1、作为匀浆介质破碎后离心取上清液，按线粒体酶试剂盒操作说明，进行酶促反应定磷，用分光光度计在处测定吸光度值，通过磷标准曲线推算线粒体酶活力，每组均采用复管测定。统计学处理采用统计学软件进行统计学分析，计量资料以均数标准差表示，组间比较采用单因素方差分析，以为检验水组细胞凋亡显著增加与组比较，各给药组细胞凋亡显著减少，且当干姜附子汤浓度为时，细胞凋亡率最低。酶活性检测结果如表所示，与组比较，组细胞酶活力显著降低与组比较，各给药组活力均升高。探讨干姜附子汤抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制药理学。法检测细胞存活率将浓度为个的大鼠心肌细胞铺板，待细胞完全贴壁后各给药组给予含药培养液干预等基于网络药理学的附子干姜抗心肌缺。

2、有关，但其具体作用机制有待进步研究。参考文献何小奇，邓莉抗心肌缺血再灌注损伤多肽类药物的研究进展医学综述，李亚萍，张明昊干姜附子汤预防心动过缓的实验观察光明中医，王嫣，彭芳，陈天琪干姜附子汤温通心阳作用的实验研究贵州科学史琴，彭芳，赵云华，等干姜附子汤对大鼠缺血再灌注心肌细胞损伤的实验研究贵阳中医学院学报，陶嘉磊，汪受传，陈彦臻后，心脏结构的进步破坏以及心肌细胞能量代谢功能障碍的进步加重，甚至发生不可逆性损伤，主要包括心肌梗死面积的再扩大和危及生命的心律失常。目前，的发病机制尚未完全阐明，般认为钙超载凋亡氧化损伤炎症是发生的重要原因，。线粒体不仅是细胞内合成的场所，也是细胞凋亡的控制中心。由于心脏的高能量需。

3、见表。图干姜附子汤抗靶点网络图构建将个共同靶点导入数据库进行网络拓扑分析。网络图中包含个节点，条边见图。节点的大小表示度值。值排名前的靶点为甲状腺激素细胞凋亡等信号通路。流式细胞仪检测结果显示干姜附子汤可减少缺氧损伤的细胞凋亡率。试剂盒检测酶活力，发现干姜附子汤可显著提高酶活性。结论干姜附子汤治疗呈现多分子多靶点多通路的协同作用机制，且治疗机制与凋亡密切相关。关键词干姜附子汤心肌缺血再灌注损伤心血管网络药理学心肌缺血再灌注损伤，是指缺血缺氧的心肌组织恢复血液供应后，心脏结构探讨干姜附子汤抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制药理学结合液混匀后加碘化丙啶后在流式细胞仪检测细胞凋亡率。酶活力测定将按项下分组的各组细胞，。

4、王建，赵艳玲附子与干姜配伍的药理学研究进展中国医院用药评价与分析谢锋，段广靖，王斌，卫培峰，陈琳，李敏基于网络药理学探讨干姜附子汤抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制中南药学，。方法干姜附子汤中候选活性化合物与靶点的收集与筛选以附子干姜为关键词在中药系统药理学数据库和分析平台，中检索附子干姜的化学成分。以口服生物利用度，药物相似性为标准，获取附子干姜主要活性化合物。考虑到化合物含量代谢及药理作用，对附子干姜有效化合物进行补充。附子的探讨干姜附子汤抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制药理学活性并减少细胞凋亡率，与文献结果致。综上，干姜附子汤对心肌细胞损伤具有保护作用，其作用机制可能与改善心肌细胞能量代谢及减少心肌细胞凋亡。

5、液终止消化后转移至离心管内，离心弃上清液，后加入，将造模后的细胞培养液吸出至离心管内，小心冲洗后用不含胰酶消化细胞，消化后将上述收集的培养液终止消化后转移至离心管内，离心弃上清液，后加入结合液混匀后加碘化丙啶后在流式细胞仪检测细胞凋亡率。酶活力测定将按项下分组的各组细胞，用作为匀浆介质破碎后离心取上清液，按线粒体酶试剂盒操作说明，进行酶促反应定磷，用分光光度计在处测定吸光度值，通过磷标准曲线推算线粒体甾醇，姜酚。提示这些成分可能是干姜附子汤治疗的核心成分。表干姜附子汤活性成分表干姜附子汤抗靶点收集图干姜附子汤活性成分靶点网络图中获得靶点个。将干姜附子汤的靶点与靶点导入韦恩图见图在线工具中获取干姜附子汤抗靶点。

6、血损伤的分子机制中南药学，王用华基于系统药理学的现代中药研究体系世界中医药，邓晓红，黄建华，董竞成附子药理作用的分子机制研究进展江西中医药大学学报，张璐，王建，赵艳玲附子与干姜配伍的药理学研究进展中国医院用药评价与分析谢锋，段广靖，王斌，卫培峰，陈琳，李敏基于网络药理学探讨干姜附子汤抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制中南药学，。摘要目的基于网络药理学探讨干姜附子汤抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法通过数据库筛选检索干姜酶活力，每组均采用复管测定。统计学处理采用统计学软件进行统计学分析，计量资料以均数标准差表示，组间比较采用单因素方差分析，以为检验水准。细胞实验细胞存活率检测结果如表所示，与组比较，组细胞存活率。

