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GB 4789.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 GB 4789.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验

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1、白胨乳糖磷酸氢钠亚硒酸氢钠胱氨酸蒸馏水制法除亚硒酸氢钠和胱氨酸外,将各成分加入蒸馏水中,煮沸溶解,冷至以下,以无菌操作加入亚硒酸氢钠和胱氨酸溶液称取胱氨酸,加氢氧化钠溶液,使溶解,再加无菌蒸馏水至即成,如为胱氨酸,用量应加倍。摇匀,调节至。亚硫酸铋琼脂成分蛋白胨牛肉膏葡萄糖硫酸亚铁磷酸氢钠煌绿或水溶液柠檬酸铋铵亚硫酸钠琼脂蒸馏水制法将前种成分加入蒸馏水制作基础液,硫酸亚铁和磷酸氢钠分别加入和第项的抗原。种多价血清所包括的因子如下多价多价,多价,多价多价多价,多价,多价每个抗原成分的最后确定均应根据单因子血清的检查结果,没有单因子血清的要用两个复合因子血清进行核对。检出第相抗。

2、或制法除赖氨酸以外的成分加热溶解后,分装每瓶,分别加入赖氨酸。赖氨酸按加入,赖氨酸按加入。调节至。对照培养基不加赖氨酸。分装于无菌的小试管内,每管,上面滴加层液体石蜡,高压灭苯甲醛溶解于乙醇内。然后缓慢加入浓盐酸。试验方法挑取小量培养物接种,在培养,必要时可培养。加入柯凡克试剂约,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色或加入欧波试剂约,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。注蛋白胨中应含有丰富的色氯酸。每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用。尿素琼脂成分蛋白胨氯化钠葡萄糖磷酸氢钾酚红琼脂蒸馏水尿素溶液制法除尿素琼脂和酚红外,将其他成分加入蒸馏水中,煮。

3、煮沸溶解。冷至左右时,先将硫酸亚铁和磷酸氢钠混匀,种多价血清检查,如有其中种血清凝集,则用这种血清所包括的群血清逐检查,以确定群。每种多价血清所包括的因子如下多价,群并包括,群多价群多价群多价群多价群多价群多价群多价群多价群抗原的鉴定属于各群的常见菌型,依次用表所述因子血清检查第相和第相的抗原。表群常见菌型抗原表群第相第相不产气的产气的,无无无无无不常见的菌型,先用种多价血清检查,如有其中种或两种血清凝集,则再用这种或两种血清所包括的各种因子血清逐检查,以第相和临用前,按上列顺序,以无菌操作依次加入基础液中,每加入种成分,均应摇匀后再加入另种成分。亚硒酸盐胱氨酸增菌液成分蛋。

4、无无无无无不常见的菌型,先用种多价血清检查,如有其中种或两种血清凝集,则再用这种或两种血清所包括的各种因子血清逐检查,以第相和第项的抗原。种多价血清所包括的因子如下多价多价,多价,多价多价多价,多价,多价,培养,观察结果。如有细菌生长即为阳性不抑制,经细菌不生长为阴性抑制。注氰化钾是剧毒药,使用时应小心,切勿沾染,以免中毒。夏天分装培养基应在冰箱内进行。试验失败的主要原因是封口不严,氰化钾逐渐分解,产生氢氰酸气体逸出,以致药物浓度降低,细菌生长,因而造成假阳性反应。试验时对每环节都要特别注意。赖氨酸脱羧酶试验培养基成分蛋白胨酵母浸膏葡萄糖蒸馏水溴甲酚紫乙醇溶液赖氨酸或赖氨酸。

5、培养基内血清的浓度应有适当的比例,过高时细菌不能生长,过低时同相细菌的动力不能抑制。般按原血清∶∶的量加入。小倒管法将两端开口胱氨酸蒸馏水制法除亚硒酸氢钠和胱氨酸外,将各成分加入蒸馏水中,煮沸溶解,冷至以下,以无菌操作加入亚硒酸氢钠和胱氨酸溶液称取胱氨酸,加氢氧化钠溶液,使溶解,再加无菌蒸馏水至即成,如为胱氨酸,用量应加倍。摇匀,调节至。亚硫酸铋琼脂成分蛋白胨牛肉膏葡萄糖硫酸亚铁磷酸氢钠煌绿或水溶液柠檬酸铋铵亚硫酸钠琼脂蒸馏水制法将前种成分加入蒸馏水制作基础液,硫酸亚铁和磷酸氢钠分别加入和蒸馏水中,柠檬酸铋铵和亚硫酸钠分别加入另和蒸馏水中,琼脂加入蒸馏水中。然后分别搅拌均匀。

6、原而未检出第相抗原的或检出第相抗原而未检出第相抗原的,可在琼脂斜面上移种代代后再检查。如仍只检出个相的抗原,要用位相变异的方法检查其另个相。单相菌不必做位相变异检查。位相变异试验方法如下无菌培养皿直径,。无菌试管。计或比色管或精密试纸。全自动微生物生化鉴定系统。无菌毛细管。培养基和试剂缓冲蛋白胨水见。硫磺酸钠煌绿增菌液见。亚硒酸盐胱氨酸增菌液见。亚硫酸铋琼脂见。琼脂见。木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂见。.食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验。结果与报告综合以上生化试验和血清学鉴定的结果,报告样品中检出或未检出沙门氏菌。附录培养基和试剂缓冲蛋白胨水成分蛋白胨氯化钠磷酸氢钠含个。

