1、，差异有统计学意义，与组对比差异有统计学意义图。由此可见，以浓度依赖的方式诱导细胞凋亡，其诱导细胞凋亡的作用较弱。图荧光染色下细胞的形态注溶媒对照组加入溶媒实验组浓度为阳性药物对照组浓度为。图为次实验中次实验的代表性结果图。万方数据图荧光染色检测细胞的凋亡率注，示与溶媒组对比，示与低浓度组组对比数据为次实验的，。染色分析对人肺癌细胞凋亡的影响研究表明，细胞凋亡时核酸内切酶活化，降解，使细胞内含量减小，因此，在峰前产生亚二倍体峰图。细胞百分率即代表细胞凋亡百分率。染色结果表明大量细胞处于期，溶媒对照组细胞凋亡率，的与浓度为的作用于细胞后的细胞凋亡率分别为及图，诱导细胞凋亡呈浓度依赖性，浓度为处理组与溶媒对照组对比，差异有统计学意义，诱导细胞凋亡的作用较弱。

2、照组浓度为。后终止培养，弃培养基，用无菌漂洗遍，用胰酶消化并吹打成单个细胞悬液，离心，小心吸弃上清液，保留细胞沉淀，用冰再次混悬沉淀的细胞，离心，重复次用冰乙醇固定，置于冰箱中保存待检。检测时向细胞混悬液中加乙醇固定酶浓度为，水浴，然后向待测细胞混悬液中再加浓度为，振荡，使其充分混合均匀，避光保存最后目尼龙网滤过，上流式细胞仪机检测，大约计数个左右的细胞，行细胞周期分布和细胞核定量分析。以上实验重复三次。检测分析对人肺癌细胞蛋白表万方数据达的影响取对数生长期的细胞，用含的培养液进行细胞周期同步化处理。将其分成以下组实验，每组均用加入不同处理组的等量的培养基处理细胞。第组溶媒对照组含，紫花牡荆素实验组浓度分别为，阳性药物对照组浓度为。第组溶媒对照组含，蔓。

3、与溶媒组对比，示与低浓度组对比数据为次实验的，。染色检测细胞凋亡荧光显微镜下观察细胞，正常的细胞形态规则，胞质透亮呈绿色，圆形或椭圆形的核呈亮绿色或黄绿色坏死的细胞则涨大，细胞膜损坏或裂解成碎片，核呈亮红色，形态基本正常早期的凋亡细胞，形态大致正常，胞质呈绿色或稍万方数据偏红色，核形态基本正常，呈桔红色晚期的凋亡细胞则出现皱缩，胞质与细胞核均呈红色，核皱缩或碎裂。浓度为与浓度为分别处理小时细胞可见部分细胞体积明显变小，细胞外形皱折，结构模糊，细胞质减少细胞核染色质固缩偏向边或碎裂，呈细密的桔黄色或红色荧光，细胞膜完整，表面可见牙状突起，呈现典型的凋亡细胞形态，并可见细胞碎片图。细胞的自然凋亡率，浓度为与浓度为分别处理小时后的凋亡率为。组与溶媒对照组对比。

4、学改变染色流式细胞术测得溶媒对照组万方数据的组与的组细胞凋亡率分别为及，呈浓度依赖性，组与溶媒对照组对比，差异有统计学意义结果表明经处理的细胞蛋白表达未见明显变化。结论紫花牡荆素具有抑制人肺癌细胞生长和诱导细胞凋亡的作用，呈浓度依赖性。紫花牡荆素诱导人肺癌细胞生长抑制和凋亡的作用机制涉及下调细胞蛋白的表达，呈浓度和时间依赖性。蔓荆子总黄酮具有抑制细胞生长和诱导细胞凋亡的作用，呈浓度依赖性。蔓荆子总黄酮诱导生长抑制和细胞凋亡的作用机制与蛋白表达无关。关键词紫花牡荆素蔓荆子总黄酮肺癌细胞凋亡万方数据培养基进行细胞周期同步化处理。分别用加入不同处理组的等量的培养基处理细胞，其中溶媒对照组含，紫花牡荆素实验组浓度分别为，蔓荆子总黄酮实验组浓度分别为，阳性药物对。

