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第1章蛋白质的结构与功能PPT文档(       134页) 第1章蛋白质的结构与功能PPT文档( 134页)

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1、肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热,呈现紫色或红色,此反应称为双缩脲反应,双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度。二蛋白质分离和纯化透析及超滤法透析利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开方法。将蛋白溶液装入用半透膜制成透析袋中,可将蛋白质溶液中小分子化合物除去,这种方法叫透析。如在袋外放吸水剂如聚乙二醇还可达到浓缩目。应用除盐和浓缩•超滤法应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有定截留分子量超滤膜,达到浓缩蛋白质溶液目。•超滤法在蛋白质溶液除盐浓缩及分离纯化中有广泛应用。二丙酮沉淀盐析使用丙酮沉淀时,必须在低温下进行,丙酮用量般倍于蛋白质溶液体积。蛋白质被丙酮沉淀后,应立即分离。除了丙酮以外,也可用乙醇沉淀。盐析是将硫酸铵硫酸钠或氯化钠等加入蛋白质溶液,使蛋白质表面电荷被中和以及水化膜被破坏,导致蛋白质沉淀。三电泳蛋白质在高于或低于其溶液中为带电颗粒。

2、于侧链含有可解离基团氨基酸,其值也决定于两性离子两边值算术平均值。酸性氨基酸碱性氨基酸与茚三酮反应定性和定量测定方法与甲醛反应测定游离氨基量。桑格反应端测定方法艾德曼反应端测定方法与荧光胺反应含量测定方法与,双硫基双硝基苯甲酸反应半胱氨酸含量测定氨基酸化学性质原理氨基酸茚三酮试剂篮紫色化合物吸收峰茚三酮反应用途氨基酸定量氨基酸显色氨基酸显色试剂颜色各种氨基酸茚三酮丙酮或乙醇溶液蓝紫色多种氨基酸吲哚醌酒精冰醋酸溶液不同氨基酸显不同颜色各种氨基酸澳酚蓝酒精溶液蓝色甘氨酸邻苯二醛酒精溶液墨绿色酪氨酸亚硝基萘酚酒精硝酸溶液红色酪氨酸对氨基苯磺酸碳酸钠溶液浅红色组氨酸对氨基苯磺酸碳酸钠溶液橘红色丝氨酸碘酸钠甲醇溶液及醋酸铵处理黄色精氨酸尿素萘酚酒精溶液氢氧化钠溴溶液红色半胱氨酸亚硝酸铁氰化钠甲醇溶液红色脯氨酸吲哚醌醋酸锌异丙醇溶液蓝色。

3、氨基酸,氨•加高浓度盐类硫酸铵硫酸钠氯化钠等•加有机溶剂酒精丙酮等•加重金属盐氯化高汞硝酸银硝酸铅及三氯化铁等•加些酸类苦味酸单宁酸三氯乙酸等能和蛋白质化合成不溶解蛋白质盐而沉淀。•变性与沉淀关系•变性蛋白质易于沉淀,有时蛋白质发生沉淀,但并不变性。•蛋白质凝固作用•蛋白质经强酸强碱作用变性后,仍能溶解于强酸强碱溶液中,若将调至,则变性蛋白质立即结成絮状不溶解物,此絮状物仍可溶解于强酸和强碱中。如再加热则絮状物可变成比较坚固凝块,此凝块不易再溶于强酸和强碱中,这种现象称为蛋白质凝固作用。四蛋白质紫外吸收由于蛋白质分子中含有共轭双键酪氨酸和色氨酸,因此在波长处有特征性吸收峰。蛋白质与其浓度呈正比关系,因此可作蛋白质定量测定。五蛋白质呈色反应⒈茚三酮反应蛋白质经水解后产生氨基酸也可发生茚三酮反应。生成蓝紫色化合物⒉双缩脲反应蛋白质和多肽分子。

