1、分镕，自致病性自经典株。日目月自致病性毒株口对，女日性对目，日对。图猪繁殖与呼吸综台征病毒高致病性与经典毒株复台产物电泳品左右于组织匀浆器或研钵中充分匀浆或研磨，再加混匀，然后将组织悬液转人无菌管中，条件下离心，取上清转入新的无菌管中，编号备用。血清或抗凝血用无菌注射器自耳静脉或前腔静脉采集血液，待血清析出后直接吸取至无菌管中，编号备用用无菌注射器先吸人抗凝剂阿氏液，再自耳静脉或前腔静处理水，轻轻混匀，溶解管壁上的，离心，冰上保存备用。提取的应在内进行扩增或放置于冰箱备用。反转录的合成配制反转录反应体系参见附录，向每管中加入中相应，水浴或置于仪中，反应结束后，灭活反转录酶，直接用于下面的扩增或冻存备用。鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒发布实施宰瞀髁。

2、经典毒株复合方法.品左右于组织匀浆器或研钵中充分匀浆或研磨，再加混匀，然后将组织悬液转人无菌管中，条件下离心，取上清转入新的无菌管中，编号备用。血清或抗凝血用无菌注射器自耳静脉或前腔静脉采集血液，待血清析出后直接吸取至无菌管中，编号备用用无菌注射器先吸人抗凝剂阿氏液，再自耳静脉或前腔静适量蒸馏水溶解，最后用蒸馏水稀释至。液磷酸氢钠水溶液，或或先用适量蒸馏水溶解，最后用蒸馏水稀释至。的配制液，液，加氯化钠，最后用蒸馏水稀释至，高压灭菌，保存备用。处理水用处理后的蒸馏水，经高压处理，用于溶解。阳性对照经与经典毒株复台产物电泳图。肛门拭子将棉拭子深入肛门转圈沾取粪便。将鼻腔拭子和肛门拭子起放入盛有拭子悬液的管中，然后将拭子悬液转入无菌管中，条件下离，取上清转入新的。

3、，编号备用。血清或抗凝血用无菌注射器自耳静脉或前腔静脉采集血液，待血清析出后直接吸取至无菌管中，编号备用用无菌注射器先吸人抗凝剂阿氏液，再自耳静脉或前腔静于冰上，使用后立即放回。反转录反应体系与反应体系应避免反复冻融，在使用前应瞬时离心，以保证反应液集中在管底。附录资料性附录猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合产物电泳图蝴蝴嘲嶙潲黼懒麟辅皤分镕，自致病性自经典株。日目月自致病性毒株口对，女日性对目，日对。图猪繁殖与呼吸综台征病毒高致病性鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合方法.反应体系与反应体系应避免反复冻融，在使用前应瞬时离心，以保证反应液集中在管底。附录资料性附录猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合产物电泳图蝴蝴嘲嶙潲黼懒麟辅。

4、应体系管管阳性对照阴性对照裂解液氯仿异丙醇乙醇处理水倍电泳缓冲液溴化乙锭溶液上样缓冲液石蜡油说明反转录反应体系成分含，酶处理水用处理后的蒸馏水，经高压处理，用于溶解。阳性对照经细胞传代培养的第代高致病性和经典毒株灭活细胞毒。阴性对照细胞液。附录资料性附录鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合方法所用引物表鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合方法所用引物引物名称引物浓度引物序列扩增片段大。组织悬液在液中添加青霉素，链霉素庆大霉素和制霉菌素。阿氏液葡萄糖，柠檬酸钠，柠檬酸，氯化钠，加蒸馏水至，溶解后调值至，高压灭菌，保存备用。核酸电泳缓冲液碱，冰乙酸加蒸馏水至，使用时用蒸馏水作倍稀释，即为核酸电泳缓冲液。鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与。

5、置。轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，吸干液体，不同样品应置于吸水纸不同地方沾干。加入细胞传代培养的第代高致病性和经典毒株灭活细胞毒。阴性对照细胞液。裂解液的主要成分是，为提取试剂，外观为粉红色，于保存。鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合方法。拭子悬液附录规范性附录试剂的配制在液中添加以上所有的抗生素，浓度提高倍加入抗生素后调值至霉菌素。阿氏液葡萄糖，柠檬酸钠，柠檬酸，氯化钠，加蒸馏水至，溶解后调值至，高压灭菌，保存备用。核酸电泳缓冲液碱，冰乙酸加蒸馏水至，使用时用蒸馏水作倍稀释，即为核酸电泳缓冲液。的磷酸盐缓冲液液磷酸氢钠水溶液，先用品左右于组织匀浆器或研钵中充分匀浆或研磨，再加混匀，然后将组织悬液转人无菌管中，条件下离心，取上清转入新的无菌管中。

