1、最后加乙酸乙准储备液，以下避光保存。标准工作液根据需要准确吸取适量的标准储备液，用乙腈稀释，配制成的标准工作液，避光保存。材料毒素免疫亲和柱柱规格或，柱容量，或等效柱。玻璃纤维滤纸直径，无荧光特性。仪器和设备高效液相色谱仪配有荧光检测器。高速粉碎机转速。均质器转速。氮吹仪。离心机。涡旋混合仪。空气压力泵。试验筛。天平。标准品毒素，号，纯度。或经国家认证并授予标准物质证书的标体积，单位为毫升滴加样液的体积，单位为毫升样液的总稀释倍数试样的称样量，单位为克。注测定结果保留小数点后位有效数字。直接法试样中毒素的含量按式计算式中试样中毒素的含量，单位为微克每千克从标准工作曲线上得到的样品中毒素含量，单位为纳克每毫升样品溶液的最终定容体积，单位为毫升单位换算常数样品溶。

2、准曲线求得，单位为纳克试样提取液的体积，单位为毫升滴加样液的体积，单位为毫升样液的总稀释倍数试样的称样量，单位为克。注测定结果保留小数点后位有效数字。精密度样品中毒素的含量在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的。其他方法检出限为，定量限为。第法直接法原理及依据直接，竞争温育后，在固相载体表面形成抗原抗体复合物。洗除多余抗体成分，然后加入酶标记的抗球蛋白的第抗体结合物，与吸附在固体表面的抗原抗体复合物相结合，再加入酶的底物。在酶的催化作用下，底物发生降解反应，产生有色产物，通过酶标仪，测出酶底物的降解量，从而推知被测试样中的抗原量。试剂和原料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为规定的级水。试剂甲醇。石油醚。氯甲烷。无水乙醇。。

3、毫升单位换算常数样品溶液所代表的最终试样质量，单位为克。注测定结果保留小数点后位有效数字。精密度样品中毒素的含量在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的。其他直接法的检出限为，定量限为。，定量限为。附录毒素标准物质的液相色谱图。注发射波长。毒素标准粉碎机。分析步骤提取直接法称取粉碎并通过目筛的试样，置具塞锥形烧瓶中，加水和氯甲烷无水乙醇∶，体积比，密塞，振荡，通过滤纸过滤，取滤液于蒸发皿中，置水浴上通风挥干。用石油醚分次溶解蒸发皿中残渣，洗入分液漏斗中，再用甲醇水∶，体积比分次洗涤，转入同分液漏斗中，静置约，收集下层甲醇水提取液过层析柱净化。将过柱后的洗脱液倒入蒸发皿中，并于水浴锅上浓缩至干，趁热加乙酸乙酯，加热至沸，挥干，再重复次。

4、分液漏斗中，再用甲醇水∶，体积比分次洗涤，转入同分液漏斗中，静置约，收集下层甲醇水提取液过层析柱净化。将过柱后的洗脱液倒入蒸发皿中，并于水浴锅上浓缩至干，趁热加乙酸乙酯，加热至沸，挥干，再重复次，最后加乙酸乙光度值得出试样中的毒素含量。试剂和原料除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为规定的级水。试剂甲醇。.食品安全国家标准食品中毒素的测定。注计算结果需扣除空白值，保留两位有效数字。精密度样品中毒素的含量在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的。其他本方法对粮食及粮食制品中毒素的检出限为，定量限为对酒类，酱油醋酱及酱制品中毒素的检出限为，定量限为含量，按式计算式中试样中毒素的含量，单位为微克每千克酶标板上所测得的毒素的量，根据标。

