1、关键酶，的酵母突变株在轻微热激下不具有积累海藻糖的能力，而且与野生菌株相比更不能抵抗热激，有力地证明了海藻糖在生物耐热性方面起着重要的作用。海藻糖是昆虫几丁质合成的重要物质几丁质是昆虫表皮的主要成分，已有研究显示，几丁质大约占到昆虫表皮干物质的，不过其具体含量会随昆虫种类以及组织部位的不同呈现不样的变化。同时几丁质也是昆虫围食膜的主要构成成分，大约占左右。在整个昆虫的生长发育过程中，其需要不断的合成以及降解几丁质来确保自身蜕皮的完成以及围食膜的再生，因此关于昆虫几丁质的研究逐渐成为个新的热点。由于几丁质的合成是个高度复杂的生理生化过程，所以对于其生物合成的了解仍处于起步阶段。最早的合成途径是由和于年提出的，几丁质合成起始于葡萄糖，而终止于乙酰葡萄糖胺。而后综合了前人的研究成果，提出了从海藻。
2、丝酵母的海藻糖酶最适温度为。许多耐热性真菌中海藻糖酶最适温度大都在之间。另外在高等植物中海藻糖酶的最适温度均在左右。海藻糖酶的底物特异性海藻糖酶作为有催化功能的蛋白同样具有所有酶的基本性质那就是底物特异性。目前不管是从微生物，植物还是动物中提取出的海藻糖酶都具有高度的底物特异性，只能催化水解海藻糖而不能水解其他的二糖。海藻糖酶在昆虫细胞中的定位海藻糖酶主要在昆虫的肌肉和中肠中表现出较高的活性，而在这两种组织中海藻糖酶的细胞定位均有所不同，故海藻糖酶主要分为两大类膜结合型海藻糖酶与可溶性海藻糖酶。前者为颗粒状海藻糖酶，与肌细胞中的线粒体膜结合在起，主要存在于飞行肌肉细胞卵巢和脑组织中而后者游离于细胞质中，主要存在昆虫的消化系统和血淋巴中。有研究对于海藻糖酶在组织细胞中的位置有了更准确的定位，。
3、方式在不同媒体上发表传播论文的全部或部分内容。保密的学位论文在解密后遵守此协议。作者签名导师签名年月日万方数据目录中文摘要第章前言飞蝗概况海藻糖的研究背景及进展海藻糖概述海藻糖的能源贮存功能海藻糖的生物保护功能海藻糖是昆虫几丁质合成的重要物质海藻糖酶的研究背景及进展海藻糖酶基因的研究进展海藻糖酶相对分子量海藻糖酶最适值和温度海藻糖酶的底物特异性海藻糖酶在昆虫细胞中的定位本研究的内容及意义技术路线图第二章飞蝗海藻糖酶的基因检索及特征分析海藻糖酶基因特征分析工具与方法海藻糖酶基因序列的搜索海藻糖酶基因序列特征的预测海藻糖酶基因的氨基酸比对及系统进化树分析实验结果飞蝗海藻糖酶基因序列的获得及特征分析飞蝗海藻糖酶氨基酸比对结果海藻糖酶系统进化树分析讨论第三章飞蝗海藻糖酶基因的组织和发育表达特性实验。
4、藻糖不仅是昆虫能量贮存的物质，还是应激反应的基础物质，对于昆虫本身的保护能力具有决定性的作用。同时大多数哺乳动物包括人类都缺失这样的个代谢过程，由于海藻糖在昆虫整个代谢过程中具有非常重要的位置，将参与海藻糖水解的海藻糖酶作为新型农药作用靶标进行研究具有重要意义。本研究以主要的农业害虫飞蝗为研究对象，通过飞蝗转录组与基因组搜索，获得个海藻糖酶基因的全长序列，通过和聚类分析，对个海藻糖酶基因进行万方数据第章前言了系统命名通过对个基因的表达特性及海藻糖酶的酶学特性研究，阐明了海藻糖酶在飞蝗体内不同组织及不同发育时间的表达模式采用干扰技术，进步研究了个海藻糖酶基因的生物学功能。实验结果丰富了昆虫海藻糖酶的研究内容，同时也为新型农药靶标的研究提供了理论依据。技术路线图万方数据山西大学届硕士学位论文飞。
