1、参见附录中图的号泳道,所获扩增产物与参考序列参见附录的或数据库中水禽圆环病毒基因序列同源性达到以上,可判样品为核酸阳性当待检样品,保存于条件下。样品中病毒提取常规提取步骤取匀浆液上清,加入的,加入蛋白酶至终浓度,充分混匀,水浴。加入等体积饱和苯酚,充分混匀,在条件下离心。吸取离心后各管中的上清液转移至灭菌管注意不要吸出中间层,加入与上清液等体积的酚氯仿异戊醇混合物混合物中者比例依次为,颠倒混匀,静性样品扩增结果和阳性样品混合物扩增结果阴性样品扩增结果待检样品阳性扩增结果待检样品阳。

2、体积的酚氯仿异戊醇混合物混合物中者比例依次为,颠倒混匀,静出现左右特异性条带参见附录中图的号泳道,所获扩增产物与参考序列参见附录的或数据库中水禽圆环病毒基因序列同源性达到以上,可判样品为核酸阳性无特异性扩增条带参见附录中图的号泳道判样品为水禽圆环病毒核酸阴性。附录规范性附录相关试剂的配制十烷基苯磺酸钠称取高纯度的置于烧杯中,加入蒸馏水,加。其中,为共用上游引物,与用于检测,扩增条带为大小的基因片段,与用于检测,扩增条带为大小的基因片段。各引物的工作浓度均为。水禽圆环病毒感染鉴别诊。

3、水禽圆环病毒感染鉴别诊断技术范围本标准规定了水禽圆环病毒感染鉴别诊热溶解,温度降至室温,再定容至,室温保存备用。的醋酸钠溶液置于烧杯中,加入蒸馏水搅拌溶解,加蒸馏水定容至,高压灭菌,常温保存备用。乙醇取无水乙醇加入蒸馏水,定容至,保存备用。溴化乙锭溶液溴化乙锭蒸馏水至电泳缓冲液溶液溶解于适量灭菌去离子水中,混现大小的扩增条带,阳性样品混合物出现和大小的扩增条带参见附录,空白对照样品和阴性对照样品均无特异性扩增条带号泳道,本次实验结果有效。待检样品结果判定当待检样品出现左右特异性条。

4、匀后用氢氧化钠溶液调,最后用蒸馏水至。配制电泳缓冲液羟基甲基氨基甲烷冰乙酸乙铵乙酸钠溶液蒸馏水至用蒸馏水稀释倍使用。配制电泳缓冲液电泳缓冲液蒸馏水至琼脂糖凝胶琼脂糖电泳缓冲液至置微波炉中加热至完全融化,待冷至时,加溴化乙锭溶液,摇匀后倒入制水禽圆环病毒感染鉴别诊断技术.,保存于条件下。样品中病毒提取常规提取步骤取匀浆液上清,加入的,加入蛋白酶至终浓度,充分混匀,水浴。加入等体积饱和苯酚,充分混匀,在条件下离心。吸取离心后各管中的上清液转移至灭菌管注意不要吸出中间层,加入与上清液等。

5、体,室温静置。加入灭菌去离缓冲液配制方法见附录的。水禽圆环病毒感染鉴别诊断技术范围本标准规定了水禽圆环病毒感染鉴别诊断的操作技术要求。本标准适用于鸭圆环病毒鹅圆环病毒感染的鉴别诊断。疫病简述水禽圆环病毒为圆环病毒科圆环病毒属的成员,主要包括鸭圆环病毒,和鹅圆环病毒,冰上保存备用。提取的应在内进行扩增或保存于冰箱,将核酸转移至反应混合物配制区。商品化试剂盒提取方法也可采用市售商品化的提取试剂盒,完成样品中病毒的提取。台式冷冻离心机转速不低于。微量移液器。组织匀浆器。电泳仪。电泳槽。。

6、性扩增结果待检样品阴性扩增结果。检测结果电泳图福建省地方标准水禽圆环病毒感染鉴别诊断技术年月第版年月第次印刷。引物设计根据水禽鸭鹅圆环病毒两个主要蛋白基因之间的间隔序列差异设计条特异性引物水禽圆环病毒感染鉴别诊断技术.基因组均为环状单股正链。可感染不同品种日龄的鸭,可感染不同品种不同日龄的鹅。水禽圆环病毒主要侵害水禽免疫系统,导致宿主免疫应答机能下降,临床上造成被感染动物生长迟缓,并易引起其他细菌和病毒的继发或混合感染。鉴别诊断仪器设备仪。水禽圆环病毒感染鉴别诊断技,保存于条件下。

7、断技术。测序使用凝胶成像分析系统观察核酸条带并判断结果,经核酸扩增电泳后如出现或大小的扩增条带,应对其切胶回收后进行测序,也可直接送产物进行测序,鹅圆环病毒参考序列参见附录,。结果判定实验成立条件当阳性对照样品中,鹅圆环病毒样品出现大小的扩增条带,鸭圆环病毒样品。其中,为共用上游引物,与用于检测,扩增条带为大小的基因片段,与用于检测,扩增条带为大小的基因片段。各引物的工作浓度均为,保存于条件下。样品中病毒现大小的扩增条带,阳性样品混合物出现和大小的扩增条带参见附录,空白对照样品和。

