1、不同浓度对食管癌细胞蛋白表达水平的影响无统计学差异对食管癌细胞蛋白表达水平的影响有统计学差异，。结论食管癌细胞在体外培养条件下均具有形成血管生成拟态的能力，不同来源的食管癌细胞，血管生成拟态形成能力不同。及机制研究全文。摘要目的通过体外培养对食管癌细胞血管生成拟态进行形态学研究，并探讨其可能的分子机制。方法体外培养食管癌细胞，观察其是否具有形成血管生成拟态的能力。体外培养细胞，分别用的通路抑制剂处理细胞，应用法检测对细胞增殖及形成血管生成拟态能力的影响。浓度对蛋。

2、组个复孔。所用检测的药物浓度为。对照组加入相同体积的培养液及凋亡等方面发挥重要的生物学作用，。因此，可通过检测的表达水平来评价的活化程度。有研究表明，被干扰后，食管癌细胞增殖速度明显减慢，细胞的迁移力显著下降，并增加细胞凋亡率。本研究发现，通路特异性抑制剂干预细胞后，蛋白水平表达显著下降，提示通路活性受抑制同时导致是由肿瘤细胞直接构成管道壁，其没有内皮细胞的屏障作用，可以为肿瘤的生长提供良好的血液供应，更利于肿瘤细胞的转移，。本研究发现，食管癌和细胞均能够形成，。

3、胞血管生成拟态的形成。图食管癌细胞形态学观察图对细胞形成的影响对细胞及蛋白表达的影响用通路特异性抑制剂干预细胞后，检测各组细胞中及蛋白的表达，见图。的相对蛋白量分别为因素作用下，激活，蛋白只有在通路激活后才会被磷酸化为具有活性的，从而在细胞的增殖存活及凋亡等方面发挥重要的生物学作用，。因此，可通过检测的表达水平来评价的活化程度。有研究表明，被干扰后，食管癌细胞增殖速度明显减慢，细胞的迁移力显著下降，并增加细胞凋亡率。本研究发现，通路时，抑制作用最为明显。结果显示。

4、加入磷酸盐缓冲溶液洗涤次。加入胰酶消化细胞，倒臵显微镜下观察，待细胞收缩变亮即将脱落时，立刻加入细胞对应完全培养基终止消化。倾斜将细胞吹下，并将细胞悬液转入离心管中离心。完全弃上清液，加入细胞对应完全培养基重悬细胞沉淀，以∶传代。统计学处理应用软件软件对图臵于，待其凝固。胰酶消化种细胞，以每孔个接种于加有基质胶的孔板中，每孔，每组设臵个复孔。培养箱中培养后，显微镜下观察形成情况。增殖实验取对数生长期的细胞，以每孔个接种于孔培养板中，条件下培养。设臵组浓度梯度，每。

5、达的影响用通路特异性抑制剂干预细胞后，检测各组细胞中及蛋白的表达，见图。的相对蛋白量分别为和。不同食管癌细胞血管生成拟态的形态学及机制研究全文干预后食管癌细胞和蛋白的表达水平讨论随着手术技术的进步和新型抗癌药物新辅助放化疗及生物治疗的发展，多模式综合治疗使肿瘤患者的预后及生存率得到了极大的提高，但食管癌预后仍较不佳，。与其他恶性肿瘤样，食管癌在生长过程中需要新生血管提供营养支持，丰富的新生血管也为肿瘤细胞进入血液或淋巴循环进而到达转移部位提供了途通路参与食管癌细。

6、白水平的影响无统计学差异，。的相对蛋白量分别为和。不同浓度对蛋白水平的影响有统计学差异，。说明呈浓度依赖性抑制细胞中蛋白表达，表明干预细胞后，通路活性被抑制。图干预后食管癌细胞和异性抑制剂干预细胞后，蛋白水平表达显著下降，提示通路活性受抑制同时导致食管癌细胞数量下降，这说明信号通路参与到食管癌细胞的形成。然而，信号通路在体内众多组织及细胞正常生理活动中起重要作用，抑制活性虽然可抑制食管癌细胞，但是其对正常组织生物学行为也不食管癌细胞血管生成拟态的形态学及机制研究。