4、•肽单元结构特点肽键键长介于单键和双键之间,具有部分双键性质,不能自由旋转。肽键和及两个均为反式构型。与相连单键可自由旋转,旋转角度以表示,旋转角以表示,即两面角。这样,两个相邻肽单元可以围绕个共用自由旋转,而造成两个肽单元在空间不同位置。这就是肽链折叠盘曲基础。蛋白质二级结构主要形式•螺旋•折叠•转角•无规卷曲二螺旋结构要点多肽链主链围绕中心轴形成右手螺旋,侧链伸向螺旋外侧。每圈螺旋含个氨基酸,螺距为。每个肽键亚氨氢和第四个肽键羰基氧形成氢键保持螺旋稳定。氢键与螺旋长轴基本平行。影响螺旋形成因素氨基酸侧链所带电荷如酸性或碱性氨基酸,氨负电荷时,溶液值称为该氨基酸等电点。两性解离及等电点•氨基酸等电点确定•氨基酸等电点可由其分子上解离基团解离常数来确定。净电荷正离子两性离子负离子等电点侧链不含离解基团中性氨基酸,对。

5、链骨架原子相对空间位臵,并不涉及氨基酸残基侧链构象。定义稳定因素在肽键羰基氧和亚氨基氢之间形成氢键肽单元参与组成肽键个原子位于同平面,又叫酰胺平面或肽键平面。它是蛋白质构象基本结构单位。肽单元肽单元•肽单元结构特点肽键键长介于单键和双键之间,具有部分双键性质,不能自由旋转。肽键和及两个均为反式构型。与相连单键可自由旋转,旋转角度以表示,旋转角以表示,即两面角。这样,两个相邻肽单元可以围绕个共用自由旋转,而造成两个肽单元在空间不同位置。这就是肽链折叠盘曲基础。蛋白质二级结构主要形式•螺旋•折叠•转角•无规卷曲二螺旋结构要点多肽链主链围绕中心轴形成右手螺旋,侧链伸向螺旋外侧。每圈螺旋含个氨基酸,螺距为。每个肽键亚氨氢和第四个肽键羰基氧形成氢键保持螺旋稳定。氢键与螺旋长轴基本平行。影响螺旋形成因素氨基酸侧链所带电荷如酸性或碱性。

6、,在电场中能向正极或负极移动。这种通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质技术,称为电泳。由于不同蛋白质带电多少分子量大小及分子形状不同,因此在电场中泳动速度就不同,从而可将蛋白质分离开来。根据支撑物不同,可分为薄膜电泳凝胶电泳等。几种重要蛋白质电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳常用于蛋白质分子量测定。等电聚焦电泳通过蛋白质等电点差异而分离蛋白质电泳方法。双向凝胶电泳是蛋白质组学研究重要技术。四层析层析分离蛋白质原理待分离蛋白质溶液流动相经过个固态物质固定相时,根据溶液中待分离蛋白质颗粒大小电荷多少及亲和力等,使待分离蛋白质组分在两相中反复分配,并以不同速度流经固定相而达到分离蛋白质目。蛋白质分离常用层析方法离子交换层析利用各蛋白质电荷量及性质不同进行分离。凝胶过滤又称分子筛层析利用各蛋白质分子大小不同分离。五超速离心•超速离心法不同蛋白质密度与形。

7、色氨酸对甲基苯甲醛丙酮溶液蓝紫色二肽肽键是由个氨基酸羧基与另个氨基酸氨基脱水缩合而形成化学键。肽肽键•多肽链多个通过肽键相连而成多聚体。•二肽•三肽•寡肽•氨基酸残基•肽链中氨基酸分子因脱水缩合而稍有残缺,称为氨基酸残基。•氨基末端和羧基末端通常在多肽链端含有个游离氨基,称为氨基端或端在另端含有个游离羧基,称为羧基端或端。氨基酸顺序是从端氨基酸残基开始,以端氨基酸残基为终点排列顺序。如上述五肽可表示为•主链和侧链多肽链多肽链•蛋白质与多肽界线•胰岛素为蛋白质•胰岛素为多肽二几种生物活性肽谷胱甘肽,结构•谷氨酸半胱氨酸和甘氨酸组成三肽•谷氨酸羧基形成肽键•为活性基团•为酸性肽•是体内重要还原剂过氧化物酶还原酶主要功能作为还原剂,保护蛋白质或酶巯基免遭氧化。作为还原剂,清除体内。保护核酸和蛋白质免遭毒物损害。•肽类激素化学本质是。

