1、怀疑是实验室污染。为了证实是否实验室污染,在无菌的条件下接种该分离出的活的微生物到另个正常的对照样品,密封,在培养。如果发生膨胀或产品变质,这些微生物就可能不是来自于原始样品。如果样品仍然是平坦的,无菌操作打开样品包装并按上述步骤做再次培养如果同种微生物被再次发现并且产品是正常的,认为该产品商业无菌,因为这种微生物在正常的保存,导致产品的气味和组织形态呈现异常。包装容器密封性良好时,在培养条件下若只有芽胞杆菌生长,且它们的耐热性不高于肉毒梭菌,则表明生产过程中杀菌不足。培养出现杆菌和球菌真菌的混合菌落,表明包装容器发生泄漏。也有可能是杀菌不足所致,但在这种情况下同批产品的膨胀率将很高。在或溴甲酚紫葡萄糖肉汤培养观察产酸产气情况,如有产酸,表明是有嗜中温。

2、液,复染,水洗待干镜检。低酸性罐藏食品的接种培养大于对低酸性罐藏食品,每份样品接种管预先加热到并迅速冷却到室温的庖肉培养基内同时接种管溴甲酚紫葡萄糖肉汤。每管接种样品液体样品为,固体为,两者皆有时,应各取半。培养条件见表。表低酸性罐藏食品接种的庖肉培养基和溴甲酚紫葡萄糖肉汤培养基管数培养温度培养时间庖肉培养基庖肉培养基溴甲酚紫葡萄糖肉汤溴甲酚紫葡萄糖肉汤经过表规定的培养条件培养后,记录每管有无微生物生长。如果没有微生物生长,则记录后弃去。匀的液相部分备用。对于稠厚或半稠厚制品以及难以从中分出汁液的制品如糖浆果酱果冻油脂等,取部分样品在均质器或研钵中研磨,如果研磨后的样品仍太稠厚,加入等量的无菌蒸馏水,混匀备用。测定将电极插入被测试样液中,并将计的温度校。

3、生长并产生带腐烂气味的气体,镜检可见芽胞,表明腐败可能是由肉毒梭菌生孢梭菌或产气荚膜梭菌引起的。有需要可以进步进行肉毒毒素检测。酸性罐藏食品的变质通常是由于无芽胞的乳杆菌和酵母所致。般低于的情况下不会发生由芽胞杆菌引起的变质,但变质的番茄酱或番茄汁罐头并不出现膨胀,但有腐臭味,伴有或不伴有降低,般是由于需氧的芽胞杆菌所致。就是种嗜热厌氧菌,能够引起膨胀和产品的腐烂气味。嗜热厌氧菌也能产气,由于在细菌开始生长之后迅速增殖,可能混淆膨胀是由于氢气引起的还是嗜热厌氧菌产气引起的。化学物质分解将产生氧化碳,尤其是集中发生在含糖和些酸的食品如番茄酱糖蜜甜馅和高糖的水果的罐头中。这种分解速度随着温度上升而加快。灭菌的真空包装和正常的产品直接涂片,分离出任何微生物应。

4、态食品可直接涂片或用少量灭菌生理盐水稀释后涂片,待干后用火焰固定。油脂性食品涂片自然干燥并火焰固定后,用甲苯流洗,自然干燥。染色镜检对中涂片用结晶紫染色液进行单染色,干燥后镜检,至少观察个视野,记录菌体的形态特征以及每个视野的菌数。与同批冷藏保存对照样品相比,判断是否有明显的微生物增殖现象。菌数有百倍或百倍以上的增长则判为明显增殖。结果判定样品经保温试验未出现泄漏保温后开启,经感官检验测定涂片镜检,确证无微生物增殖现象,则可报告该样品为商业无菌。样品经保温试验出现泄漏保温后开启,经感官检验测定涂片镜检,确证有微生物增殖现象,则可报告该样,滴加结晶紫染液,染,水洗。滴加革兰氏碘液,作用,水洗。滴加乙醇脱色约,直至染色液被洗掉,不要过分脱色,水洗。滴加复染。

5、。若需核查样品出现膨胀或感官异常微生物增殖等原因,可取样品内容物的留样按照附录进行接种培养并报告。若需判定样品包装容器是否出现泄漏,可取开启后的样品按照附录进行密封性检查并报告。附录培养基和试剂无菌生理盐水成分氯化钠蒸馏水制法称取氯化钠溶于蒸馏水中,高压灭菌。结晶紫染色液成分结晶紫乙醇草酸铵溶液制法将结晶紫完全溶解于乙醇中,再与草酸铵溶液混合。染色法将涂片在酒精灯火焰上固定,滴加结晶紫染液,染,水洗批产品的膨胀率将很高。在或溴甲酚紫葡萄糖肉汤培养观察产酸产气情况,如有产酸,表明是有嗜中温的微生物,如嗜温耐酸芽胞杆菌,或者嗜热微生物,如嗜热脂肪芽胞杆菌生长。在的庖肉培养基上有细菌生长并产气,发出腐烂气味,表明样品腐败是由嗜热的厌氧梭菌所致。在庖肉培养基上。

