1、养,培养后选取单个菌落进行纯培养。培养挑取个或以上的菌落接种于双歧杆菌琼脂平板,厌氧,培养。.食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌的鉴氢氧化钠溶液相当于的乙酸。酸使用液将经标定的乙酸标准溶液用水稀释至。酸标准溶液准确吸取含量为的乳酸,加水稀释至,摇匀,配成的乳酸标准溶液。标定方法为准确称取乳酸,加水,加入氢氧化钠滴定液,煮沸,加入酚酞指示液滴,同时用硫酸滴定液相色谱见图,乙酸标准溶液的气相色谱见图。图酸标准溶液的气相色谱图酸标准溶液的气相果计算样品培养液中乙酸或乳酸的含量按式计算标空样式中样品培养液中乙酸或乳酸的含量,单位为微摩尔每毫升样样品培养液中乙酸或乳酸的峰面积。

2、液.食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌的鉴定。酸分析纯体积比。乙酸分析纯体积比。酸分析纯。酸标准溶液吸取分析纯冰乙酸,移入容量瓶中,加水至刻度,标定,标定方法见附录,此溶液浓度约为。酸标准使用液将经标定的乙酸标准溶液用水稀释至。酸标准溶液吸液体培养基,同时用未接种菌的液体培养基做空白对照,厌氧,培养。准液的配酸标准溶液准确吸取乙酸加水稀释至,摇匀,进行标定,配成约的乙酸标准溶液。标定方法为准确称取乙酸,加水,酚酞指示液滴,用氢氧化钠溶液滴定,并将滴定结果用空白试验校正。国家标准食品微生物学检验双歧杆菌的鉴定。鉴定程序双歧杆菌鉴定程序见图。食品安全国家标准食品微生物学。

3、附录中的。醇分析纯。氯甲烷分析纯。氢氧化钠溶液相当于的乙酸。酸使用液将经标定的乙酸标准溶液用水稀释至。酸标准溶液准确吸取含量为的乳酸,加水稀释至,摇匀,配成的乳酸标准溶液。标定方法为准确称取乳酸,加水,加入氢氧化钠滴定液,煮沸,加入酚酞指示液滴,同时用硫酸滴定液阿糖醇阿糖醇葡萄糖酸钠酮基葡萄糖酸钠酮基葡萄糖酸钠注表示以上菌株阳性表示以上菌株阴性表示以上菌株阳性。附录气相色谱法测定双歧杆菌的有机酸代谢歧杆菌培养液制备挑取双歧杆菌琼脂平板上纯培养的双歧杆菌接种于.食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌的鉴定.棒在双歧杆菌琼脂平板进行表面涂布,每个稀释度作两个平皿。置温箱内培。

4、菌。临用时加热熔化琼脂,冷至时使用。体培分蛋白胨萄糖化反应检测,不同双歧杆菌菌种主要生化反应见附录。机酸代谢产物测定气相色谱法测定双歧杆菌的有机酸代谢产物,见附录。据待鉴定菌种的活菌数,选择个连续的适宜稀释度,每个稀释度吸取稀释液,用棒在双歧杆菌琼脂平板进行表面涂布,每个稀释度作两个平皿。置温箱内培养.食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌的鉴定.氢氧化钠溶液相当于的乙酸。酸使用液将经标定的乙酸标准溶液用水稀释至。酸标准溶液准确吸取含量为的乳酸,加水稀释至,摇匀,配成的乳酸标准溶液。标定方法为准确称取乳酸,加水,加入氢氧化钠滴定液,煮沸,加入酚酞指示液滴,同时用硫酸滴定。

5、存在,用丙酮定容至,混匀后备用。同样操作步骤处理乙酸标准和空白培养液。酸的处理取双歧杆菌培养液放入比色管中,水浴,加入体积比硫酸溶液,混匀,加入甲醇,于水浴后加取分析纯乳酸,移入容量瓶中,加水至刻度,标定,标定方法见附录,此溶液浓度约为。检及生化片镜检双歧杆菌菌体为革兰氏染色阳性,不抗酸无芽孢,无动力,菌体形态多样,呈短杆状纤细杆状或球形,可形成各种分支或分叉形态。化鉴定过氧化氢酶试验为阴性。选取纯培养平板上的个单个菌落,分别进行温培养箱气相色谱仪配检测器冰箱天平感量无菌试管无菌吸管具刻度具刻度或微量移液器及配套吸头无菌锥形瓶。培养基和试剂歧杆菌培养基见附录中的。体培养基。

6、空空白培养液中乙酸或乳酸的峰面积标乙酸糖卫矛醇肌醇甘露醇山梨醇甲基甘露糖甙甲基葡萄糖甙乙酰葡萄糖胺苦杏仁甙扁桃甙熊果甙叶灵水杨甙柳醇纤维糖麦芽糖乳糖蜜糖蔗糖海藻糖覃糖,加氯甲烷,振摇,离心,取氯甲烷层分析。同样操作步骤处理乳酸标准和空白培养液。相色谱条件色谱柱长,内径的玻璃柱,填装涂有吐温的目柱温汽化室检测器载气进样量外标法峰面积定量。乳酸标准溶液的温培养箱气相色谱仪配检测器冰箱天平感量无菌试管无菌吸管具刻度具刻度或微量移液器及配套吸头无菌锥形瓶。培养基和试剂歧杆菌培养基见附录中的。体培养基见附录中的。醇分析纯。氯甲烷分析纯。滴定,并将滴定结果用空白试验校正。氢氧化钠溶液。

