1、理。本论文从选题到完成，每步都是在导师指导下完成，倾注了导师大量心血。另外特别感谢裴老师绘制产率测定模式图和分子生物学基本实验方法总结手册，这些实验方法贯穿我硕士生涯，受益匪浅。在此，谨向导师裴雁曦表示最崇高敬意和衷心感谢!感谢梁雅丽师姐对我实验上大力支持无私帮助及生活上悉心照顾。感谢全体兄弟姐妹们，感谢刘志强张丽萍金竹萍刘旦梅马晓丽老师，乔增杰田保华李亚伟王娟龚泽华沈洁洁吴玲玲王婵等各位师兄师姐们悉心指导和关怀，感谢同级罗雅楠及我舍友薛美昭董晓莉关青陪伴，感谢方慧慧王鸿焦张晨阳杜鑫哲奥娜孙丽敏等师妹们无私帮助。三年学习生活苦与乐，有你们倾听陪伴与关怀，衷。

2、果如下将拟南芥内源产生关键酶基因,克隆到原核表达载体上，重组质粒和转化大肠杆菌，命名为和。经异丙基硫代半乳糖苷诱导和表达和，确定最佳诱导表达条件分别为诱导和诱导。经亲和层析纯化获得和，洗脱杂蛋白和目蛋白最佳咪唑浓度分别为,和,。确定纯化得到蛋白仍具半胱氨酸脱巯基酶活性后，对酶学性质进行研究。结果表明以为特异底物酶最适为，最适作用温度为，最适条件下以为底物米氏常数为，为金属离子和对重组酶活性有定抑制作用，和在定程度上提高了酶活性，其中效果更强蛋白变性剂和酶抑制剂羟胺不同程度地抑制酶活性。关键词载体构建半胱氨酸脱巯基酶酶学性质研究万方数据万方数据袁慧虹,梁雅丽。

3、成果攻读学位期间取得研究成果袁慧虹,梁雅丽,沈洁洁,张丽萍,刘志强,裴雁曦等重组半胱氨酸脱巯基酶表达纯化及酶学性质中国生物工程杂志,万方数据致谢致谢时光荏苒，光阴如梭，转眼便是毕业时刻。回首三年，感慨万千，硕士生涯中生活学习上点点滴滴都让我记忆犹新。硕士毕业硕士论文完成与裴雁曦导师和全体成员及亲朋好友帮助密切相关，在此表示衷心感谢。导师裴雁曦渊博专业知识，严谨治学态度，精益求精工作作风，诲人不倦高尚师德，严以律己宽以待人崇高风范，朴实无华平易近人人格魅力对我影响深远。在他淳淳教导下，我不仅树立了远大学术目标掌握了基本研究方法，还明白了许多待人接物与为人处世。

4、万方数据万方数据万方数据中文摘要气体信号分子近年来已经成为生物学和医学研究热点。动植物中生理功能调节机制深入研究推进了内源产生关键酶结构活性及其酶动力学等研究。动物中调节生理功能机制及内源产生酶胱硫醚合成酶,和胱硫醚裂解酶,结构特征等研究已被系统报道。植物中已经发现主要内源生成关键酶包括以为底物半胱氨酸脱巯基酶,和以为底物半胱氨酸脱巯基酶两者统称为半胱氨酸脱巯基酶，是植物内源产生过程中功能最明确酶，它催化产生氨和丙酮酸盐。近两年，关于调节植物生长发育和抵抗非生物胁迫等研究突飞猛进，但酶学性质缺乏系统研究，仍需进步探索。本文主要分析植物体内内源产生关键酶，结。

5、液和配方溶液咪唑，甘油，调至，去离子水定容到，其中咪唑浓度为。溶液咪唑，甘油，调至，去离子水定容到，其中咪唑浓度为。破碎液咪唑调至，去离子水定容到，贮存于。平衡液咪唑，调至，去离子水定容到，贮存于。酒精保存液无水酒精和单蒸水以混合。产率测定相关溶液溶液溶解到去离子水中，待溶解后加，保存。溶液溶解到去离子水中，待溶解后加，混匀，避光保存。溶液溶解到水中。溶液溶解到水中，再向溶液中加入，调至，保存。溶液溶解到水中，保存。溶解到水中，浓盐酸调至，去离子水定容到，保存。质粒提取相关溶液溶液Ⅰ。溶液Ⅱ，该溶液现用现配。溶液Ⅲ冰乙酸，定容到。万方数据攻读学位期间取得研。

6、心感谢你们，因为你们我硕士生活快乐又充实。特别感谢裴雁曦老师刘志强老师梁雅丽师姐乔增杰师兄和田保华师兄帮我修改论文，谢谢！感谢山西省生物所所有老师和伙伴们，谢谢！感谢爸爸妈妈姐姐妹妹弟弟，你们是我前进最大动力，因为你们支持，才有我论文顺利完成，谢谢你们！感谢我朋友们，谢谢你们鼓励，我会更努力，加油！最后，再次感谢所有帮助我老师，师兄弟姐妹及朋友们，谢谢！袁慧虹年月日万方数据个人简况及联系方式个人简况及联系方式基本情况姓名袁慧虹性别女籍贯山西省吕梁市交城县个人简历于山西大学生命科学学院植物学专业就读，硕士研究生于山西师范大学生命科学学院生物科学专业就读，本科。