8、苯甲酸蛋白质结构与功能第章•第节蛋白质分子组成•第二节蛋白质分子结构•第三节蛋白质结构与功能•第四节蛋白质理化性质与分离提纯蛋白质是由许多氨基酸通过肽键相连形成高分子含氮化合物。蛋白质是生命活动物质基础,是含量最丰富生物大分子,具有多种生物学功能,称为功能大分子。蛋白质生物学重要性蛋白质是各组织主要有机成分,干重,般组织含。蛋白质具有重要生物学功能催化功能酶载运功能膜蛋白血红蛋白运动功能鞭毛肌肉蛋白防御功能免疫球蛋白调控功能激素生物活性肽结构功能皮毛骨牙细胞骨架神经传导构成神经递质乙酰胆碱五羟色氨。氧化供能蛋白质分子组成第节蛋白质元素组成主要有和。有些蛋白质含有少量或金属元素,个别蛋白质还含有。蛋白质含氮量平均为。•通过样品含氮量计算蛋白质含量公式蛋白质含量含氮量蛋白质元素组成特点氨基酸蛋白质基本组成单位存在自然界中氨基酸有余种,但组。

9、肽或多肽激素。如促甲状腺素释放激素肽类激素及神经肽神经肽在神经传导过程中起信号转导作用肽类。脑啡肽肽强啡肽肽内啡肽肽三蛋白质分类根据蛋白质组成成分单纯蛋白质氨基酸如清蛋白球蛋白结合蛋白质蛋白质部分非蛋白质部分称为辅基•辅基结合蛋白质中非蛋白部分,绝大部分辅基是通过共价键与蛋白部分相连,辅基与蛋白质功能密切相关。包括糖脂核酸磷酸色素和金属离子等。•根据蛋白质形状•球状蛋白质分子长轴短轴,难溶于水。如胶原蛋白,多作为结构蛋白蛋白质分子结构第二节蛋白质分子结构包括级结构二级结构三级结构四级结构高级结构定义蛋白质级结构指多肽链中氨基酸排列顺序。蛋白质级结构主要化学键肽键二硫键级结构是由遗传信息决定。级结构是蛋白质空间结构基础级结构是蛋白质空间构象和特异生物学功能基础。胰岛素级结构二蛋白质二级结构蛋白质分子中段肽链局部空间结构,即该段肽链主。

10、氨基酸残基组成测定多肽链端与端氨基酸残基把肽链水解成片段,分别进行分析测定各肽段氨基酸排列顺序,般采用降解法经过组合排列对比,最终得出完整肽链中氨基酸顺序结果。改进法水解肽链方法及特征裂解剂裂解位点胰蛋白酶胰凝乳蛋白酶弹性蛋白酶胃蛋白酶溴化氰羟胺通过核酸推演方法按照三联密码原则推演出氨基酸序列分离编码蛋白质基因测定序列排列出序列负电荷时,溶液值称为该氨基酸等电点。两性解离及等电点•氨基酸等电点确定•氨基酸等电点可由其分子上解离基团解离常数来确定。净电荷正离子两性离子负离子等电点侧链不含离解基团中性氨基酸,对于侧链含有可解离基团氨基酸,其值也决定于两性离子两边值算术平均值。酸性氨基酸碱性氨基酸与茚三酮反应定性和定量测定方法与甲醛反应测定游离氨基量。桑格反应端测定方法艾德曼反应端测定方法与荧光胺反应含量测定方法与,双硫基双硝基。