5、不同浓度对细胞蛋白表达的影响荧光染色观察细胞凋亡形态取分别处理检测不同时间对细胞蛋白表达的影响万方数据结果平皿集落形成法测定对人肺癌细胞生长的影响人肺癌细胞经浓度为的，的处理天后，可见细胞集落个数及集落大小较溶媒对照组明显减少图，集落抑制率分别为和表，与溶媒对照组对比，对细胞集落形成具有抑制作用图。抑制细胞集落形成的为。说明对细胞生长具有抑制作用，其抑制作用呈浓度依赖性，当浓度达到与作用强度相当。图抑制细胞集落形成注溶媒对照组加入溶媒实验组浓度为阳性药物对照组浓度为。万方数据表平皿集落形成法测定不同浓度对细胞生长的影响组别集落数抑制率溶媒对照组组组组组组组组注，示与溶媒组对比，示与低浓度组对比数据为次实验的，。图平皿集落形成法测定对细胞生长的影响注，示。

6、。图染色检测肺癌细胞凋亡率注溶媒对照组加入溶媒实验组浓度为阳性药物对照组浓度为。图为次实验中次实验的代表性结果图。万方数据硕士学位论文蔓荆子总黄酮及紫花牡荆素对肺癌细胞生长和凋亡的影响年月分类号密级编号研究生姓名胡晓楠指导教师姓名职称安东建教授学科专业名称内科学研究方向肿瘤学万方数据南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名年月日。

7、荆子总黄酮实验组浓度分别为，阳性药物对照组浓度为。第组为补充实验，分别用终浓度接近值，作用细胞。弃培养基，用冰洗遍后倒置培养瓶，用滤纸尽量吸尽残留液体，在培养瓶底面均匀加上细胞裂解液，置于冰摇床上裂解。用细胞刮将培养瓶底面细胞刮下，收集至管中，下高速离心，吸取上清液以管分装，冰箱保存。根据蛋白浓度测定试剂盒说明，在酶联免疫检测仪上定量检测每个样本的蛋白量。根据蛋白含量相等的原则计算出每组样本的上样量，按样本蛋白上样缓冲液的比例将二者混匀，沸水浴，以每孔的蛋白量上样。根据凝胶制备试剂盒说明配制的浓缩胶和分离胶为，将彩色预染及混合后的样本起上样，冰裕中电泳，电压时间选择为浓缩胶恒压电泳，分离胶恒压电泳，待溴酚兰指示剂距胶底部约处，停止电泳。电泳结束后，依据。

8、目的检定蔓荆子总黄酮，及其活性成分紫花牡荆素，对人肺癌细胞生长抑制作用和诱导细胞凋亡作用探讨及诱导细胞生长抑制和凋亡的机制是否涉及下调叉头盒转录因子蛋白表达。方法分别用不同浓度及处理体外培养的细胞，平皿集落形成法测定及对细胞生长的抑制率荧光染色观察细胞凋亡形态碘化丙啶，染色流式细胞术，检测细胞凋亡率及细胞周期检测蛋白表达水平。结果平皿集落形成法测定的组与的组，细胞的集落抑制率分别为和，呈浓度依赖性，为，与溶媒对照组对比染色荧光显微镜下观察的组与的组，可见细胞呈典型凋亡细胞形态学改变染色流式细胞术测得溶媒对照组的组与的组的细胞凋亡率分别为及，呈浓度依赖性，的组与溶媒对照组对比，差异有统计学意义检测出下调细胞蛋白表达，呈浓度和时间依赖性，与溶媒对照组对比，。