6、的微生物,如嗜温耐酸芽胞杆菌,或者嗜热微生物,如嗜热脂肪芽胞杆菌生长。在的庖肉培养基上有细菌生长并产气,发出腐烂气味,表明样品腐败是由嗜热的厌氧梭菌所致。在庖肉培养基上生长并产生带腐烂气味的气体,镜检可见芽胞,表明腐败可能是由肉毒梭菌生孢梭菌和运送过程中不生长。如果食品本身发生混浊,肉汤培养可能得不出确定性结论,这种情况需进步培养以确定是否有微生物生长。镀锡薄钢板食品空罐密封性检验方法减压试漏将样品包装罐洗净,烘干。在烘干的空罐内注入清水至容积的,将带橡胶圈的有机玻璃板放置罐头开启端的卷边上,使其保持密封。启动真空泵,关闭放气阀,用手按住盖板,控制抽气,使真空表从升到的时间在以上,并保持此真空度以上。倾斜并仔细观察罐体,尤其是卷边及焊缝处,有无气泡产生。

7、器调节到被测液的温度。如果仪器没有温度校正系统,被测试样液的温度应调到的范围之内,采用适合于所用计的步骤进行测定。当读数稳定后,从仪器的标度上直接读出,精确到单位。同个制备试样至少进行两次测定。两次测定结果之差应不超过单位。取两次测定的算术平均值作为结果,报告精确到单位。分析结果与同批中冷藏保存对照样品相比,比较是否有显著差异。相差及以上判为显著差异。涂片染色镜检涂片取样品内容物进行涂片。带汤汁的样品可用接种环挑取汤汁涂于载.食品安全国家标准食品微生物学检验商业无菌检验.多罐藏食品中含有嗜热菌,在正常的储存条件下不生长,但当产品暴露于较高的温度时,嗜热菌就会生长并引起腐败。嗜热耐酸的芽胞杆菌和嗜热脂肪芽胞杆菌分别在酸性和低酸性的食品中引起腐败但是并不出。

8、面,用于后续的革兰氏染色镜检。同时接,关闭放气阀,用手按住盖板,控制抽气,使真空表从升到的时间在以上,并保持此真空度以上。倾斜并仔细观察罐体,尤其是卷边及焊缝处,有无气泡产生。凡同部位连续产生气泡,应判断为泄漏,记录漏气的时间和真空度,并标注漏气部位。加压试漏将样品包装罐洗净,烘干。用橡皮塞将空罐的开孔塞紧,将空罐浸没在盛水玻璃缸中,开动空气压缩机,慢慢开启阀门,使罐内压力逐渐加大,直至压力升至并保持。仔细观察罐体,尤其是卷边及焊缝处,有无气泡产生。凡同部位连续产生气泡,应判断为泄漏,记录漏气开始的时间和压力,并标注漏气部位如果在培养条件下在酸性肉汤或麦芽浸膏汤中有微生物生长,将各阳性管分别接种块营养琼脂或沙氏葡萄糖琼脂平板,块作需氧培养,另块作厌氧培。

9、现包装容器膨胀。在培养不会引起包装容器外观的改变,但会产生臭味,伴有或不伴有的降低。番茄梨无花果和菠萝等类罐头的腐败变质有时是由于巴斯德梭菌引起。嗜热解糖梭状芽胞杆菌就是种嗜热厌氧菌,能够引起膨胀和产品的腐烂气味。嗜热厌氧菌也能产气,由于在细菌开始生长之后迅速增殖,可能混淆膨胀是由于氢气引起的还是嗜热厌氧菌产气引起的。化学物质分解将产生氧化碳,尤其是集中发生在含糖和些酸的食品如番茄酱糖蜜甜馅和高糖的水果的罐头中。这种分解速度随。仔细观察罐体,尤其是卷边及焊缝处,有无气泡产生。凡同部位连续产生气泡,应判断为泄漏,记录漏气开始的时间和压力,并标注漏气部位样品经保温试验出现泄漏保温后开启,经感官检验测定涂片镜检,确证有微生物增殖现象,则可报告该样品为非商业无。

10、汤不生长生长营养琼脂或沙氏葡萄糖琼脂需氧厌氧营养琼脂小斜面酸性肉汤或麦测定留样,至少置灭菌容器,保藏感官检查涂片染色镜检异常原因分析选做项目符合商业无菌不符合商业无菌报告,保温,发现膨胀立即剔出,开启检查并记录。保温每个批次取个样品置冰箱保存作为对照,将其余样品在下保温。如果在培养条件下在酸性肉汤或麦芽浸膏汤中有微生物生长,将各阳性管分别接种块营养琼脂或沙氏葡萄糖琼脂平板,块作需氧培养,另块作厌氧培养。如果在培养条件下,酸性肉汤中有微生物生长,将各阳性管分别接种块营养琼脂平板,块作需氧培养,另块作厌氧培养。对有微生物生长的平板进行染色涂片镜检,并报告镜检所见微生物型别。培养程序见图。挑取需氧培养的营养琼脂或沙氏葡萄糖琼脂平板中的单个菌落,接种营养琼脂小。

