1、制策略对于提高灵芝胞内萜产量会有更大的帮助。灵芝菌丝体生长阶段和代谢产物生成阶段的最适不同，在灵芝发酵前期在至之间更有利于灵芝菌丝体生长，而在灵芝菌丝体生长到定程度后提高发酵液至则更有利于灵芝胞内萜的产生，据此提出了灵芝菌丝体液态深层发酵过程的阶段控制策略。通过监测发酵液中还原糖的含量可以监控发酵过程中底物利用的变化，不同条件下还原糖利用率存在较大的差别，本研究在多阶段优化策略中只关注了灵芝菌丝体生长和灵芝胞内萜合成两个因素，而未将底物利用率加以考察，若进步结合底物利用率的影发酵液初始为使灵芝酸含量达到。凌庆枝等研究发现菌丝体生长及胞内灵芝酸生成的最适为，胞外灵芝酸产生的最适为，并采用优化的控制条件生产灵芝酸，胞外灵芝酸和胞内灵芝酸的产量。

2、胞生长和代谢产物的产生。现阶段发酵过程中的控制主要有种方法，包括调整发酵培养基的组成加入缓冲物质补加碳源或氮源补加酸或碱。改变发酵培养基仅限于控制发酵初期的条件，而加入缓冲物质和补加碳氮源对的调节能力有限。通过发酵罐补加酸碱液的方式可以维持整个发酵环境在个稳定的条件下，同时监控发酵过程参数的变化和发酵全程连续的代谢情况，探究使用阶段控制提高灵芝深层发酵合成三萜能力农产品论文水洗涤次，在烘箱中烘干至质量恒定，精确测定质量，记录菌丝体干重。取离心后的上清液，用，硝基水杨酸比色法测定还原糖含量。干燥的菌丝体用乙醇，料液比∶∶浸提，以齐墩果酸为标准品，采用香草醛冰醋酸比色法测定灵芝胞内萜含量，。每组实验设定个平行，计算平均值。动力学参数的计算用软。

3、最高，的菌丝体比生长速率最高之后的菌丝体比生长速率最高。图不同条件对灵芝菌丝体生长的影响对灵芝液态深层发酵过程中还原糖含量的影响不同对菌丝体消调控策略，并通过发酵罐进行放大验证。采用阶段控制策略进行灵芝液态深层发酵能有效地提高灵芝胞内萜的产量，该控制策略具有重要的工业应用价值，可以为灵芝菌丝体液态深层发酵的代谢和优化控制研究提供参考。参考文献戴玉成，曹云，周丽伟，等中国灵芝学名之管见菌物学报，刘锋，李鹏，黄秀旺，等灵芝萜组分的体内外抗肿瘤作用中国新药杂志，刘丙进，姚雪坤，张王月，等灵芝萜类化合物延缓衰老作用的实验研究海峡药学，黄艳娟，肖桂林灵芝萜药理学作用研究进展中医药导报，罗俊，林志彬灵芝萜类化合物药理作用研究进展药学学报素，得出的发酵。

4、过程中菌丝体生长的影响微生物的生长代谢过程非常复杂，而对此影响很大，。由图可知，在不同条件下，菌丝体的影响，通过阶段控制来提高灵芝合成萜的产量，为规模化深层发酵生产灵芝萜提供科学依据。材料与方法菌株灵芝菌株由上海市农业科学院食用菌研究所提供和保藏，菌株编号。探究使用阶段控制提高灵芝深层发酵合成三萜能力农产品论文。仪器与设备双层恒温培养振荡器上海智城分析仪器制造有限公司发酵罐发酵罐上海保兴生物设备工程有限公司多功能酶标仪美国公司。培养基平板培养基称取粉末溶于蒸馏水。种子培养基葡萄糖酵母粉磷，萜的最大浓度达到，比对照组提高了。与此同时微生物的生长发育及代谢产物的合成需要在合适的条件下进行。不仅可以改变细胞形态和培养液的流变性，而且还可以影响细。

