1、取上述溶液与加样缓冲液混匀,琼脂糖凝本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印。硝酸银溶液见附录。显影液见附录。液氮。仪器设备扩增仪。高速冷冻离心机以上。紫外分光光度计。全温摇瓶柜精度。凝胶成像系统。.黑木耳菌种区别性及真实性左右。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印附录规范性附录试剂的制备除非另有说明,在分析中仅使用分析纯试剂和去离子水或相当纯度的水。羟甲基氨基甲烷,溶解于去离子水中,冷却至室温后用浓盐酸调节,加水定容至,高压灭菌。乙胺乙酸钠盐溶液水。

2、表明是严重降解的样品,不可用于鉴定。基因组的值检测无菌水清洗微量核.黑木耳菌种区别性及真实性鉴定第部分法.左右。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印附录规范性附录试剂的制备除非另有说明,在分析中仅使用分析纯试剂和去离子水或相当纯度的水。羟甲基氨基甲烷,溶解于去离子水中,冷却至室温后用浓盐酸调节,加水定容至,高压灭菌。乙胺乙酸钠盐溶液水乙胺乙酸钠溶解于鉴定第部分法。氯仿异戊醇见附录。酚氯仿异戊醇见附录。乙醇溶液见附录。丙烯酰胺溶液见附录。过硫酸铵见附录。聚丙烯酰胺。

3、和顺序的寡核苷酸链。空白对照以无菌水作为模板进行反应,以验证反应过程中是否发生污染。阴性提取对照水作为材料提取,以证明黑木耳在制备过程中是否发生污染。原理对黑木耳菌种的区域中内含子启动子进行特异扩增,检测和比较该序列长度多态性。通过对产物的检测和比较,识发,剩余无色透明状物质黑木耳基因组。用的无菌水充分溶解,加入,恒温静置。取出上述静置的溶液,用无菌水补足至,加入,纯化缓冲液附录,水浴。重复步骤,获得黑木耳基因组,分装保存备用。不宜反复冻融使用。样品合格性确认凝胶电泳检测凝胶成。

4、胺凝胶溶液见附录。缓冲液见附录。缓冲液见附录。硝酸银溶液见附录。显影液见附录。液氮。仪器设备扩增仪。高速冷冻离心机以上。紫外分光光度计。全温摇瓶柜精度。凝胶成像系统。.黑木耳菌种区别性及真实性鉴定第部分法。氯仿异戊醇氯仿和异胶电泳,凝胶成像仪上或紫外透射仪上成像。筛选判定与分子量标记比较,观察所提取的基因组质量及片段大小,按下列标准判定在点样孔附近呈现条致密亮带,表明是质量好分子量大且无降解的样品,可用于鉴定呈现连续分布状态,表明是部分降解的样品,不建议用于鉴定观察不到大片段,。

5、取无水乙醇,加水定容至。丙烯酰胺溶液称取丙烯酰胺,甲叉双丙烯酰胺,加水定容至。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印过硫酸铵称取过硫酸铵,定容至,保存保存时间为周。聚丙烯酰胺凝胶溶液量取的水补齐至,自然。角瓶装左右。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印附录规范性附录试剂的制备除非另有说明,在分析中仅使用分析纯试剂和去离子水或相当纯度的水。羟甲基氨基甲烷,溶解于去离子水中,冷却至室温后用浓盐酸调节,加水定容至,高压灭菌。乙胺乙酸钠盐溶液性鉴定的定长度。

6、乙胺乙酸钠溶解于本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印。产物质量判断观察空白对照的凝胶成像照片,按下列结果判断空白对照为阴性,并且个平行试验结果致,则本次试验结果可以使用在阴性提取对照或空白对照中扩增出了片段,则说明检测过程中发生了污染,需查找原因重新检测。判定分析将供检黑.黑木耳菌种区别性及真实性鉴定第部分法.水乙胺乙酸钠溶解于水,磁力搅拌,用调节溶液,然后定容至,高压灭菌。提取缓冲液氯化钠溶解于去离子水中,加入溴代十烷基甲胺,完全溶解,再加入,用水定容至,高压。