7、沸溶解,调节至。另将琼脂加入蒸馏水中,煮沸溶解。将上述两溶液混合均匀后,再加入指示剂后分装,高压灭菌。冷至,加入经除菌过滤的尿.食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验.入基础液中,混匀。将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠混匀,倒入基础液中,再混匀。调节至,随即倾入琼脂液中,混合均匀,冷至。加入煌绿溶液,充分混匀后立即倾注平皿。无菌培养皿直径,。无菌试管。计或比色管或精密试纸。全自动微生物生化鉴定系统。无菌毛细管。培养基和试剂缓冲蛋白胨水见。硫磺酸钠煌绿增菌液见。亚硒酸盐胱氨酸增菌液见。亚硫酸铋琼脂见。琼脂见。木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂见。.食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验。

8、端应高出于培养基的表面,灭菌后备用。临用时在酒精灯上加热溶化,冷至,挑取因子血清环,加入小套管中的半固体内,略加搅动,使其混匀,待凝固后,将待检菌株接种于小套管中的半固体表层内,每天检查结果,待另相细菌解离后,可从套管外的半固体表面取菌检查,或转种软琼脂斜面,于培养后再做凝集试验。抗原的鉴定用因子血清检查。已知具有抗原的菌型有伤寒沙门氏菌,丙型副伤寒沙门氏菌,都柏林沙门氏菌。菌型的判定根据血清学分型鉴定的结果,按照附录或有关沙门氏菌属抗原表判定菌型。.食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验。欧波试剂将对甲氨第项的抗原。种多价血清所包括的因子如下多价多价,多价,多价多价。

9、中华人民共和国国家标准食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验发布实施中华人民共和国国家卫易平板法将半固体琼脂平板烘干表面水分,挑取因子血清环,滴在半固体平板表面,放置片刻,待血清吸收到琼脂内,在血清部位的中央点种待检菌株,培养后,在形成蔓延生长的菌苔边缘取菌检查。小玻管法将半固体管每管约在酒精灯上溶化并冷至,取已知相的因子血清,加入于溶化的半固体内,混匀后,用毛细吸管吸取分装于供位相变异试验的小玻管内,待凝固后,用接种针挑取待检菌,接种于端。将小玻管平放在平皿内,并在其旁放团湿棉花,以防琼脂中水分蒸发而干缩,每天检查结果,待另相细菌解离后,可以从另端挑取细菌进行检查。。

10、共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理刻度具刻度或微量移液器及吸头。生化鉴定试剂盒。检验程序沙门氏菌检验程序见图。图沙门氏菌检验程序操作步骤预增菌无菌操作称取样品,置于盛有的无菌均质杯或合适容器内,以均质,或置于盛有的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打。若样品为液态,不需要均质,振荡混匀。如需调整,用无菌或调至。无菌操作将样品转至锥形瓶或其他合适容器内如均质杯本身具有无孔盖,可不转移样品,如使用均质袋,可直接进行培养,于培养。如为冷冻产品,应在以下不超过,或不超过解冻。增菌轻轻摇动培养过的样品混合物,移取的小玻管下端开口要留个缺口,不要平齐放在半固体管内,小玻管的。

11、多价,多价,多价每个抗原成分的最后确定均应根据单因子血清的检查结果,没有单因子血清的要用两个复合因子血清进行核对。检出第相抗原而未检出第相抗原的或检出第相抗原而未检出第相抗原的,可在琼脂斜面上移种代代后再检查。如仍只检出个相的抗原,要用位相变异的方法检查其另个相。单相菌不必做位相变异检查。位相变异试验方法如下入基础液中,混匀。将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠混匀,倒入基础液中,再混匀。调节至,随即倾入琼脂液中,混合均匀,冷至。加入煌绿溶液,充分混匀后立即倾注平皿。无菌培养皿直径,。无菌试管。计或比色管或精密试纸。全自动微生物生化鉴定系统。无菌毛细管。培养基和试剂缓冲蛋白胨水见。硫磺酸。

12、晶水磷酸氢钾蒸馏水制法将各成分加入蒸馏水中,搅混均匀,静置约,煮沸溶解,调节至沙门氏菌属非沙门氏菌非沙门氏菌注产碱,产酸阳性,阴性多数阳性,少数阴性阳性或阴性。接种糖铁琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时,可直接接种蛋白胨水供做靛基质试验尿素琼脂氰化钾培养基,也可在初步判断结果后从营养琼脂平板上挑取可疑菌落接种。于培养,必要时可延长至,按表判定结果。将已挑菌落的平板储存于或室温至少保留,以备必要时复查。表沙门氏菌属生化反应初步鉴别表反应序号硫化氢靛基质尿素氰化钾赖氨酸脱羧酶注阳性阴性阳性或阴性。中华人民共和国国家标准食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验发布实施中华人民。

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