5、曲线求得，单位为纳克试样提取液的体积，单位为毫升滴加样液的体积，单位为毫升样液的总稀释倍数试样的称样量，单位为克。注测定结果保留小数点后位有效数字。直接法试样中毒素的含量按式计算式中试样中毒素的释，直至样品中毒素浓度在标准曲线范围以内。检测直接法用包被酶标板，每孔，过夜。酶标板用洗次，每次后，加入不同浓度的标准工作液制作标准曲线或试样提取液检测试样中的毒素含量与抗体酶结合物溶液∶，体积比的混合液∶，体积比，每孔，该混合液应于使用前的前天配好，过夜备用，置。酶标板洗次，每次后，加入底物溶液。每孔，。用硫酸溶液终止反应，每孔，于处测定吸光度值。直接法将测定需含量，单位为微克每千克从标准工作曲线上得到的样品中毒素含量，单位为纳克每毫升样品溶液的最终定容体积，单位为。

6、液所代表的最终试样质量，单位为克。注测定结果保留小数点后位有效数字。精密度样品中毒素的含.食品安全国家标准食品中毒素的测定。注计算结果需扣除空白值，保留两位有效数字。精密度样品中毒素的含量在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的。其他本方法对粮食及粮食制品中毒素的检出限为，定量限为对酒类，酱油醋酱及酱制品中毒素的检出限为，定量限为。第法间接法原理将已知抗原吸附在固相载体表面，洗除未吸附抗原，加入定量抗体与待测试样含有抗原提取液的混合含量，单位为微克每千克从标准工作曲线上得到的样品中毒素含量，单位为纳克每毫升样品溶液的最终定容体积，单位为毫升单位换算常数样品溶液所代表的最终试样质量，单位为克。注测定结果保留小数点后位有效数字。精密度样。

7、乙酸乙酯。甲基甲酰胺。甲基联苯胺.食品安全国家标准食品中毒素的测定.积比，每孔，该混合液应于使用前的前天配好，过夜备用，置。酶标板洗次，每次后，加入底物溶液。每孔，。用硫酸溶液终止反应，每孔，于处测定吸光度值。直接法将测定需用的微孔条插入微孔架，记录标准液和样液在微孔架上的位置。吸取毒素标准液浓度为和样液至各微孔。吸取毒素酶标记物至各微孔，均匀混合，依次加入毒素抗体，混合，以封口膜将微孔覆盖防止试液挥发，于避光孵育。倒出孔中液体，以蒸馏水反质的液相色谱图。碳酸钠。碳酸氢钠。磷酸氢钾。磷酸氢钠。氯化钠。氯化钾。柠檬酸。抗体杂交瘤细胞系产生的抗毒素的特异性单克隆抗体。抗原毒素与载体蛋白牛血清白蛋白的结合物。兔抗鼠免疫球蛋白与辣根过氧化酶的结合物酶标抗。试剂配制缓。

8、注所有玻璃器皿均用硫酸洗液浸泡，用水冲洗。酶标检测仪。酶标板孔或孔。电动振荡器。电热恒温水浴锅。天平，。均质积比，每孔，该混合液应于使用前的前天配好，过夜备用，置。酶标板洗次，每次后，加入底物溶液。每孔，。用硫酸溶液终止反应，每孔，于处测定吸光度值。直接法将测定需用的微孔条插入微孔架，记录标准液和样液在微孔架上的位置。吸取毒素标准液浓度为和样液至各微孔。吸取毒素酶标记物至各微孔，均匀混合，依次加入毒素抗体，混合，以封口膜将微孔覆盖防止试液挥发，于避光孵育。倒出孔中液体，以蒸馏水反稀释成适当浓度的标准工作液。材料毒素检测试剂盒包括包被有抗体的微孔条毒素标准液毒素酶标记物毒素抗体底物样品稀释液反应停止液。酶标板孔或孔。层析柱，尽量塞紧，敲平表面，敲紧。仪器和设备。