7、其形成的能力有所不同，细胞形成最为明显，形成能力最差。这种形成能力的差异，考虑与食管癌细胞来源不同有关。有研究表明，不同转移潜能和。不同浓度对蛋白水平的影响无统计学差异，。的相对蛋白量分别为和。不同浓度对蛋白水平的影响有统计学差异，。说明呈浓度依赖性抑制细胞中蛋白表达，表明干预细胞后，通路活性被抑制。图法检测对细胞及蛋白表达的影响。结果食管癌细胞在体外培养下能够形成血管生成拟态，细胞血管生成拟态形成数量最多，与细胞相比，差异有统计学意义。对食管癌细胞增殖有抑制作。

8、析。为差异有统计学意义。结果食管癌细胞的形态学观察食管癌细胞在基质胶上能模拟血管内皮细胞的特性并相互连接，形成典型的血管网状样结构，呈单个环状或多个环状相连的网格状结构，饱和条件下培养，每孔加入的溶液，避光孵育，每孔加入甲基亚砜溶液，臵水平摇床上，采用酶联免疫检测仪在波长下测各孔吸光度值。细胞生长抑制率平均相对吸光率。方法细胞培养和细胞完全培养基为胎牛血清双抗，细胞传代及收集。培养皿中已增殖至的细食管癌细胞数量下降，这说明信号通路参与到食管癌细胞的形成。然而，信。

9、用，且呈剂量依赖性。细胞加入不同浓度的处理后，血管生成拟态形成能力有下降的趋势，浓度为蛋白的表达水平讨论随着手术技术的进步和新型抗癌药物新辅助放化疗及生物治疗的发展，多模式综合治疗使肿瘤患者的预后及生存率得到了极大的提高，但食管癌预后仍较不佳，。与其他恶性肿瘤样，食管癌在生长过程中需要新生血管提供营养支持，丰富的新生血管也为肿瘤细胞进入血液或淋巴循环进而到达转移部位提供了途径。食管癌细胞血管生成拟态的形态忽略。图食管癌细胞形态学观察图对细胞形成的影响对细胞及蛋白。

10、每孔加入的溶液，避光孵育，每孔加入甲基亚砜溶液，臵水平摇床上，采用酶联免疫检测仪在为胎牛血清双抗，细胞传代及收集。培养皿中已增殖至的细胞，去旧培养基，加入磷酸盐缓冲溶液洗涤次。加入胰酶消化细胞，倒臵显微镜下观察，待细胞收缩变亮即将脱落时，立刻加入细胞对应完全培养基终止消化。倾斜将细胞吹下，并将细胞悬液转入离心管中离心。完全弃上清液，加入进行分析，每组按至少张图片进行计数。应用进行统计学分析并作图。定量资料以表示，组间比较采用独立样本检验，多组间比较采用单因素方差。

11、号通路在体内众多组织及细胞正常生理活动中起重要作用，抑制活性虽然可抑制食管癌细胞，但是其对正常组织生物学行为也不能忽略。形成实验孔板放于预冷，将基质胶臵于冰上溶解，按每孔加至预冷的孔板中，铺匀能的肝癌细胞体外培养形成的能力存在差异，高转移潜能的肝癌细胞更易形成。细胞来源于接受放疗后的食管癌患者，提示放疗能够从定程度上抑制肿瘤。信号通路广泛存在于人体细胞中，在各种细胞因子生长因子等刺激因素作用下，激活，蛋白只有在通路激活后才会被磷酸化为具有活性的，从而在细胞的增殖。

12、文为明显，形成能力最差。这种形成能力的差异，考虑与食管癌细胞来源不同有关。有研究表明，不同转移潜能的肝癌细胞体外培养形成的能力存在差异，高转移潜能的肝癌细胞更易形成。细胞来源于接受放疗后的食管癌患者，提示放疗能够从定程度上抑制肿瘤。信号通路广泛存在于人体细胞中，在各种细胞因子生长因子等刺激下观察形成情况。增殖实验取对数生长期的细胞，以每孔个接种于孔培养板中，条件下培养。设臵组浓度梯度，每组个复孔。所用检测的药物浓度为。对照组加入相同体积的培养液。饱和条件下培养，。

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