7、，心肌组织中含有较多的线粒体。线粒体内膜上含有大量的酶和酶，这些酶可以维持细胞膜电位，催化分解成并释放能量。当心肌缺血缺氧时，产生减少，筛选检索干姜附子的主要成分，并通过和数据库筛选成分靶点，结合数据库获取干姜附子汤抗的作用靶点。应用平台构建蛋白蛋白相互作用网络模型，应用数据库进行富集分析和通路富集分析，进步进行实验验证，以揭示干姜附子汤抗的机制。结果筛选得到个活性成分，个靶点，治疗靶点个。功能富集分析得到条目个，包括生物过程条目个，细胞组成条目个，分子功能条目个。通路富集筛选得到条信号通路，主要涉及结果网络药理分析结果干姜附子汤活性成分及靶点筛选通过平台以及化合物补充共收集到干姜附子汤中成分个，其中附子个。

8、靶点，治疗靶点个。功能富集分析得到条目个，包括生物过程条目个，细胞组成条目个，分子功能条目个。通路富集筛选得到条信号通路，主要涉及探讨干姜附子汤抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制药理学，陈天琪干姜附子汤温通心阳作用的实验研究贵州科学史琴，彭芳，赵云华，等干姜附子汤对大鼠缺血再灌注心肌细胞损伤的实验研究贵阳中医学院学报，陶嘉磊，汪受传，陈彦臻，等中药复方网络药理学研究述评中华中医药杂志，胡越，沈炀，王康，等探讨白头翁汤治疗溃疡性结肠炎的作用机制中药药理与临床，马清林，臧凯宏，杜丽东，等乌梅丸治疗溃疡性结肠炎的网络药理学研究中药药理与临床，官扬，曾文雪，胡慧明，等基于网络药理学探讨甘草枳壳活性成分抗乳腺癌作用机制中。

9、干姜个见表。获得作用靶点个，成分靶点网络图见图。图中角形代表成分，圆形代表靶点。其中值排名靠前的成分为附子中的乌头碱，干姜中的谷甾醇，姜酚。提示这些成分可能是干姜附子汤治疗的核心成分。表干姜附子汤活性成分表干姜附子汤抗靶点收集图干姜附子汤活性成分靶点网络图中获得靶点个。将干姜附含药培养液设臵空白对照孔，每个浓度设臵个复孔，组给予完全培养基。培养后于每孔加入的，培养箱孵育后，小心吸净原液，每孔加入的溶液，至结晶完全溶解后，酶标仪检测值，以空白对照组的吸光度均值为，计算其余各组细胞活性。计算公式为细胞凋亡率测定双染法检测凋亡，将造模后的细胞培养液吸出至离心管内，小心冲洗后用不含胰酶消化细胞，消化后将上述收集的培。

10、，甚至发生不可逆性损伤，主要包括心肌梗死面积的再扩大和危及生命的心律失常。目前，的发病机制尚未完全阐明，般认为钙超载凋亡氧化损伤炎症是发生的重要原因，。结果网络药理分析结果干姜附子汤活性成分及靶点筛选通过平台以及化合物补充共收集到干姜附子汤中成分个，其中附子个，干姜个见表。获得作用靶点个，成分靶点网络图见图。图中角形代表成分，圆形代表靶点。其中值排名靠前的成分为附子中的乌头碱，干姜中的谷子的主要成分，并通过和数据库筛选成分靶点，结合数据库获取干姜附子汤抗的作用靶点。应用平台构建蛋白蛋白相互作用网络模型，应用数据库进行富集分析和通路富集分析，进步进行实验验证，以揭示干姜附子汤抗的机制。结果筛选得到个活性成分，。

11、实验方剂学杂志，吴杰，向净匀，孙彦杰有较多的线粒体。线粒体内膜上含有大量的酶和酶，这些酶可以维持细胞膜电位，催化分解成并释放能量。当心肌缺血缺氧时，产生减少，酶活性降低，线粒体内超载，氧自由基大量生成，线粒体膜膜电位发生改变，最终导致细胞凋亡。徐炜棉等研究表明苦参碱可提高阿霉素损伤的心肌细胞酶酶活性并减少心肌细胞凋亡。霍礼超等研究表明运动可提高胰岛素抵抗大鼠酶活性，胸腺细胞凋亡减少。曾先燕等研究结果提示橙要成分为生物碱，干姜的主要成分为挥发油，故加入现有研究报道的附子干姜的主要活性成分中，。根据筛选完后加入个化学成分。在和数据库中收集上述获得成分的靶点。并使用数据库标准化靶点名称。进而利用绘制干姜附子汤活性。

12、著下降与组比较，干姜附子汤不同浓度作用于细胞存活率显著增加，且对细胞有促增殖作用，在预给药浓度为时，存活率最高。细胞凋亡检测结果表干姜附子汤抗靶点如图心肌细胞凋亡检测结果显示，与组比较，。提示这些靶点可能是干姜附子汤抗的核心靶点。法检测细胞存活率将浓度为个的大鼠心肌细胞铺板，待细胞完全贴壁后各给药组给予含药培养液干预，且含药培养液设臵空白对照孔，每个浓度设臵个复孔，组给予完全培养基。培养后于每孔加入的，培养箱孵育后，小心吸净原液，每孔加入的溶液，至结晶完全溶解后，酶标仪检测值，以空白对照组的吸光度均值为，计算其余各组细胞活性。计算公式为细胞凋亡率测定双染法检测凋亡进步破坏以及心肌细胞能量代谢功能障碍的进步加。

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