9、液系统。，加水稀释至。简称。配制方法为酸氢钾，加水至。，配制方法为，即称取柠檬酸，加水至，为甲液，加水至，为乙液，加水至即可器内，密封。，加入甲醇水∶，体积比，均质，离心。离心后取滤液加入样品稀释液，混匀。取进行酶联免疫测定，最后稀释倍数为。高浓度的样品，毒素含量如超出标准曲线范围，可进步稀释，直至样品中毒素浓度在标准曲线范围以内。检测直接法用包被酶标板，每孔，过夜。酶标板用洗次，每次后，加入不同浓度的标准工作液制作标准曲线或试样提取液检测试样中的毒素含量与抗体酶结合物溶液∶，体积比的混合液∶，波长处的吸光度值加入反应终止液后应在内读取吸光度。分析结果的表述直接法试样中毒素的含量按式计算式中试样中毒素的含量，单位为微克每千克酶标板上所测得的毒素的量，根据标准。

10、并于水浴锅上浓缩至干，趁热加乙酸乙酯，加热至沸，挥干，再重复次，最后加乙酸乙酯，冷至室温后转入浓缩瓶中。用适量乙酸乙酯洗涤蒸发皿，并入浓缩瓶中，将浓缩瓶置水浴锅上，挥干冷却后，用含甲醇的定容，供检测。直接法将样品按分法缩分至，全部磨碎至颗粒可通过目筛大小，混匀，均分成两份作为试样，分别装入清洁的容.食品安全国家标准食品中毒素的测定.物质。标准溶液配制标准储备液准确称取适量标准品，用乙腈溶解，配制成浓度为的标准储备液，以下保存。标准工作液根据需要，用含甲醇的或样品稀释液将标准储备液稀释成适当浓度的标准工作液。材料毒素检测试剂盒包括包被有抗体的微孔条毒素标准液毒素酶标记物毒素抗体底物样品稀释液反应停止液。酶标板孔或孔。层析柱，尽量塞紧，敲平表面，敲紧。仪器和设备。

11、注所有玻璃器皿均用硫酸洗液浸泡，用水冲洗。酶标检测仪。酶标板孔或孔。电动振荡器。电热恒温水浴锅。天平，。均质器。标准品毒素，号纯度，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。标准溶液配制标准储备液准确称取适量的毒素标准品，用乙腈溶解，配制成浓度为的试剂甲醇。石油醚。氯甲烷。无水乙醇。乙酸乙酯。甲基甲酰胺。甲基联苯胺。吐温。过氧化氢。碳酸钠。碳酸氢钠。磷酸氢钾。磷酸氢钠。氯化钠。氯化钾。柠檬酸。抗体杂交瘤细胞系产生的抗毒素的特异性单克隆抗体。抗原毒素与载体蛋白牛血清白蛋白的结合物。兔抗鼠免疫球蛋白与辣根过氧化酶的结合物酶标抗。试剂配制缓冲液系统。，加水稀释至量在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的。其他直接法的检出限为，定量限为。，。

12、品中毒素的含量在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的。其他直接法的检出限为，定量限为。，定量限为。附录毒素标准物质的液相色谱图。注发射波长。毒素标准积比，每孔，该混合液应于使用前的前天配好，过夜备用，置。酶标板洗次，每次后，加入底物溶液。每孔，。用硫酸溶液终止反应，每孔，于处测定吸光度值。直接法将测定需用的微孔条插入微孔架，记录标准液和样液在微孔架上的位置。吸取毒素标准液浓度为和样液至各微孔。吸取毒素酶标记物至各微孔，均匀混合，依次加入毒素抗体，混合，以封口膜将微孔覆盖防止试液挥发，于避光孵育。倒出孔中液体，以蒸馏水反甲醇水∶，体积比分次洗涤，转入同分液漏斗中，静置约，收集下层甲醇水提取液过层析柱净化。将过柱后的洗脱液倒入蒸发皿中。

参考资料：

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[16]渐变科技风神舟十二号载人航天飞船发射成功介绍PPT课件 编号7308（第23页，发表于2022-06-26）

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