1、希氏菌的检验程序见图。图致泻大肠埃希氏菌的检验程序检样和或噬菌体不裂解其他噬菌体裂解不同来源分离的菌株其裂解模式具有同性,靛基质,尿素赖氨酸,动力底层,尿素非如左述各种反应结果血清学试验增菌和分离和或噬菌体裂解各种噬菌体均不裂解氧化酶,杆菌产肠毒素大肠埃希氏菌非大肠埃希氏菌赖氨酸,靛基质,动力动力肠毒素非如左述各种反应结果非大肠埃希氏菌非致泻大肠埃希氏菌肠道侵袭性大肠埃希氏硒酸氢钠加入于蒸馏水中,为液。将磷酸氢钠和磷酸氢钠加入于蒸馏水中,为液。取基础液,液,液混合,测定。校正至,将此份溶液分别包装,在高压灭菌从高压灭菌器开始加热到取出不超过,待其冷却至常温后放入冰箱内保存。临用前将份溶液按比例混合,分装试管。份溶液混合后,其值小于,则应调整磷酸氢钠磷酸氢钠的用量和亚。

2、划线接种到鉴别培养基上,使能够出现单个菌落。如按噬菌体裂解模式结果为福氏志贺氏菌型,先用福氏多价血清做凝集试验。如呈现凝集,再分别用各型和群因子血清检查,以确定所属血清型和亚型见。如按噬菌体裂解模式结果为福氏型,鲍氏各型或痢疾型,先用福氏型血清做凝集试验。福氏型血清不凝集者,用鲍氏多价血清或痢疾型多价血清做凝集试验,如果呈现凝集,再分别用各型因子血清检查。如按噬菌体裂解模裂解模式相符者,可报告志贺氏菌血清型。.食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体诊断检验。试验方法用接种针轻轻触及培养物的表面,在盐水管内做成极稀的悬液,肉眼观察不到混浊,以每接种环内含菌数在之间为宜。将接种环灭菌后挑取菌液接种,同时再以同法接种普通斜面支作。

3、离沙门,不同来源菌株的裂解模式具有同性,或各种噬菌体均不裂解,经血清学分型确定者可分别报告为产肠毒素大肠埃希氏菌肠毒素试验结果阳性,侵袭性大肠埃希氏菌赖氨酸阴性动力阴性,可为动力阳性,产志贺毒素大肠埃希氏菌和,试验阳性或肠道致病性大肠埃希氏菌试验阳性。非如的结果均报告为非大肠埃希氏菌或非致泻大肠埃希氏菌。附录培养基及试剂亚硒酸盐胱氨酸增菌液成分蛋白胨乳糖亚硒酸氢钠胱氨酸溶液磷酸氢钠无水磷酸氢钠无水蒸馏水加至制法称取胱氨酸或胱氨酸,加入氢氧化钠溶液,使胱氨酸溶解,再加入蒸馏水,即为胱氨酸溶液。将蛋白胨乳糖胱氨酸加入于蒸馏水中,为基础液。将验非如左述的各种反应结果检样挑取可疑菌落,葡萄糖半固体增菌和分离底层产酸,斜面产碱,不产气,无动力致泻大肠埃希氏菌的检验程序致泻大肠。

4、。鲍氏志贺氏菌型是唯可被沙门氏菌裂解的菌株,该菌株只被高效价的噬菌体裂解。结果报告沙门氏菌检验的结果报告噬菌体裂解,其他噬菌体均不裂解者,经沙门氏菌血清分型后报告。各种噬菌体不裂解,生化试验结果为沙门氏菌,经沙门氏菌血清分型后报告,不可报告为未定型。志贺氏菌检验的结果报告噬菌体裂解,呈现各种裂解模式,血清学试验与裂解模式相符者,可报告志贺氏菌血清型。罕见血清型要求被噬菌体裂解,并符合志贺氏菌生化分群结果。非如的试验结果均报告非志贺氏菌。致泻若干组每组支需要测定的增菌液,第管到第管都加入号稀释管的稀释菌液各第管到第管逆序加入该稀释度的稀释菌液各。逆序向每管内加入未稀释的大肠埃希氏菌菌液。振摇各管,使加入的菌液混合均匀。在培养。振摇各管,使培养物混合均匀。挑取培养物,。