9、及分子量比对指示剂切胶，用湿转法将蛋白转移到膜上。在冰裕中转膜，电流时间选择为恒流转移。转膜结束后，用丽春红染色膜，检测转膜的效果，脱色。在室温下，用脱脂牛奶液对膜封闭。将按相应的稀释比例用脱脂牛奶万方数据稀释，孵育过夜。用液洗遍，每遍洗。将相应的二抗按的比例用脱脂牛奶稀释，室温孵育，用液洗膜遍，每遍洗。用化学发光剂处理激发荧光，在暗室中进行压片显影定影洗片。以上实验重复次。统计学处理实验数据录入社会科学统计软件建立数据库，采用均数标准差表示各组实验数据，用方式行方差分析。各组均数间的两两比较用法，有统计学意义。万方数据技术路线浓度处理浓度处理体外培养细胞浓度的处理天平皿集落形成法检测对细胞生长的影响，计算浓度的处理天流式细胞术检测细胞周期及凋亡率检测。

10、师签名年月日年月日万方数据目录主要缩略语英文索引二中文摘要三英文摘要四论文正文前言二材料和方法材料方法实验液的配制细胞培养测定及对细胞生长的抑制率观察及对细胞凋亡形态的影响分析及对细胞凋亡及细胞周期的影响检测及对细胞蛋白表达的影响统计学处理三技术路线四结果五讨论六结论七参考文献五综述六硕士期间发表论文七致谢万方数据主要缩略词英文索引缩略词英文全称中文全称蔓荆子总黄酮紫花牡荆素叉头盒转录因子碘化丙啶流式细胞术吖啶橙溴化乙锭顺铂半数抑制浓度非小细胞肺癌小牛血清二甲基亚砜磷酸盐缓冲液抑制率社会科学统计软件标准差活性氧细胞周期蛋白依赖激酶叉头盒转录因子多药耐药性多甲氧基黄酮万方数据摘要蔓荆子总黄酮及紫花牡荆素对肺癌细胞生长和凋亡的影响研究生胡晓楠导师安东建教授。

11、差异有统计学意义。平皿集落形成法测定的组与的组，集落抑制率分别为和，呈浓度依赖性，为，与溶媒对照组对比染色荧光显微镜下观察的组与的组，可见细胞呈典型凋亡细胞形态学改变染色流式细胞术测得溶媒对照组万方数据的组与的组细胞凋亡率分别为及，呈浓度依赖性，组与溶媒对照组对比，差异有统计学意义结果表明经处理的细胞蛋白表达未见明显变化。结论紫花牡荆素具有抑制人肺癌细胞生长和诱导细胞凋亡的作用，呈浓度依赖性。紫花牡荆素诱导人肺癌细胞生长抑制和凋亡的作用机制涉及下调细胞蛋白的表达，呈浓度和时间依赖性。蔓荆子总黄酮具有抑制细胞生长和诱导细胞凋亡的作用，呈浓度依赖性。蔓荆子总黄酮诱导生长抑制和细胞凋亡的作用机制与蛋白表达无关。关键词紫花牡荆素蔓荆子总黄酮肺癌细胞凋亡万方数据。

12、南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读博硕士学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留使用学位论文的规定，即学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印缩印或其它手段保留学位论文学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入中国优秀博硕士学位论文全文数据库，并按中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到中国学位论文全文数据库，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。作者签名导。

参考资料：

[1]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18030（第21页，发表于2022-06-24）

[2]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[3]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[4]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[5]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[6]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[7]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[8]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[9]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[10]绘本故事：讨厌的肥猫（优） 编号18060（第21页，发表于2022-06-24）

[11]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

[12]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

[13]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18078（第26页，发表于2022-06-24）

[14]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

[15]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

[16]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号250（第26页，发表于2022-06-24）

[17]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

[18]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号176（第26页，发表于2022-06-24）

[19]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）

[20]绘本故事：我变成一只喷火龙了（优） 编号18060（第26页，发表于2022-06-24）