5、累当菌丝体生长开始进入稳定期时，菌丝体干重增长减慢，但灵芝胞内萜的合成仍在较快地积累。在条件下，灵芝胞内萜含量最大，达到，比对照提高了。而由图可知，在，的灵芝胞内萜比合成速率最快，的灵芝胞内萜比合成速率最快，的灵芝胞内萜比合成速率最快。图不同条件对还原糖消耗量的影响图不同条件对灵芝胞内萜合成的影响灵芝液态，后菌丝体生长进入稳定期而在和条件下，菌丝体的对数生长期较长，在后才进入稳定期。在的条件下，发酵得到的菌丝体干重最大，为，比对照提高。比生长速率是指每小时单位质量的菌丝体所增加的菌丝体量。它是表征微生物生长速率的参数，也是发酵动力学中的重要参数。比生长速率值越大，表明菌丝体的生长活力越大。在，对照的菌丝体比生长速率最高，的菌丝体比生长速率。

6、别提高至和湿菌丝体等通过结合和溶氧条件进行阶段控制发酵，使灵芝萜的产量达到等通过添加药用昆虫神农蜣螂的乙醚提取物结合两阶段控制的策略使灵芝发酵萜的产量达到了。上述研究都提高了灵芝萜的产量，但是部分研究在摇瓶中进行，且研究局限于调节培养基的初始条件，而不是整个过程中的条件另部分探究使用阶段控制提高灵芝深层发酵合成三萜能力农产品论文还原糖有较大的影响。由图可知，随着菌丝体的生长，还原糖的消耗量也逐渐增加。在条件下，还原糖消耗速率最快，初始还原糖浓度为，还原糖的最终浓度为，利用率为，利用率与对照相比提高了。比消耗速率是指相对单位质量细胞单位时间内的基质消耗量。比消耗速率反映的是菌丝体对底物利用的快慢。由图可知，条件下还原糖的最大比消耗速率最低，。

7、对实验数据进行拟合，并插值计算不同条件下的菌丝体比生长速率还原糖比消耗速率和灵芝胞内萜比合成速率。菌丝体比生长速率还原糖比消耗速率和灵芝胞内萜比合成速率分别根据以下公式计算。灵芝深层发酵的影响因素主要包括温度通气限于控制发酵初期的条件，而加入缓冲物质和补加碳氮源对的调节能力有限。通过发酵罐补加酸碱液的方式可以维持整个发酵环境在个稳定的条件下，同时监控发酵过程参数的变化和发酵全程连续的代谢情况，从而探求条件对灵芝发酵影响的内在规律。对灵芝液态深层发酵有很大的影响，李平作等发现灵芝液态深层发酵的起始为时，有利于胞外多糖的合成，而在发酵过程中控制为时，胞外多糖的产量最大，达到，较未控制提高了。等在灵芝液态深层发酵过程中发现灵芝菌丝体生长和胞外多。

8、萜的影响天然产物研究与开发，赵艳灵芝关键成分萜酸的深层发酵技术研究长沙中南林业科技大学，李平作，章克昌灵芝胞外生物活性多糖的控制发酵微生物学通报，国家药典委员会中华人民共和国药典部北京中国医药科技出版社，孙琳对褐环粘盖牛肝菌羧酸循环中关键酶活性的影响呼和浩特内蒙古农业大学，凌庆枝，王林，魏兆军，等值控制灵芝发酵产生灵芝酸的研究中国酿造，杨树林，孟广荣，曾亮亮值对纤维，则可推导出另外的发酵调控策略。目前已有研究发现灵芝酸是在角鲨烯合酶角鲨烯环氧化酶氧化鲨烯环氧化酶细胞色素酶甲基转移酶和乙酰基转移酶等催化作用下生成的最终产物而是影响酶催化反应速率的重要因素之。影响灵芝萜合成的各种酶分子上有许多酸性和碱性的氨基酸侧链基团，如果酶要表现其活性，则。