7、检验双歧杆菌的鉴定范围本标准规定了食品中双歧杆菌的鉴定方法。本标准适用于食品中双歧杆菌的鉴定。设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下,标定方法见附录,此溶液浓度约为。食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌的鉴定范围本标准规定了食品中双歧杆菌的鉴定方法。本标准适用于食品中双歧杆菌的鉴定。设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下恒温培养箱温培养箱气相色谱仪配检测器冰箱天平感量无菌试管无菌吸管具刻度具刻度或微量移液器及配套吸头无菌锥形瓶。培养基和试剂歧杆菌培养基见附录中的。体培养基见附录中的。醇分析纯。氯甲烷分析纯。检及生化片。

8、春双歧杆菌动物双歧杆菌短双歧杆菌甘油赤癣醇阿拉伯糖阿拉伯糖核糖木糖木糖阿东醇甲基木糖甙半乳糖葡萄糖果糖甘露糖山梨糖鼠液体培养基,同时用未接种菌的液体培养基做空白对照,厌氧,培养。准液的配酸标准溶液准确吸取乙酸加水稀释至,摇匀,进行标定,配成约的乙酸标准溶液。标定方法为准确称取乙酸,加水,酚酞指示液滴,用氢氧化钠溶液滴定,并将滴定结果用空白试验校正。粉半胱氨酸溶液维生素溶液化血红素溶液加蒸馏水至溶液称取无水氯化钙,硫酸镁,磷酸氢钾,磷酸氢钾,碳酸氢钠,氯化钠,加蒸馏水至。化血红素溶液称取氯化血红素于氢氧化钠中,加蒸馏水至,高压灭菌。生素溶液称取维生素,加无水乙醇,过滤除培养。

9、检双歧杆菌菌体为革兰氏染色阳性,不抗酸无芽孢,无动力,菌体形态多样,呈短杆状纤细杆状或球形,可形成各种分支或分叉形态。化鉴定过氧化氢酶试验为阴性。选取纯培养平板上的个单个菌落,分别进行生化反应检测,不同双歧杆菌菌种主要生化反应见附录。机酸代谢产物测定气相色谱法测定双歧杆菌的有准或乳酸标准的峰面积乙酸标准或乳酸标准的浓度,单位为微摩尔每毫升。许差相对相差。果判定如果乙酸与乳酸比值大于,可判定为是双歧杆菌的有机酸代谢产物据待鉴定菌种的活菌数,选择个连续的适宜稀释度,每个稀释度吸取稀释液将上清液转入另试管中,下层溶液用丙酮和乙醚重复提取次,合并有机相,于水浴中用氮气吹至少量溶液。

10、用液将经标定的乙酸标准溶液用水稀释至。酸标准溶液吸取分析纯乳酸,移入容量瓶中,加水至刻度,标菊糖菊根粉松糖棉籽糖表续双歧杆菌菌种主要生化反应编号项目两歧双歧杆菌婴儿双歧杆菌长双歧杆菌青春双歧杆菌动物双歧杆菌短双歧杆菌淀粉肝糖糖原木糖醇龙胆糖松糖来苏糖塔格糖岩糖岩糖.食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌的鉴定.氢氧化钠溶液相当于的乙酸。酸使用液将经标定的乙酸标准溶液用水稀释至。酸标准溶液准确吸取含量为的乳酸,加水稀释至,摇匀,配成的乳酸标准溶液。标定方法为准确称取乳酸,加水,加入氢氧化钠滴定液,煮沸,加入酚酞指示液滴,同时用硫酸滴定液目两歧双歧杆菌婴儿双歧杆菌长双歧杆菌。

11、后选取单个菌落进行纯培养。培养挑取个或以上的菌落接种于双歧杆菌琼脂平板,厌氧,培养。附录培歧杆菌琼脂培养基分蛋白胨母浸膏萄糖溶性淀粉氯化钠红柿浸出液吐温粉脂粉加蒸馏水至胱氨酸盐溶液称取半胱氨酸,加入盐酸,使半胱氨酸全部溶解,配制成半胱氨酸盐溶液。红柿浸出液将新取分析纯乳酸,移入容量瓶中,加水至刻度,标定,标定方法见附录,此溶液浓度约为。检及生化片镜检双歧杆菌菌体为革兰氏染色阳性,不抗酸无芽孢,无动力,菌体形态多样,呈短杆状纤细杆状或球形,可形成各种分支或分叉形态。化鉴定过氧化氢酶试验为阴性。选取纯培养平板上的个单个菌落,分别进行温培养箱气相色谱仪配检测器冰箱天平感量无菌试。

12、当于的乳酸。酸使用液将乳酸标准溶液用水稀释至。酸的处理取双歧杆菌培养液放入离心管中,加入体积比硫酸溶液,混匀,加入丙酮,混匀后加过量氯化钠,剧烈振摇,再加入乙醚,振摇后,于离心液体培养基,同时用未接种菌的液体培养基做空白对照,厌氧,培养。准液的配酸标准溶液准确吸取乙酸加水稀释至,摇匀,进行标定,配成约的乙酸标准溶液。标定方法为准确称取乙酸,加水,酚酞指示液滴,用氢氧化钠溶液滴定,并将滴定结果用空白试验校正。有机酸代谢产物,见附录。酸分析纯体积比。乙酸分析纯体积比。酸分析纯。酸标准溶液吸取分析纯冰乙酸,移入容量瓶中,加水至刻度,标定,标定方法见附录,此溶液浓度约为。酸标准使。

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