1、乙酸环介导恒温核酸扩增聚乙醇辛基苯基醚犛犖犜技术概要根据小肠结肠炎耶尔森氏菌属特有的靶序列间区序列参见附录设计的两对特殊的内外引物,特异性识别靶序列上的个独立区域,利用脱氧核糖核酸脱氧核苷磷酸乙胺乙酸环介导恒温核酸扩增聚乙醇辛基苯基醚犛犖犜技术概要根据小肠结肠炎耶。
2、直接取该增菌液加到无菌离心管中,犵离心,尽量吸弃上清液加入,混匀后沸水浴,置冰上犵离心,上清液即为模板取上清液置可保存个月备用。可疑菌落模板犇犖犃的制备对于分离到的可疑菌落,可直接挑取出口食品中致病菌环介导恒温扩增检测方法第部分小肠结肠炎耶尔森氏菌。模板犇犖犃提取增菌液模板。
3、的条件下待检样品反应管液体呈绿色,该样品结果为小肠结肠炎耶尔森氏菌初筛阳性,对样品的增菌液或外引物扩增片段长度。外引物,外引物,内引物,内引物,犅狊狋聚合酶提取试剂细菌基因组提取试剂盒。表小肠结肠炎耶尔森氏菌犔犃犕犘反应体系组分工作液浓度脱氧核糖核酸脱氧核苷磷酸乙胺。
4、菌株接种于营养肉汤中培养过夜,用无菌生理盐水稀释至约约麦氏浊度,按提取模板作为扩增犔犃犕犘检测方法第部分小肠结肠炎耶尔森氏菌范围的本部分规定了检测出口食品中小肠结肠炎耶尔森氏菌的环介导恒温核酸扩增法。模板犇犖犃提取增菌液模板犇犖犃的制备对于获得的增菌液,采用如下方法制备模板。
5、代替模板。阳性对照制备将小肠结肠炎耶尔森氏菌标准菌株接种于营养肉汤中培养过夜,用无菌生理盐水稀释至约约麦氏浊度,按提取模板作为反应的模板。结果观察在上述反应管中加入显色液,轻轻混匀并在黑色背景下观察。结果判定和报告在空白对照和阴性对照反应管液体为橙色,阳性对照反应管液体呈绿。
6、尔森氏菌属特有的靶序列间区序列参见附录设计的两对特殊的内外引物,特异性识别靶序列上的个独立区域,利注阴影所示部分为小肠结肠炎耶尔森氏菌靶基因序列。犃组成引物中碱基构成犛犖犜。.注阴影所示部分为小肠结肠炎耶尔森氏菌靶基因序列。犃组成引物中碱基构成犛犖犜。.出口食品中致病菌环。
7、犇犖犃的制备对于获得的增菌液,采用如下方法制备模板直接取该增菌液加到无菌离心管中,犵离心,尽量吸弃上清液加入,混匀后沸水浴,置冰上犵离心,上清液即为模板取上清液置可保存个月备用。可疑菌落模板犇犖犃的制备对于分离到的可疑菌落,可直接挑取可疑菌落,再按照步骤制备模板以待检测。采。
8、内引物,内引注阴影所示部分为小肠结肠炎耶尔森氏菌靶基因序列。犃组成引物中碱基构成犛犖犜。.出口食品中致病菌环介导恒温扩增检测方法第部分小肠结肠炎耶尔森氏菌。外引物扩增片段长度。外引物,外引物,引物。阳性对照小肠结肠炎耶尔森氏菌标准菌株,或含目的片段的亦可。塑料离心管。仪。
9、.出口食品中致病菌环介导恒温扩增检测方法第部分小肠结肠炎耶尔森氏菌.注阴影所示部分为小肠结肠炎耶尔森氏菌靶基因序列。犃组成引物中碱基构成犛犖犜。.出口食品中致病菌环介导恒温扩增检测方法第部分小肠结肠炎耶尔森氏菌。外引物扩增片段长度。外引物,外引物,模板。阴性对照以缓冲液。
10、出的焦磷酸根离子与反应溶液中的结合,产生副产物焦磷酸镁形成乳白色沉淀,加入显色液,即可通过颜色变化观察判定结果。试剂和材料除有特殊说明外,所有实验用试剂均为分析纯实验用水符合中级水的要求。引物根据小肠结肠炎耶尔森氏菌特有的靶序列间区序列设计套特异性引物,包括外引物,外引物。
11、器和设备移液器量程量程量程。高速台式离心机犵。.出口食品中致病菌环介导恒温扩增检测方法第部分小肠结肠炎耶尔森氏菌。缩略语下列缩略语适用于本文件。甘氨酸甲内盐犅狊狋酶犅狊狋犅狊狋聚合酶大片段小肠结肠炎耶尔森氏菌靶基因序列犃小肠结肠炎耶尔森氏菌靶基因序列犪犮犮犲狊狊犻狅狀狀狅犈。
12、导恒温扩增检测方法第部分小肠结肠炎耶尔森氏菌。外引物扩增片段长度。外引物,外引物,.出口食品中致病菌环介导恒温扩增检测方法第部分小肠结肠炎耶尔森氏菌.狊狋酶启动循环链置换反应,在间区序列启动互补链合成,在同链上互补序列周而复始形成有很多环的花椰菜结构的茎环混合物从析。
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