5、均衡表达之后分别选取表达最高的组织部位进行发育表达检测，发现在五龄中期肌肉的表达量相对较高，在马氏管中随着发育天数增加表达量上升，在五龄中期的中后肠表达量较高，在体壁中随着发育时间增加表达量下降，在五龄飞蝗若虫发育过程中恒定表达。三飞蝗海藻糖酶酶活测定利用己糖激酶法测定膜结合型和可溶性海藻糖酶的活性，取五龄飞蝗若虫每天的肌肉组织进行的活性测定，取五龄飞蝗若虫每天的马氏管中后肠测定可溶性海藻糖酶的活性。结果表明在五龄第天酶活性较高，后天酶活性相对较低，可溶性海藻糖酶在马氏管中的活性随发育天数增加呈现逐渐升高的趋势，而在中后肠恒定表达。四飞蝗海藻糖酶基因的功能研究为进步研究海藻糖酶基因的功能及其对飞蝗生长发育的影响到了同样的结果，这些细胞可以在干旱状态下存活长达天，而对照组对干旱却十分敏感。在。
6、通过对美洲大蠊血淋巴中可溶性海藻糖酶的研究发现，血清中并没有海藻糖酶，而是存在于血细胞中。而大多数昆虫中肠中的可溶性海藻糖酶主要是在膜质部分表现出了比较大的活性。另外种膜结合型海藻糖酶的位置相对比较固定，比如在绿头苍蝇的肌细胞中，膜结合型海藻糖酶主要位于线粒体内膜上，以便为细胞质及时提供葡萄糖。本研究的内容及意义蝗灾是我国历史上记载比较多的重大灾害之。随着农药技术的发展，有机磷农药得到了广泛推广，使得我国蝗情有所缓解。但是近年来由于飞蝗对有机磷等杀虫剂抗药性的产生，使得防治效果越来越不理想，唯的办法是加大杀虫剂的使用量。同时有机磷杀虫剂对于环境具有定的污染性，如果味地加大使用量，对于环境的影响较大，不利于农业生态环境的健康发展。因此寻找新的杀虫靶标基因，研发绿色环保型的杀虫剂显得尤为重要。。
7、到几丁质的合成途径。该途径涉及到了多种酶，其中第种酶就是本课题研究的海藻糖酶。具体合成通路如图所示万方数据飞蝗海藻糖酶的基因分子特性及功能研究图昆虫几丁质合成示意图海藻糖酶的研究背景及进展第个海藻糖酶是由于年在黑曲霉菌中检测到的，这发现甚至比海藻糖在昆虫中发现的时间还要早。海藻糖酶活性在细菌酵母昆虫无脊椎动物以及植物中均相继被检测到，并且在很多昆虫中都分离和纯化出了海藻糖酶。早期海藻糖酶的研究主要集中在酶的分离和纯化方面，对于其酶学性质有了比较多的了解。海藻糖酶在昆虫体内主要以两种形式存在可溶性海藻糖酶与膜结合型海藻糖酶。可溶性的海藻糖酶主要存万方数据第章前言在昆虫的消化系统和循环系统中，而膜结合型的海藻糖酶主要存在于肌肉相关组织卵巢和脑组织中。在动力学上两者活性相差很大，般情况下膜结合型。
8、海藻糖酶的活性相对较高，表明其与昆虫的飞行运动有关。海藻糖酶基因的研究进展海藻糖酶由海藻糖酶基因编码，直到年，第个可溶性的海藻糖酶基因才首先在黄粉虫中被克隆，年在家蚕中获得第个膜结合型海藻糖酶基因。此外，在其他昆虫如西方蜜蜂竹蠹螟和甜菜夜蛾等中也发现有两种海藻糖酶基因。随着基因组测序的快速发展和昆虫分子生物学研究的进展，更多的昆虫海藻糖酶基因被发现，如在赤拟谷盗中克隆发现了个可溶性海藻糖酶基因和个膜结合型海藻糖酶基因在异色瓢虫中发现了个可溶性海藻糖酶基因。上述研究表明昆虫海藻糖酶由多个海藻糖酶基因编码。海藻糖酶相对分子量海藻糖酶的相对分子量因物种不同而出现差别。目前已成功克隆出多个物种的海藻糖酶基因，如人类的海藻糖酶基因，由个氨基酸组成，相对分子量为。家蚕中的可溶性海藻糖酶与膜结合型海藻糖。