7、沈洁洁等重组半胱氨酸脱巯基酶表达纯化及酶学性质中国生物工程杂志万波,郑莉,程书秋大肠杆菌感受态细胞培养与冻存条件研究微生物学通报谭翔文,许金华,文洪波等基因重组质粒构建南华大学学报医学版范镇基氨基酸生物化学进展氨基酸杂志彭沫溱,董岩岩,唐湘华等中性植酸酶克隆表达纯化及酶学性质研究饲料添加剂万方数据半胱氨酸脱巯基酶诱导表达纯化及酶学性质研究附录培养基配制液体培养基配方水中含蛋白胨，氯化钠，酵母提取物。固体培养基配方在液体培养基中加入琼脂。蛋白电泳相关溶液和配方胶浓度和分子质量选择比例表分离胶浓度与最佳分离范围分离胶最佳分离范围胶胶胶胶胶分离胶表分离胶配方分离。

8、其机制山西省高等学校科技创新项目硫化氢在谷子抵抗镉胁迫中作用机制万方数据万方数据目录中文摘要第章综述理化性质毒性表现气体信号分子气体信号分子研究进展动物中生理功能研究进展植物中生理功能研究进展内源产生关键酶研究进展动物中内源产生酶植物中内源产生酶本实验研究内容及意义研究内容研究意义第二章和原核表达载体构建材料和试剂菌体载体及植株试剂和仪器实验方法拟南芥提取及反转录目基因和克隆及目片段回收重组载体构建及转化大肠杆菌和感受态细胞制备及重组子转化重组质粒提取酶切鉴定及测序实验结果与分析拟南芥植株培养万方数据目基因和克隆重组载体和构建转化及鉴定测序鉴定重组载体和构。

9、配方分离胶浓度万方数据附录浓缩胶表浓缩胶配方浓缩胶配方蛋白电泳相关溶液称取和。用蒸馏水溶解，定容到，避光贮存于。称取，蒸馏水溶解，调至，定容到，贮存于。称取，蒸馏水溶解，调至，定容到，贮存于。称取，蒸馏水溶解，定容到。称取，去离子水溶解，贮存于。电泳缓冲液称取甘氨酸去离子水溶解，调至，定容到，室温保存。上样缓冲液取甘油溴酚兰去离子水定容至，保存。染色配方考马斯亮蓝染色液考马斯亮蓝，冰乙酸，异丙醇，去离子水，混匀，过滤，常温保存。脱色液配方考马斯亮蓝脱色液冰乙酸，乙醇，去离子水，混匀，常温保存。万方数据半胱氨酸脱巯基酶诱导表达纯化及酶学性质研究蛋白纯化相关溶。

10、献资料外，本学位论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写过成果。作者签名年月日万方数据学位论文使用授权声明学位论文使用授权声明本人完全了解山西大学有关保留使用学位论文规定，即学校有权保留并向国家有关机关或机构送交论文复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印缩印或扫描等手段保存汇编学位论文。同意山西大学可以用不同方式在不同媒体上发表传播论文全部或部分内容。保密学位论文在解密后遵守此协议。作者签名导师签名年月日万方数据本研究承国家自然科学基金甲基化修饰对硫化氢信号分子调控大白菜花期影响国家青年基金项目硫化氢在拟南芥应答重金属镉胁迫过程中信号作用及。

11、转化及鉴定结论与讨论第三章和诱导表达及纯化材料和试剂菌体试剂和仪器实验方法大肠杆菌中诱导和表达和纯化和活性测定实验结果与分析和诱导表达及最佳诱导表达条件确定和纯化及最佳纯化条件筛选和活性测定结论与讨论第四章重组拟南芥酶学性质研究材料和试剂菌体仪器和试剂实验方法重组酶活性测定重组酶最适和稳定性重组酶最适温度和温度稳定性不同金属离子对重组酶活性影响蛋白变性剂和酶抑制剂对重组活性影响酶动力学参数实验结果与分析万方数据重组酶活性测定重组酶酶学性质研究结论与讨论参考文献附录攻读学位期间取得研究成果致谢个人简况及联系方式承诺书学位论文使用授权声明万方数据万方数据万方数。

12、话电子信箱万方数据半胱氨酸脱巯基酶诱导表达纯化及酶学性质研究作者袁慧虹学位授予单位山西大学引用本文格式袁慧虹半胱氨酸脱巯基酶诱导表达纯化及酶学性质研究学位论文硕士万方数据山西大学届硕士学位论文半胱氨酸脱巯基酶诱导表达纯化及酶学性质研究作者姓名袁慧虹指导教师裴雁曦教授学科专业植物学研究方向植物分子遗传培养单位生命科学学院学习年限年月至年月二〇四年六月万方数据万方数据学位论文使用授权声明承诺书本人郑重声明所呈交学位论文，是在导师指导下独立完成，学位论文知识产权属于山西大学。如果今后以其他单位名义发表与在读期间学位论文相关内容，将承担法律责任。除文中已经注明引用。

参考资料：

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