7、凝胶溶液见附录。缓冲液见附录。缓冲液见附录。加入倍体积预冷的无水乙醇,静置沉淀,用无菌枪头挑取白色絮状物至干净离心管中,无水乙醇充分挥发。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印乙醇附录漂洗沉淀,晾干乙醇充分木耳菌株扩增的条带与对照菌株比较,若有显著差别,遗传相似系数小于,可判定供检菌种与对照菌种为不同菌种若供检菌种与对照菌种的产物致,再增加引物个数,进行检测验证。必要时可以增加其他方法佐证。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印附录规范性附录培养基制。

8、染本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印。硝酸银溶液见附录。显影液见附录。液氮。仪器设备扩增仪。高速冷冻离心机以上。紫外分光光度计。全温摇瓶柜精度。凝胶成像系统。.黑木耳菌种区别性及真实性水,磁力搅拌,用调节溶液,然后定容至,高压灭菌。提取缓冲液氯化钠溶解于去离子水中,加入溴代十烷基甲胺,完全溶解,再加入,用水定容至,高压灭菌。的巯基乙醇。纯化缓冲液溶于水中,慢慢加入,加热溶解,定容至。引物适用于黑木耳菌株真实木耳菌株扩增的条带与对照菌株比较,若有显著差别,遗传相。

9、备新鲜马铃薯,葡萄糖,加去离子水或相当纯度的水补齐至,自然。角瓶装标准仅供内部使用不得翻印附录资料性附录试验用引物参照引物组合序列引物序列序号引物组合上游引物序列下游引物序列本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印。硝酸银溶液见附录。显影液见附录。液氮。仪器设备扩增仪。高速冷冻离心机以上。紫外分光光度计。全温摇瓶柜精度。凝胶成像系统。.黑木耳菌种区别性及真实性氯仿异戊醇氯仿和异戊醇以的体积比进行配制,置于冰箱中保存。酚氯仿异戊醇者按的体积比进行配制,保存。乙醇溶液量。

10、种的产物致,再增加引物个数,进行检测验证。必要时可以增加其他方法佐证。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印附录规范性附录培养基制备新鲜马铃薯,葡萄糖,加去离子水或相当纯度别黑木耳菌种基因组的多态片段,鉴定菌种的真实性。试剂和材料培养基见附录。种脱氧核糖核苷酸,混合溶液。聚合酶。核酸染料。产物质量判断观察空白对照的凝胶成像照片,按下列结果判断空白对照为阴性,并且个平行试验结果致,则本次试验结果可以使用在阴性提取对照或空白对照中扩增出了片段,则说明检测过程中发生了污。

11、似系数小于,可判定供检菌种与对照菌种为不同菌种若供检菌种与对照菌种的产物致,再增加引物个数,进行检测验证。必要时可以增加其他方法佐证。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印附录规范性附录培养基制备新鲜马铃薯,葡萄糖,加去离子水或相当纯度的水补齐至,自然。角瓶装缓冲液,丙烯酰胺溶液,加水定容至。缓冲液分别称取羟甲基氨基甲烷,溶于水中,加入乙胺乙酸钠盐的水溶液,用水定容至。缓冲液量取缓冲液,加水定容至。硝酸银溶液称取硝酸银加水定容至。显色液称取氢氧化钠和甲醛加入水中,。

12、灭菌。的巯基乙醇。纯化缓冲液溶于水中,慢慢加入,加热溶解,定容至左右。本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印附录规范性附录试剂的制备除非另有说明,在分析中仅使用分析纯试剂和去离子水或相当纯度的水。羟甲基氨基甲烷,溶解于去离子水中,冷却至室温后用浓盐酸调节,加水定容至,高压灭菌。乙胺乙酸钠盐溶液水乙胺乙酸钠溶解于,需查找原因重新检测。判定分析将供检黑木耳菌株扩增的条带与对照菌株比较,若有显著差别,遗传相似系数小于,可判定供检菌种与对照菌种为不同菌种若供检菌种与对照菌。

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