素蛋白的序列,与质粒重组,导入细菌,用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养.将编码毒素蛋白的序列,与质粒重组,注射到棉的子房并进入受精卵.将编码毒素蛋白的序列,注射到精卵,结果成长的植株,有了抗虫能力。资料思考作为基因工程表达载体,只需含有目的基因就可以完成任务吗为什么不可以。因为目的基因在表达载体中得到表达并发挥作用,还需要有其他控制元件,如启动子终止子和标记基因等。必须构建上述元件的主要理由是生物之间进行基因交流......”。
8、“.....只将编码序列导入受体生物中无法转录目的基因是否导入受体生物中需要有筛选标记为了增强目的基因的表达水平,往往还要增加些其他调控元件,如增强子增强基因启动子工作效率的顺式作用序列,能够在相对于启动子的任何方向和任何位置上游或下游上都发挥作用。等有时需要确定目的基因表达的产物存在于细胞的什么部位,往往要加上可以标识存在部位的基因或做成目的基因与标识基因的融合基因,如绿色荧光蛋白基因等。.基因表达载体的组成它们有什么作用目的基因启动子终止子标记基因调节基因操纵基因结构基因聚合酶半乳糖苷酶酶酶聚合酶启动子聚合酶启动子位于基因首端的段特殊的片断,它是聚合酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出,最终获得蛋白质。思考表达载体为什么定要有启动子•生物之间进行基因交流,只有使用受体生物自身基因的启动子才能有利于基因的表达•通过文库获得的目的基因没有启动子,只将编码序列导入受体细胞无法转录......”。
9、“.....能终止的转录。是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将有目的基因的细胞筛选出来。思考标记基因有什么作用载体与表达载体的区别二者都有标记基因和复制原点两部分片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因启动子终止子三部分结构。注意用到的工具酶既用到限制酶切割载体,又用到连接酶将目的基因和载体拼接,两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键。启动子终止子对于目的基因表达必不可少。目的基因不能单独进入受体细胞,必需以表达载体的方式携带进去。基因工程技术路线三将目的基因导入受体细胞•常用的受体细胞有大肠杆菌枯草杆菌土壤农杆菌酵母菌和动胞的基因结构比较思考编码相同数目氨基酸的蛋白质,原核细胞与真核细胞基因结构样长吗连续不连续编码区非编码基因表达的计算•在真核生物中......”。
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