11、养。如果在培养条件下,酸。附录异常原因分析选做项目培养基和试剂溴甲酚紫葡萄糖肉汤成分蛋白胨牛肉浸膏葡萄糖氯化钠溴甲酚紫或乙醇溶液蒸馏水制法将除溴甲酚紫外的各成分加热搅拌溶解,校正至,加入溴甲酚紫,分装于带有小倒管的试管中,每管,高压灭菌。庖肉培养基成分牛肉浸液蛋白胨酵母膏葡萄糖磷酸氢钠可溶性淀粉碎肉渣适量制法称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉,加蒸馏水和氢氧化钠溶液,搅拌煮沸,充分冷却,除去表层脂肪,澄清,过滤,加水补足至,即为牛肉浸液。加入除碎肉渣外的各种成分,校正至。.食品安全国家标准食品微生物学检验商业无菌检验。测定样品处理液态制品混匀备用,有固相和液相的制品则取和运送过程中不生长。如果食品本身发生混浊,肉汤培养可能得不出确定性结论,这种情况需进步培养。

12、凡同部位连续产生气泡,应判断为泄漏,记录漏气的时间和真空度,并标注漏气部位。加压试漏将样品包装罐洗净,烘干。用橡皮塞将空罐的开孔塞紧,将空罐浸没在盛水玻璃缸中,开动空气压缩机,慢慢开启阀门,使罐内压力逐渐加大,直至压力升至并保持图低酸性罐藏食品接种培养程序,或需氧,厌氧,,需氧,厌氧,样品庖肉培养基和溴甲酚紫葡萄糖肉汤不生长生长肝小牛肉琼脂或营养琼脂肝小牛肉琼脂或营养琼脂庖肉培养基营养琼脂小斜面庖肉培养基镜检镜检镜检肝小牛肉琼脂或营养琼脂厌氧肝小牛肉琼脂或营养琼脂需氧不生长生长肝小牛肉琼脂或营养琼脂肝小牛肉琼脂或营养琼脂庖肉培养基营养琼脂小斜面庖肉培养基镜检镜检镜检肝小牛肉琼脂或营养琼脂厌氧肝小牛肉琼脂或营养琼脂需氧图酸性罐藏食品接种培养程序样品酸性肉。

参考资料：

[1]DB13T 1177-2010 食品冷链物流技术与管理规范（第12页，发表于2022-06-26）

[2]GB 4789.31-2013 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体诊断检验（第17页，发表于2022-06-26）

[3]GBT 4789.39-2008 食品卫生微生物学检验 粪大肠菌群计数（第7页，发表于2022-06-26）

[4]GB 24542-2009 坠落防护 带刚性导轨的自锁器（第12页，发表于2022-06-26）

[5]GBT 23465-2009 呼吸防护用品 实用性能评价（第14页，发表于2022-06-26）

[6]SNT 2562-2010 食品中霍乱弧菌分群检测 MPCR-DHPLC法（第9页，发表于2022-06-26）

[7]GB 15193.5-2014 食品安全国家标准 哺乳动物红细胞微核试验（第6页，发表于2022-06-26）

[8]GB 4789.7-2013 食品安全国家标准 食品微生物学检验 副溶血性弧菌检验（第15页，发表于2022-06-26）

[9]GB 4789.9-2014 食品安全国家标准 食品微生物学检验 空肠弯曲菌检验（第13页，发表于2022-06-26）

[10]SNT 3384-2012 出口食品中空肠弯曲菌药物敏感性的测定 微量稀释法（第8页，发表于2022-06-26）

[11]SNT 3491-2013 进口饲料和饲料添加剂标签查验规程（第7页，发表于2022-06-26）

[12]GB 15193.6-2014 食品安全国家标准 哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验（第7页，发表于2022-06-26）

[13]DBS22 027-2014 食品安全地方标准 食品中肠球菌的定性定量检验（第14页，发表于2022-06-26）

[14]DBS50 015-2013 食品安全地方标准 食品中大红粉的检测方法 高效液相色谱法（第10页，发表于2022-06-26）

[15]DBJ440100T 42-2009 食品生产溯源系统管理要求（第22页，发表于2022-06-26）

[16]GB 4789.39-2013 食品安全国家标准 食品微生物学检验 粪大肠菌群计数（第9页，发表于2022-06-26）

[17]GHT 18796-2012 蜂蜜（第10页，发表于2022-06-26）

[18]GB 24544-2009 坠落防护 速差自控器（第14页，发表于2022-06-26）

[19]GB 15193.16-2014 食品安全国家标准 毒物动力学试验（第8页，发表于2022-06-26）

[20]GB 15193.27-2015 食品安全国家标准 致癌试验（第6页，发表于2022-06-26）