11、体蛋白质氨基酸仅有种,且均属氨基酸甘氨酸除外。甘氨酸丙氨酸氨基酸通式什么是氨基酸,型氨基酸氨基酸氨基酸氨基酸型型非极性疏水性氨基酸极性中性氨基酸酸性氨基酸碱性氨基酸氨基酸分类按侧链基团性质非极性疏水性氨基酸•含有非极性侧链,具有疏水性除外•种类非极性疏水性氨基酸甘氨酸丙氨酸缬氨酸亮氨酸异亮氨酸苯丙氨酸脯氨酸极性中性氨基酸•侧链含有或等极性基团,具有亲水性,但在中性水溶液中不电离。•种类极性中性氨基酸色氨酸丝氨酸酪氨酸半胱氨酸蛋氨酸天冬酰胺谷氨酰胺苏氨酸•酸性氨基酸•侧链含有,易解离出,具有酸性。•种类•碱性氨基酸•侧链带有易接受基团而具有碱性。如ε胍基和咪唑基。•种类酸性氨基酸碱性氨基酸天冬氨酸谷氨酸精氨酸赖氨酸组氨酸习惯分类方法芳香族氨基酸含羟基氨基酸含硫氨基酸杂环族氨基酸杂环族亚氨基酸支链氨基酸几种特殊氨基酸无手性碳原子。为环状亚氨。

12、态各不相同,在离心力场中沉降速度也不同,从而将其分离。•既可以用来分离纯化蛋白质也可以用作测定蛋白质分子量。蛋白质在离心场中行为用沉降系数,表示,沉降系数与蛋白质密度和形状相关。•大体上与蛋白质分子量呈正比关系。•与蛋白质密度和形状有关。•如分子量相同,紧密颗粒摩擦系数小沉降快而疏松颗粒摩擦系数大沉降慢。•应用蛋白质分离纯化和测分子量。复习题•名词解释•肽单元二三四级结构•蛋白质基本组成单位是什么有多少种按侧链结构和功能不同,可分为几类各包括哪些氨基酸•蛋白质二级结构有几种各有何特征,由什么化学键维持•什么是蛋白质变性变性因素有哪些变性本质是什么变形后有什么改变•何为蛋白质等电点当时,蛋白质带何种电荷当时,蛋白质带何种电荷•蛋白质分离纯化有几种方法根据是什么•维持蛋白质三四级结构化学键有哪些哪种最重要三多肽链中氨基酸序列分析分析已纯化蛋白。

参考资料:

[1]地面电工培训课件 92页(定稿)(第92页,发表于2022-06-25)

[2]低压高压与天气系统(第25页,发表于2022-06-25)

[3]永远的旗帜党课培训PPT课件(第45页,发表于2022-06-25)

[4]《我做了一项小实验》PPT课件(精版) 编号51(第16页,发表于2022-06-25)

[5]单层厂房屋面(第36页,发表于2022-06-25)

[6]贷款贴息或补助专项资金培训课件(第41页,发表于2022-06-25)

[7]大学语文应用写作(第127页,发表于2022-06-25)

[8]大学物理实验基础理论(第57页,发表于2022-06-25)

[9]大学生生活规划课件(第61页,发表于2022-06-25)

[10]大型变电站地网测试技术培训教材(第54页,发表于2022-06-25)

[11]大气的压强(第42页,发表于2022-06-25)

[12]打火机材料与加工工艺(第32页,发表于2022-06-25)

[13]聪明的工作比努力工作更重要__经理人领导之道(第50页,发表于2022-06-25)

[14]从永磁体谈起(第33页,发表于2022-06-25)

[15]磁场对电流的作用(第20页,发表于2022-06-25)

[16]创伤性休克救治(第110页,发表于2022-06-25)

[17]串并联电路中电压的规律(第28页,发表于2022-06-25)

[18]串、并联电路电压的规律(第23页,发表于2022-06-25)

[19]处方书写培训课件(第52页,发表于2022-06-25)

[20]初中物理探究物质的密度(第36页,发表于2022-06-25)

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