8、列参见附录的或数据库中水禽圆环病毒基因序列同源性达到以上,可判样品为核酸阳性当待检样品置后,在条件下离心。重复步骤次。吸取离心后各管中的上清液转移至相应的管中,加入体积的的醋酸钠溶液值为倍体积的无水乙醇,颠倒混匀,沉淀。于条件下,离心。轻轻倾去上清液,加入乙醇清洗沉淀次,离心,用无菌枪头吸尽残余液体,室温静置。加入灭菌去离子水重悬,轻轻混匀溶解管壁上的。其中,为共用上游引物,与用于检测,扩增条带为大小的基因片段,与用于检测,扩增条带为大小的基因片段。各引物的工作浓度均为离子水重悬。

9、性对照样品均无特异性扩增条带号泳道,本次实验结果有效。待检样品结果判定当待检样品出现左右特异性条带参见附录中图的号泳道,所获扩增产物与参考序列参见附录的或数据库中水禽圆环病毒基因序列同源性达到以上,可判样品为核酸阳性当待检样品台式冷冻离心机转速不低于。微量移液器。组织匀浆器。电泳仪。电泳槽。重复步骤次。吸取离心后各管中的上清液转移至相应的管中,加入体积的的醋酸钠溶液值为倍体积的无水乙醇,颠倒混匀,沉淀。于条件下,离心。轻轻倾去上清液,加入乙醇清洗沉淀次,离心,用无菌枪头吸尽残余液。

10、。乙醇配制方法见附录的。溴化乙锭溶液配制方法见附录的。的操作技术要求。本标准适用于鸭圆环病毒鹅圆环病毒感染的鉴别诊断。疫病简述水禽圆环病毒为圆环病毒科圆环病毒属的成员,主要包括鸭圆环病毒,和鹅圆环病毒基因组均为环状单股正链。可感染不同品种日龄的鸭,可感染不同品种不同现大小的扩增条带,阳性样品混合物出现和大小的扩增条带参见附录,空白对照样品和阴性对照样品均无特异性扩增条带号泳道,本次实验结果有效。待检样品结果判定当待检样品出现左右特异性条带参见附录中图的号泳道,所获扩增产物与参考序。

11、,轻轻混匀溶解管壁上的,冰上保存备用。提取的应在内进行扩增或保存于冰箱,将核酸转移至反应混合物配制区。商品化试剂盒提取方法也可采用市售商品化的提取试剂盒,完成样品中病毒的提取。引物设计根据水禽鸭鹅圆环病毒两个主要蛋白基因之间的间隔序列差异设计条特异性引物附录资料性附录检测结果电泳图例。说明相对分子质量标准物空白对照样品扩增结果阳性样品扩增结果阳水禽圆环病毒感染鉴别诊断技术.,保存于条件下。样品中病毒提取常规提取步骤取匀浆液上清,加入的,加入蛋白酶至终浓度,充分混匀,水浴。加入等体。

12、。样品中病毒提取常规提取步骤取匀浆液上清,加入的,加入蛋白酶至终浓度,充分混匀,水浴。加入等体积饱和苯酚,充分混匀,在条件下离心。吸取离心后各管中的上清液转移至灭菌管注意不要吸出中间层,加入与上清液等体积的酚氯仿异戊醇混合物混合物中者比例依次为,颠倒混匀,静日龄的鹅。水禽圆环病毒主要侵害水禽免疫系统,导致宿主免疫应答机能下降,临床上造成被感染动物生长迟缓,并易引起其他细菌和病毒的继发或混合感染。鉴别诊断仪器设备仪。水禽圆环病毒感染鉴别诊断技术。的醋酸钠溶液配制方法见附录的。无水乙。

参考资料：

[1]DB41T 455-2006 连翘质量技术规范（第8页，发表于2022-06-26）

[2]DB41T 451-2006 天麻质量技术规范（第8页，发表于2022-06-26）

[3]DB65T 2933-2009 无公害食品 阿魏菇野生菌种采集技术规程（第4页，发表于2022-06-26）

[4]DB44T 2021-2017 网络交易服务规范 消费品信息明示通用要求（第5页，发表于2022-06-26）

[5]DB52T 1000-2018 遵义红 红茶（第16页，发表于2022-06-26）

[6]GB 5009.190-2014 食品安全国家标准 食品中指示性多氯联苯含量的测定（第27页，发表于2022-06-26）

[7]TCBJ 2201-2019 白酒产品追溯体系（第14页，发表于2022-06-26）

[8]SN 0208-1993 出口肉中十种磺胺残留量检验方法（第10页，发表于2022-06-26）

[9]GBT 6380-2019 数据的统计处理和解释 Ⅰ型极值分布样本离群值的判断和处理（第14页，发表于2022-06-26）

[10]LST 3124-2019 盐地碱蓬籽（第6页，发表于2022-06-26）

[11]GB 2811-2019 头部防护 安全帽（第15页，发表于2022-06-26）

[12]QSJH 0001 S-2019 油炸果蔬、食用菌、坚果仁（籽）（第12页，发表于2022-06-26）

[13]DB65T 3431-2012 农业名牌产品申报企业标准体系导则（第5页，发表于2022-06-26）

[14]DB32T 455-2017 产品质量监督抽查工作规范（第97页，发表于2022-06-26）

[15]LST 3122-2019 盐肤木果籽（第6页，发表于2022-06-26）

[16]LST 3120-2019 油用牡丹籽（第6页，发表于2022-06-26）

[17]QHMSP 0002 S-2019 方便菜肴（肉制品）（第14页，发表于2022-06-26）

[18]SNT 2512-2010 出口杂交水稻种子检疫管理规范（第10页，发表于2022-06-26）

[19]DB13T 5041-2019 企业标准编写水平评价规范（第104页，发表于2022-06-26）

[20]DB45T 1536-2017 甘蔗原醋生产技术规程（第8页，发表于2022-06-26）