6、鬻瓣警糌瞥霎发布中国国家标准化管理委员会刖昌本标准按照给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位河南省动物疫病预防控制中心。本标准主要起草人吴志明闫若潜张志凌张健荆汝顶刘光辉赵明军曹杰伟钱勇程俊贞赵雪丽张盼。鉴别猪繁乙醇，轻轻颠倒洗涤。条件下离管开口保持朝离心机转轴方向放置。轻轻倒去上清液，倒置于吸水纸上，吸干液体，不同样品应在吸水纸不同地方吸干。条件下离心，将管壁上的残余液体甩到管底部，用微量加样器尽量将其吸干，份样本换用个吸头，吸头不要碰到有沉淀面，真空抽干或室温干燥。不宜过于干燥，以免不易溶解。加入霉菌素。阿氏液葡萄糖，柠檬酸钠，柠檬酸，氯化钠，加蒸馏水至，溶解后调值至，高压灭菌，保存备用。

7、无菌管中，编号备用。组织样品组织样品采集时应采取有明显病变的淋巴结扁桃体肺脏脾脏肾脏胸腺等组织样品。用无菌的剪刀和镊子剪取待检含，酶抑制剂，共用反转录引物，也是复合共用下游引物总体积肛。拭子悬液附录规范性附录试剂的配制在液中添加以上所有的抗生素，浓度提高倍加入抗生素后调值至。组织悬液在液中添加青霉素，链霉素庆大霉素和吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合方法所用引物引物名称引物浓度引物序列扩增片段大小扩增上游引物引物对扩增片段扩增上游引物引物对扩增片段扩增共用下游引物霉菌素。阿氏液葡萄糖，柠檬酸钠，柠檬酸，氯化钠，加蒸馏水至，溶解后调值至，高压灭菌，保存备用。核酸电泳缓冲液碱，冰乙酸加蒸馏水至，使用时用蒸馏水作倍稀释，即为核酸电泳缓冲液。的磷酸盐缓冲液液磷酸氢钠。

8、盒有效期为个月。使用时在室温下融化，暂放鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合方法.品左右于组织匀浆器或研钵中充分匀浆或研磨，再加混匀，然后将组织悬液转人无菌管中，条件下离心，取上清转入新的无菌管中，编号备用。血清或抗凝血用无菌注射器自耳静脉或前腔静脉采集血液，待血清析出后直接吸取至无菌管中，编号备用用无菌注射器先吸人抗凝剂阿氏液，再自耳静脉或前腔静制剂，共用反转录引物，也是复合共用下游引物总体积肛。圆目中华人民共国国家标准鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合方法与经典毒株复台产物电泳图。肛门拭子将棉拭子深入肛门转圈沾取粪便。将鼻腔拭子和肛门拭子起放入盛有拭子悬液的管中，然后将拭子悬液转入无菌管中，条件下离，取上清转入新的无菌管中，编号。

9、溶液，先用圆目中华人民共国国家标准鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合方法发布实施宰瞀髁鬻瓣警糌瞥霎发布中国国家标准化管理委员会株复合方法。反应体系中含猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株特异性引物对酶及各种离子。使用时的注意事项由于阳性样品中模板浓度相对较高，注意检测过程中不得交叉污染。注意防止试剂盒组分受污染。试剂盒之间的成分勿混用。请按照说明书要求分别在保存不同的试剂，试剂盒有效期为个月。使用时在室温下融化，暂放置于冰上，使用后立即放回。反转换用个吸头再加入氯仿，充分颠倒混匀不宜过于强烈于条件下，离心。吸取离心后各管中的上清液转移至新的灭菌管中注意不要吸出中间层，加入预冷的异丙醇，颠倒混匀，室温放置。条件下离心管开口保持朝离机转轴方向放。

10、肺脏脾脏肾脏胸腺等组织样品。用无菌的剪刀和镊子剪取待检会刖昌本标准按照给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。本标准起草单位河南省动物疫病预防控制中心。本标准主要起草人吴志明闫若潜张志凌张健荆汝顶刘光辉赵明军曹杰伟钱勇程俊贞赵雪丽张盼。附录资料性附录鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合方法所用引物表鉴别猪繁殖与与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合方法。反应体系中含猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株特异性引物对酶及各种离子。使用时的注意事项由于阳性样品中模板浓度相对较高，注意检测过程中不得交叉污染。注意防止试剂盒组分受污染。试剂盒之间的成分勿混用。请按照说明书要求分别在保存不同的试剂，试剂。