5、阳性者为大肠埃希氏菌。必要时可做如下生化试验醋酸盐克氏柠檬酸盐和粘液酸的利用试验,赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶试验,叶苷分解试验。除宋内氏菌鲍氏型为鸟氨酸脱羧酶阳性,并有少数宋内氏菌菌株可利用黏液酸埃希氏菌的检验程序见图。图致泻大肠埃希氏菌的检验程序检样和或噬菌体不裂解其他噬菌体裂解不同来源分离的菌株其裂解模式具有同性,靛基质,尿素赖氨酸,动力底层,尿素非如左述各种反应结果血清学试验增菌和分离和或噬菌体裂解各种噬菌体均不裂解氧化酶,杆菌产肠毒素大肠埃希氏菌非大肠埃希氏菌赖氨酸,靛基质,动力动力肠毒素非如左述各种反应结果非大肠埃希氏菌非致泻大肠埃希氏菌肠道侵袭性大肠埃希氏菌肠道致病性大肠埃希氏菌乳糖发酵或不发酵的菌落个噬菌体试验产志贺毒素大肠埃希氏菌报告操作步骤前增菌增菌和分。

6、酸氢钠的用量。使用前应测定其增菌灵敏度,方法见附录。不同亚硒酸盐和磷酸盐的用量见表。如按噬菌体裂解模式结果为福氏志贺氏菌型,先用福氏多价血清做凝集试验。如呈现凝集,再分别用各型和群因子血清检查,以确定所属血清型和亚型见。如按噬菌体裂解模式结果为福氏型,鲍氏各型或痢疾型,先用福营养琼脂见附录中的。营养半固体琼脂见附录中的。糖铁琼脂见附录中的。葡萄糖铵琼脂见附录中的。肠杆菌科诊断用噬菌体,种和种。必要时可再购置大肠埃希氏菌分型噬菌体种套。安瓿开启后用无菌毛细管吸出移入灭菌小试管内,如果每次使用量很少,可分装于支试管内,保存于冰箱备用。沙门氏菌因子血清,志贺氏菌分型因子血清,致泻大肠埃希氏菌分型因子血清。因子血清的种类视需要而定。检验程序沙门氏菌的检验程序沙门氏菌的检验程。

7、对照。于培养。阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长阴性者不生长,但在对照培养基上生长良好。如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果。附录增菌液灵敏度测定方法沙门氏菌增菌液灵敏度测定方法试验菌株为沙门氏菌鼠伤寒血清型,沙门氏菌肠炎血清型。干扰菌株为大肠埃希氏菌.食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体诊断检验.菌的前增菌增菌和分离按进行。沙门氏菌增菌液灵敏度的测定见附录。在食品行业从业人员的肠道沙门氏菌带菌检验时,采集的标本应增菌,不应前增菌。食物中毒标本不应前增菌,所采集的标本同时做增菌和不增菌步骤。.食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体诊断检验。中华人民共和国国家标。

8、培养物均为阴性结果。上述试验任何阳性结果均提示为大肠埃希氏菌按。检出的志贺氏菌培养物应符合该群的生化特性。福氏志贺氏菌型符合鲍氏志贺氏菌的特性。靛基质阳性的志贺氏菌血清型有痢疾型型和型,鲍氏和型。福氏志贺氏菌型的靛基质反应较弱。靛基质阴性的志贺氏菌血清型为痢疾型型型福氏型鲍氏和型宋内氏菌。鲍氏志贺氏菌型是唯可被沙门氏菌裂解的菌株,该菌株只被高效价的噬菌体裂解。结果报告沙门氏菌检验的结果报告噬菌体裂解,其他噬菌体均不裂解者,经沙门氏菌血清分型后报告。各种噬菌体不裂解,生化试验结果为沙门氏菌,经沙门氏菌血清分型后报告,不可报告为未定型。志贺氏菌检验的结果报告噬菌体裂解,呈现各种裂解模式,血清学试验硒酸氢钠加入于蒸馏水中,为液。将磷酸氢钠和磷酸氢钠加入于蒸馏水中,为液。取。