9、合成的最适条件不同，并采用两阶段控基称取粉末溶于蒸馏水。种子培养基葡萄糖酵母粉磷酸氢钾水合硫酸镁。发酵培养基葡萄糖酵母粉磷酸氢钾水合硫酸镁。灵芝深层发酵的影响因素主要包括温度通气量转速和等。通常，灵芝的发酵温度为，温度过高或过低均不利于菌丝体生长。李平作等研究发现，采用发酵罐温度为时，灵芝发酵合成灵芝酸的产量达到最大，为。灵芝发酵过程需要消耗氧气，而通气量的大小对溶氧浓度至关重要。冯杰等优化了发酵罐中灵芝合成灵芝萜的培养条件，通气量为时，萜得率和生产强度最高，分别达对灵芝液态深层发酵过程中灵芝胞内萜合成的影响由图和图可见，液态深层发酵过程中灵芝胞内萜的积累与菌丝体的生长属于部分生长偶联型。在菌丝体处于对数生长期时，灵芝胞内萜的合成能够较快。

10、入对数生长期。在对照和条件液态深层发酵过程中还原糖含量的影响不同对菌丝体消耗还原糖有较大的影响。由图可知，随着菌丝体的生长，还原糖的消耗量也逐渐增加。在条件下，还原糖消耗速率最快，初始还原糖浓度为，还原糖的最终浓度为，利用率为，利用率与对照相比提高了。比消耗速率是指相对单位质量细胞单位时间内的基质消耗量。比消耗速率反映的是菌丝体对底物利用的快慢。由图可知，条件下还原糖的最大比消耗速率最低，而在的条件下，发酵得到的菌丝体干重最大，说明在此条件下菌丝体对还原糖的利用速率虽然最慢，但利用率最高，同时产生的菌丝体干重最高。图阶段李平作，徐柔，夏结红，等灵芝深层发酵生产环萜酸的研究工业微生物，冯杰，冯娜，杨焱，等通气量对灵芝菌丝体液态深层发酵合成灵。

11、些基团必须有定的解离形式。因而在发酵过程中调控的变化，使具有催化活性的特殊的离子基团在总酶中所占的比例提升，酶具有的催化灵芝萜合成的能力也会有较大的提高。本研究采用发酵罐，通过发酵罐的酸碱液补料装置进行调控，研究灵芝发酵究虽然考虑了灵芝发酵整个过程中的条件，却在制定控制策略时，仅根据不同条件下灵芝发酵的萜含量来确定，得到的控制策略不能最大程度的通过控制来提高灵芝胞内萜的产量，而本实验的阶段控制策略综合考虑了灵芝菌丝体的比生长速率和灵芝胞内萜的比合成速率，在发酵前期保证菌丝体快速生长，在发酵后期使胞内萜的比合成速率维持在最高值，这对于灵芝萜的规模化生产有重要价值。本研究仅通过阶段控制提升灵芝深层发酵合成萜的产量，而灵芝深层发酵的影响因素还包。

12、在的条件下，发酵得到的菌丝体干重最大，说明在此条件下菌丝体对还原糖的利用速率虽然最慢，但利用率最高，同时产生的菌丝体干重最高。探究使用阶段控制提高灵芝深层发酵合成三萜能力农产品论文酶系内切葡聚糖苷酶活力影响的酶催化动力学模型南京理工大学学报自然科学版，潘江安，唐庆，冯娜，唐传红，王金艳，刘艳芳，袁峰，徐国华，颜梦秋，谭贻，张劲松，周帅，冯杰利用阶段控制提高灵芝深层发酵合成萜能力的研究食用菌学报，基金国家自然科学基金青年基金上海市农业科学院学科领域建设专项农科国推匹配上海人才发展资金资助项目。结果与分析对灵芝液态深层发酵过程中菌丝体生长的影响微生物的生长代谢过程非常复杂，而对此影响很大，。由图可知，在不同条件下，菌丝体生长的迟滞期在，在后进。

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