9、标。本研究以重要农业害虫飞蝗为研究对象，探讨海藻糖酶基因的分子特性及功能，为飞蝗的有效治理提供定的理论依据。主要研究内容如下飞蝗海藻糖酶基因序列的获得及特征分析通过搜索飞蝗转录组，获得了个海藻糖酶基因全长序列和个海藻糖酶基因片段，进步搜索飞蝗基因组获得其全长。分析表明这个海藻糖酶均含有海藻糖酶的两个功能保守区和，以及个甘氨酸富集区。分析发现个基因具有跨膜结构域，将其命名为，其余三个均为可溶性海藻糖酶，分别命名为。利用软件分析表明只有具有信号肽。二飞蝗海藻糖酶基因在不同组织部位和发育时期的表达首先运用方法筛选得到和为五龄飞蝗不同组织和发育时间的最适内参基因。进步利用方法分析了海藻糖酶基因的表达，结果表明在肌肉中特异性高表达，在马氏管和中后肠中表达较高，在体壁中表达最高，而在所有组织部位中相对。
10、虫临近越冬时，血浆中的海藻糖可以转化为甘油山梨醇多元醇等物质，这些物质可通过溶质效应降低过冷却点，保护细胞和酶蛋白免受冻害，是昆虫抗旱的适应性反应。相应地将细胞周围环境温度由降低到后检测到细胞中的海藻糖含量上升了倍，与海藻糖合成相关的和基因的表达也显著提高。又有研究观察到不能产生海藻糖的突变株在时比野生菌株更容易死亡，而将基因转入这些突变株中后发现其恢复了合成海藻糖以及在寒冷环境中生存的能力。以上实验能够很充分地证明，海藻糖对于细胞的抗寒能力具有很重要的作用。万方数据第章前言在酵母中，热激反应的刺激也同样可以引起海藻糖的累积。在热激时，海藻糖合成酶变得活跃，大量合成海藻糖，保护酵母及其他生物体的酶免受热钝化的作用，同时海藻糖还可有效减少由于热引起的蛋白质聚合。另有研究表明，缺失海藻糖合成的。
11、蝗海藻糖酶基因的分子特性及功能研究作者姓名崔淼指导教师张建珍教授学科专业动物学研究方向动物生化与分子生物学培养单位生命科学学院学习年限年月至年月二〇四年六月万方数据，万方数据承诺书承诺书本人郑重声明所呈交的学位论文，是在导师指导下独立完成的，学位论文的知识产权属于山西大学。如果今后以其他单位名义发表与在读期间学位论文相关的内容，将承担法律责任。除文中已经注明引用的文献资料外，本学位论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写过的成果。作者签名年月日万方数据学位论文使用授权声明学位论文使用授权声明本人完全了解山西大学有关保留使用学位论文的规定，即学校有权保留并向国家有关机关或机构送交论文的复印件和电子文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印缩印或扫描等手段保存汇编学位论文。同意山西大学可以用不。
12、的分子量分别为与。竹蠹螟的可溶性和膜结合型海藻糖酶的分子量分别为与。舞毒蛾体内的海藻糖酶为单亚基蛋白，分子量为。海藻糖酶最适值和温度海藻糖酶的最适值随不同物种呈现不同的变化。在真菌类中可将海藻糖酶分为酸性和中性海藻糖酶，它们的最适值分别在和之间。昆虫体内的海藻糖酶值范围分步较广，大多偏中酸性，有极少部分呈碱性。如美洲大蠊海藻糖酶值为，黑腹果蝇和烟草天蛾的海藻糖酶值在左右。而飞蝗海藻糖酶最适值与蟑螂的相同，为。西方蜜蜂与白蚁海藻糖酶最适值在左右。呈碱性的海藻糖酶是等从卤虫胚胎和幼虫中分离出来的种可溶性海藻糖酶，其最适值为。海藻糖酶的最适温度仍然随物种的不同有所差别，但普遍偏高。如家蝇体内的海藻糖酶最适温度在，而伏蝇的最适温度万方数据飞蝗海藻糖酶的基因分子特性及功能研究为。真菌中略高些，如热带。
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跨越挫折笑对人生专题PPT（19页版） 编号18060