1、和可疑菌落按作证实试验。证实试验。用接种环从平板上挑取个不同类型的典型或可疑菌落,移种于肉汤管内,培养后观察产气情况。对肉汤产气者按计算对形成犛犖犜菌膜的阳性管则应进行革兰氏染色,以便排除革兰氏阳性杆菌。将中证实为大肠菌群阳性的菌落数相加,再乘以稀释倍数,按报告结果。滤膜犕犝犌法以无菌操作将样品过滤后的滤膜高压灭菌。最终。犃犆狅犾狌犿犫犻犪犕犝犌琼脂培养基胰酪胨水解蛋白酵母浸膏牛肉浸膏可溶性淀粉氯化钠琼脂蒸馏水将各成分溶于水中,无需调值。高压灭菌。冷却至,倾注平板。犃蛋白胨吐温稀释液犘犜蛋白胨吐温蒸馏水将上述成分加热溶解分装于角瓶中,高压灭菌。犛犖犜犃乳糖莫能霉素葡萄。

2、霉素于酒精溶解苯胺蓝葡萄糖醛酸钠盐硫酸十烷基钠盐琼脂蒸馏水无需高压灭菌。加热煮沸,温度冷至无菌操作,调整最终为。倾注平板,打开取培养物至试管中,加萘酚乙醇溶液,氢氧化钾溶液和少许肌酸结晶,振摇试管后静置,如出现伊红色,为试验阳性。将培养物的剩余部分继续培养后滴加滴甲基红溶液,如培养物变红则表示甲基红试验阳性若变黄则甲基红试验阴性。见附录。蛋白胨吐温稀释液见附录。乳糖莫能菌素葡萄糖酸琼脂见附录。缓冲琼脂见附录。羟甲基胺甲烷缓冲剂见附录。营养琼脂斜面见附录。色氨酸肉汤见附录。培养基见附录。氏枸椽酸盐肉汤见附录。氏靛基质试剂见附录。甲进出口食品中大肠菌群粪大肠菌群和大。

3、,使培养基与样液充分混匀。待琼脂凝固后,再加的胰胨或胰酪胨于蒸馏水中。分装试管,每管。高压灭菌。最终。犃犕犚犞犘培养基胨葡萄糖磷酸氢钾蒸馏水将各成分溶于蒸馏水中,分装试管,高压灭菌,最终。胰蛋白酶贮存液见附录。设备与材料培养箱,。水浴箱,。犛犖犜冰箱和。均质器涡旋式或拍击式。吸管,具刻度和,具刻度。平皿直径。试管。稀释瓶角烧瓶广口瓶或其他适宜的容器。玻璃小倒管长度约。天平感量。显微镜。菌落计数器。匀覆盖于平板表层,凝固后翻转平皿,培养。选取菌落数在个个之间的平板,计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。典型大肠菌群菌落为紫红色,菌落周围有红色的胆盐沉淀环,菌落直径约或更大。典。

4、为保证培养基的质量,应按和进行培养基的制备与性能测试。若使用商售的脱水合成培养基,应选用通过质量体系认证的国内外生产厂商的产品并按其说明进行制备和使用。犃生理盐水氯化钠蒸馏水将氯化钠溶于蒸馏水中,高压灭菌。犃犅狌狋狋犲狉犳犻犲犾犱氏磷酸盐缓冲稀释液犃贮存液磷酸氢钾蒸馏水菌。最终。犃犆狅犾狌犿犫犻犪犕犝犌琼脂培养基胰酪胨水解蛋白酵母浸膏牛肉浸膏可溶性淀粉氯化钠琼脂蒸馏水将各成分溶于水中,无需调值。高压灭菌。冷却至,倾注平板。犃蛋白胨吐温稀释液犘犜蛋白胨吐温蒸馏水将上述成分加热溶解分装于角瓶中,高压灭菌。犛犖犜犃乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂犔犕犌胰蛋白胨蛋白胨酵母膏乳糖莫能。

5、品中大肠菌群大肠杆菌计数滤膜法。本标准与和相比,主要技术变化如下将原标准名称出口食品中大肠菌群粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法出口食品中大肠杆菌葡萄糖苷酶荧光检验方法和进出口食品中大肠菌群如肉汤管有产气,则按作证实试验。证实试验。用直径的接种环从中所有和内发酵产气的肉汤管中分别挑取培养液环,分别移种于煌绿乳糖胆盐肉汤管中,于培养,记录所有肉汤管的产气管数,根据肉汤的产气管数查表见附录并按报告结果。平板计数法从中选取适宜的个连续稀释度的样品稀释液,每个稀释度接种两个灭菌平皿,每皿。另取稀释剂加入灭菌平皿中,作空白对照。将冷至的结晶紫中性红胆盐琼脂约倾注于每个平皿中,小心旋转平皿。