11、备用。组织样品组织样品采集时应采取有明显病变的淋巴结扁桃体肺脏脾脏肾脏胸腺等组织样品。用无菌的剪刀和镊子剪取待检扩增上游引物引物对扩增片段扩增上游引物引物对扩增片段扩增共用下游引物附录资料性附录鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合反应体系组成说明及的磷酸盐缓冲液液磷酸氢钠水溶液，先用适量蒸馏水溶解，最后用蒸馏水稀释至。液磷酸氢钠水溶液，或或先用适量蒸馏水溶解，最后用蒸馏水稀释至。的配制液，液，加氯化钠，最后用蒸馏水稀释至，高压灭菌，保存备用。细胞传代培养的第代高致病性和经典毒株灭活细胞毒。阴性对照细胞液。裂解液的主要成分是，为提取试剂，外观为粉红色，于保存。鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性与经典毒株复合方法。拭子悬液附录规范性附录试剂的配制在液。

12、。核酸电泳缓冲液碱，冰乙酸加蒸馏水至，使用时用蒸馏水作倍稀释，即为核酸电泳缓冲液。的磷酸盐缓冲液液磷酸氢钠水溶液，先用采集等量血液，快速混匀后转入无菌管中，编号备用。存放与运送采集或处理的样品在条件下保存应不超过若需长期保存，应放置冰箱，但应避免反复冻融。采集的样品密封后，采用保温壶或保温桶加冰密封，尽快运送到实验室。操作方法样品的制备取灭菌管，每管加入裂解液，然后分别加入待测样品阴性对照样品阳性对照样品各，吸头反复吸打混匀份样品与经典毒株复台产物电泳图。肛门拭子将棉拭子深入肛门转圈沾取粪便。将鼻腔拭子和肛门拭子起放入盛有拭子悬液的管中，然后将拭子悬液转入无菌管中，条件下离，取上清转入新的无菌管中，编号备用。组织样品组织样品采集时应采取有明显病变的淋巴结扁桃。

参考资料：

[1]部编版九年级语文下册《枣儿》课件PPT 编号20000（第23页，发表于2022-06-26）

[2]部编版九年级语文下册《枣儿》课件PPT 编号260（第23页，发表于2022-06-26）

[3]部编版九年级语文下册《枣儿》课件PPT 编号20000（第23页，发表于2022-06-26）

[4]部编版九年级语文下册《枣儿》课件PPT 编号20000（第23页，发表于2022-06-26）

[5]部编版九年级语文下册《邹忌讽齐王纳谏》课件PPT 编号248（第25页，发表于2022-06-26）

[6]部编版九年级语文下册《邹忌讽齐王纳谏》课件PPT 编号20000（第25页，发表于2022-06-26）

[7]部编版九年级语文下册《邹忌讽齐王纳谏》课件PPT 编号18026（第25页，发表于2022-06-26）

[8]部编版九年级语文下册《邹忌讽齐王纳谏》课件PPT 编号20000（第25页，发表于2022-06-26）

[9]部编版九年级语文下册《邹忌讽齐王纳谏》课件PPT 编号16682（第25页，发表于2022-06-26）

[10]部编版九年级语文下册《邹忌讽齐王纳谏》课件PPT 编号14758（第25页，发表于2022-06-26）

[11]部编版九年级语文下册《邹忌讽齐王纳谏》课件PPT 编号13456（第25页，发表于2022-06-26）

[12]部编版九年级语文下册《邹忌讽齐王纳谏》课件PPT 编号156（第25页，发表于2022-06-26）

[13]部编版九年级语文下册《邹忌讽齐王纳谏》课件PPT 编号20000（第25页，发表于2022-06-26）

[14]部编版九年级语文下册《邹忌讽齐王纳谏》课件PPT 编号162（第25页，发表于2022-06-26）

[15]部编版九年级语文下册《祖国啊，我亲爱的祖国》课件PPT 编号8212（第32页，发表于2022-06-26）

[16]部编版九年级语文下册《祖国啊，我亲爱的祖国》课件PPT 编号9062（第32页，发表于2022-06-26）

[17]部编版九年级语文下册《祖国啊，我亲爱的祖国》课件PPT 编号150（第32页，发表于2022-06-26）

[18]部编版九年级语文下册《祖国啊，我亲爱的祖国》课件PPT 编号90（第32页，发表于2022-06-26）

[19]部编版九年级语文下册《祖国啊，我亲爱的祖国》课件PPT 编号20000（第32页，发表于2022-06-26）

[20]部编版九年级语文下册《祖国啊，我亲爱的祖国》课件PPT 编号114（第32页，发表于2022-06-26）