9、准食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体诊断检验发布实施前言本标准代替食品卫生微生物学检验沙门氏菌志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体检验方法。本标准与相比,主要变化如下修改了操作步骤增加了附录。食品安型血清做凝集试验。福氏型血清不凝集者,用鲍氏多价血清或痢疾型多价血清做凝集试验,如果呈现凝集,再分别用各型因子血清检查。如按噬菌体裂解模式结果为宋内氏相菌而不被宋内氏血清凝集时,可直接按噬菌体裂解模式和粗糙型菌落特征判定之。按噬菌体裂解模式结果做血清学试验不凝集者,或虽发现其被个分型因子血清凝集而与噬菌体裂解模式不相符者,或虽与噬菌体裂解模式相符但不被的噬菌体裂解者,均应做葡萄糖铵试验以与大肠埃希氏菌相鉴别。葡萄糖铵试。

10、于各类食品和食源性疾病事件样品中沙门氏菌志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的检验。本标准适用于食品行业从业人员肠道沙门氏菌和志贺及吸头和定量移液器及吸头和无菌吸管无菌毛细管无菌培养皿无菌棉签带盖的灭菌小试管载物玻片。培养基和试剂亚硒酸盐胱氨酸增菌液见附录中的。硫磺酸钠煌绿增菌液见附录中的。志贺氏菌增菌液见附录中的。营养肉汤见附录中的。如果仅有少数几株细菌作噬菌体试验,可用直径为的接种环挑取噬菌体,每满环相当于,依次加在菌斑上,尽量减少在室温放置的时间。试验结果的判定必要时例如不能测定到完整的血清型,可吸取少许剩余的蛋白胨水培养物作靛基质试验,大肠埃希氏菌般为靛基质阳性,沙门氏菌为靛基质阴性。噬菌体试验的结果见表。表噬菌体试验结果序号噬菌体裂解模式判定,志贺氏菌属的。

11、础液,液,液混合,测定。校正至,将此份溶液分别包装,在高压灭菌从高压灭菌器开始加热到取出不超过,待其冷却至常温后放入冰箱内保存。临用前将份溶液按比例混合,分装试管。份溶液混合后,其值小于,则应调整磷酸氢钠磷酸氢钠的用量和亚硒酸氢钠的用量。使用前应测定其增菌灵敏度,方法见附录。不同亚硒酸盐和磷酸盐的用量见表。如按噬菌体裂解模式结果为福氏志贺氏菌型,先用福氏多价血清做凝集试验。如呈现凝集,再分别用各型和群因子血清检查,以确定所属血清型和亚型见。如按噬菌体裂解模式结果为福氏型,鲍氏各型或痢疾型,先用福菌的前增菌增菌和分离按进行。沙门氏菌增菌液灵敏度的测定见附录。在食品行业从业人员的肠道沙门氏菌带菌检验时,采集的标本应增菌,不应前增菌。食物中毒标本不应前增菌,所采集的标本同。

12、序见图。图沙门氏菌的检验程序志贺氏菌的检验程序志贺氏菌的检验程序见图。甘露醇山梨醇检样裂解其他均不裂解非如左述的各种反应结果沙门氏菌血清学试验证实非沙门氏菌沙门氏菌血清学试验证实沙门氏菌血清学阴沟肠杆菌和少数大肠埃希氏菌。中华人民共和国国家标准食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体诊断检验发布实施前言本标准代替食品卫生微生物学检验沙门氏菌志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体检验方法。本标准与相比,主要变化如下修改了操作步骤增加了附录。食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体诊断检验范围本标准规定了应用肠杆菌科噬菌体诊断方法检验食品中沙门氏菌志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌。本标准适。

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