6、醛酸琼脂犔犕犌胰蛋白胨蛋白胨酵母膏乳糖莫能霉素于酒精溶解苯胺蓝葡萄糖醛酸钠盐硫酸十烷基钠盐琼脂蒸馏水无需高压灭菌。加热煮沸,温度冷至无菌操作,调整最终为。倾注平到,用棉花过滤后,分装到试管管内有倒立的小发酵管中,每管。高压灭菌。最终。犃犈犆肉汤胰蛋白胨或胰酪胨号胆盐或混合胆盐乳糖磷酸氢钾磷酸氢钾氯化钠蒸馏水将以上成分溶解于蒸馏水中,分装试管管内有倒立的小发酵管,每管。高压灭菌,最终。犃伊红美蓝琼脂犈犕犅蛋白胨乳糖磷酸氢钾琼脂伊红水溶性或水溶液美蓝或水溶液蒸馏水在蒸馏水中煮沸溶解蛋白胨磷酸盐和琼脂,加水补足至原量。分装于角烧瓶中。每瓶或,高压灭菌。最终杆菌的检验。规范性引用。

7、杆菌检测方法.肠杆菌计数滤膜法整合修订为进出口食品中大肠菌群粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法标准的范围不变,但和标准的范围有限,因此,本标准将范围进行整合修订增加了规范性引用文件增加了术语和定义在设备和材料中删掉了乳钵和研棒,稀释瓶中增加了其他适宜的容器对液体样品法的检测修订为液体样品接种量以上者,用双料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤接种量及以下者,则用单料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤平板计数法中删去了计算公式值表增加了置信区间。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫放于预先干燥的琼脂平板表面上,滤膜与琼脂表面之间应无气泡。于培养。

8、况。对肉汤产气者按计算对形成犛犖犜菌膜的阳性管则应进行革兰氏染色,以便排除革兰氏阳性杆菌。将中证实为大肠菌群阳性的菌落数相加,再乘以稀释倍数,按报告结果。滤膜犕犝犌法以无菌操作将样品过滤后的滤膜肠杆菌计数滤膜法整合修订为进出口食品中大肠菌群粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法标准的范围不变,但和标准的范围有限,因此,本标准将范围进行整合修订增加了规范性引用文件增加了术语和定义在设备和材料中删掉了乳钵和研棒,稀释瓶中增加了其他适宜的容器对液体样品法的检测修订为液体样品接种量以上者,用双料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤接种量及以下者,则用单料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤平板计数法中删去了计算公。

9、后,选取菌落数在个个之间的平板,计数所有蓝色包括深蓝或浅蓝色菌落。将滤膜上的菌落数相加,再乘以其稀释倍数,按报告结果。粪大肠菌群犕犘犖法的测定用直径为的接种环从中所有内发酵产气的肉汤管中分别挑取培养液环,转种于肉汤管中并放置于带盖的恒温水浴箱内,培养。水浴箱的水平面应高于肉汤培养基液面。记录肉汤管的产气情况,产气管为粪大肠菌群阳性不产气为粪大肠菌群阴性。根据粪大肠菌群的阳性管数查表见附发布实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布书书书前言本标准按照给出的规则起草。本标准代替出口食品中大肠菌群粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法出口食品中大肠杆菌葡萄糖苷酶荧光检验方法和进出口。

10、挑取培养液划线接种于伊红美蓝平板,培养。检查检查平板上有无黑色中心有光泽或无光泽的可疑菌落。用接种针蘸取菌落中心部位并转种于营养琼脂斜面上,培养。试验将营养琼脂斜面培养物转种于下列生化培养基中进行试验。色氨酸肉汤培养后,加氏试剂,上层出现红色者为靛基质试验阳性。培养基培养后,无菌操作匀覆盖于平板表层,凝固后翻转平皿,培养。选取菌落数在个个之间的平板,计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。典型大肠菌群菌落为紫红色,菌落周围有红色的胆盐沉淀环,菌落直径约或更大。典型和可疑菌落按作证实试验。证实试验。用接种环从平板上挑取个不同类型的典型或可疑菌落,移种于肉汤管内,培养后观察产气情。

11、值表增加了置信区间。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫汤胰蛋白胨或胰酪胨氯化钠乳糖磷酸氢钾磷酸氢钾月桂基硫酸钠蒸馏水将各成分溶于蒸馏水中,分装试管内装倒立小发酵管,每管。进出口食品中大肠菌群粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法。书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准代替和进出口食品中大肠菌群粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法进出口食品中大肠菌群粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法.。使用前将琼脂融化,于每琼脂中加灭菌的乳糖水溶液伊红水溶液和美蓝水溶液,摇匀,冷至倾注平皿。犃结晶紫中性红胆盐琼脂犞犚犅犃蛋白胨酵母膏犛犖犜乳糖氯化钠胆。

12、文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本包括所有的修改单适用于本文件。培养基制备指南第部分实验室培养基制备质量保证通则培养基制备指南第部分培养基性能测试实用指南术语和定义下列术语和定义适用于本文件。大肠菌群犮狅犾犻犳狅狉犿需氧及兼性厌氧,能在分解乳糖产酸产气的群革兰氏阴性无芽孢杆菌。粪大肠菌群犳犲犮犪犾犮狅犾犻犳狅狉犿需氧及兼性厌氧,能在,发酵乳糖产酸产气的群革兰氏阴性无芽孢杆菌,该菌又可称耐热大肠菌群录并按报告结果。大肠杆菌的测定犕犘犖法培养将中肉汤管在恒温水浴箱内继续培养后,从产气管。

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